HE染色不管怎么操作,始終無(wú)法染色或淡染答:這種情況一般因?yàn)榻M織固定時(shí)采用了酸性甲醛;或者組織在甲醛中浸泡時(shí)間太長(zhǎng);或者久置的甲醛變性分解為甲酸。補(bǔ)救:防患于未然,,要么使用新鮮的中性甲醛固定,要么在存放的甲醛中加一點(diǎn)碳酸鈉中和甲酸,。對(duì)于已經(jīng)固定的組織可考慮再次固定,;對(duì)于已經(jīng)制出的片子,染色前采用5%重鉻酸鉀溶液浸泡半小時(shí)以上,,然后自來水漂洗5min,,可改善染色。也可以將切片放入3%硫酸鐵銨溶液中,,補(bǔ)充染色媒介,,增強(qiáng)蘇木素與組織的親和力(蘇木素染色必須要媒介才能染上,單純的蘇木素與組織的親和力很弱),。HE染色結(jié)果如果使用計(jì)算機(jī)分析軟件分析?云南結(jié)果客觀的HE染色
HE染色病理技術(shù)中**常用的一種方法,,通過它可以做出病理診斷和發(fā)現(xiàn)尋求別的輔助方法,,以達(dá)到準(zhǔn)確,完整的病理診斷,。一,、染色目的 病理學(xué)的所有切片,都必須通過一種以上的染料,,通過各種不同的方法,,將切片中各種不同的物質(zhì),在不同染液的作用下,,將其顯示出來,,使之在光學(xué)顯微鏡下,能夠完全的觀看各種結(jié)構(gòu),。例如,,HE染色,好質(zhì)量的切片可以清晰地顯示出多不同的結(jié)構(gòu),,細(xì)胞核著藍(lán)黑色,,細(xì)胞漿著粉紅色,軟骨著藍(lán)色等,。清晰的結(jié)構(gòu)為診斷提供的依據(jù),,因此,染色技術(shù)也是病理技術(shù)中的重要組成部分,,必須不斷地總結(jié),,方能提高。福建專業(yè)的HE染色關(guān)于HE染色,,常用的結(jié)果分析原理,。
HE染色結(jié)果判讀:細(xì)胞核被蘇木精染成鮮明的藍(lán)色,軟骨基質(zhì),、鈣鹽顆粒呈深藍(lán)色,,粘液呈灰藍(lán)色,。細(xì)胞漿被伊紅染成深淺不同的粉紅色至桃紅色,胞漿內(nèi)嗜酸性顆粒呈反光強(qiáng)的鮮紅色,。膠原纖維呈淡粉紅色,,彈力纖維呈亮粉紅色,紅血球呈橘紅色,,蛋白性液體呈粉紅色,。著色狀況與組織或細(xì)胞的種類有關(guān),也隨其生活周期及病理變化而改變,。例如,,細(xì)胞在新生時(shí)期胞漿對(duì)伊紅著色較淡或輕度嗜堿,當(dāng)其衰老時(shí)或發(fā)生退行性變則呈現(xiàn)嗜伊紅濃染,。膠原纖維在老化和出現(xiàn)透明變性時(shí),,伊紅著色由淺變深。H-E染色評(píng)定標(biāo)準(zhǔn):(1)切片完整,,厚度4-6微米,,厚薄均勻,無(wú)皺褶無(wú)刀痕,;(2)染色核漿分明,,紅藍(lán)適度,透明潔凈,,封裱美觀,。
HE染色常見問題:切片染色不均勻,有片狀的弱著**存在答:(1)取材時(shí)組織太厚,,固定過久,,導(dǎo)致深部組織固定不佳,而表淺組織過度固定,,而透明,、脫水、浸蠟均是如此,,這樣在后期染色時(shí)就會(huì)出現(xiàn)染色不均勻,。應(yīng)該將厚的組織剖開固定。(2)制片過程有問題,,切片厚薄不一,,或者有刀痕,或組織與玻片間存在氣泡,。同一張切片厚薄不一,,一般都是在制片時(shí),刀片固定不佳或刀片鈍或刀片與組織角度不佳(一般比較好角度為5°)(3)脫蠟前未烘烤,,脫蠟時(shí)間過短或脫蠟液使用過久,,導(dǎo)致脫蠟不徹底,。(4)染色液過少,著色不均勻,;或染色時(shí)部分組織干涸而另一部分濕潤(rùn),,這樣會(huì)導(dǎo)致組織吸附染料的能力不一。(5)分化不當(dāng),。南京英瀚斯,,專業(yè)的病理染色實(shí)驗(yàn)服務(wù)平臺(tái)。HE染色過程中常見的問題以及應(yīng)對(duì)方法,。
HE染色觀察細(xì)胞凋亡,,凋亡檢測(cè)中形態(tài)學(xué)方法是**直觀、可靠的方法之一,。對(duì)組織和各種細(xì)胞進(jìn)行染色后,,在光學(xué)顯微鏡、熒光顯微鏡或電子顯微鏡下觀察,,通過觀察細(xì)胞的形態(tài)或染色的類型來判斷凋亡的發(fā)生與否。細(xì)胞涂片或細(xì)胞甩片的制備:對(duì)于貼壁細(xì)胞,,可將蓋玻片放于培養(yǎng)器皿中,,讓培養(yǎng)細(xì)胞長(zhǎng)于玻片上,然后用藥物誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡后取出,,用4%多聚甲醛固定5min,。對(duì)于懸浮細(xì)胞,用藥物誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡后,,離心1000r/min收集細(xì)胞,,用PBS洗2次,收集調(diào)整細(xì)胞數(shù)為1X105/ml,,涂片或用離心甩片,,用4%多聚甲醛固定5min;在光學(xué)顯微鏡下,,貼壁細(xì)胞由原來的梭形或多角形變小,、變圓,核呈藍(lán)色或藍(lán)黑色,,胞漿呈淡紅色,,核固縮、破碎,,形成凋亡小體等,。懸浮細(xì)胞,整個(gè)細(xì)胞皺縮,,核固縮,,破碎,,形成凋亡小體,染色質(zhì)顏色加深等,。心臟組織HE染色如何觀察,。甘肅專業(yè)的HE染色多少錢
關(guān)于HE染色,你不知道的實(shí)驗(yàn)技巧,。云南結(jié)果客觀的HE染色
HE染色石蠟和冰凍切片樣本的處理,,樣品處理:a.對(duì)于石蠟切片:二甲苯中脫蠟5-10分鐘;換用新鮮的二甲苯,再脫蠟5-10分鐘;無(wú)水乙醇5分鐘;90%乙醇2分;70%乙醇2分鐘;蒸餾水2分鐘.b.對(duì)于冰凍切片:蒸餾水2分鐘,。c對(duì)于培養(yǎng)細(xì)胞:用4%多聚甲醛固定10分鐘以上,。蒸餾水洗滌2分鐘。換用新鮮的蒸餾水,,再洗滌2分鐘,。蘇木素伊紅(HE)染色對(duì)于上述處理好的樣品:蘇木素染色液染色5-10分鐘(可以根據(jù)染色結(jié)果和要求調(diào)整時(shí)間)。浸自來水中沖洗去多余的染色液,,約10分鐘,。蒸餾水再洗滌一遍(數(shù)秒鐘)。95%乙醇5秒,。伊紅染色液染色30秒-2分鐘(可以根據(jù)染色結(jié)果和要求調(diào)整時(shí)間),。此時(shí),如果需要直接觀察,,可以用70%乙醇洗滌2次,。如需脫水、透明后封片按后續(xù)步驟進(jìn)行,,70%乙醇洗滌后仍可按照后續(xù)步驟進(jìn)行脫水,、透明和封片處理。云南結(jié)果客觀的HE染色
南京英瀚斯生物科技有限公司致力于醫(yī)藥健康,,是一家服務(wù)型公司,。公司業(yè)務(wù)分為實(shí)驗(yàn)外包,動(dòng)物模型構(gòu)建,,細(xì)胞分子實(shí)驗(yàn),,病理檢測(cè)等,目前不斷進(jìn)行創(chuàng)新和服務(wù)改進(jìn),,為客戶提供良好的產(chǎn)品和服務(wù),。公司將不斷增強(qiáng)企業(yè)重點(diǎn)競(jìng)爭(zhēng)力,努力學(xué)習(xí)行業(yè)知識(shí),,遵守行業(yè)規(guī)范,,植根于醫(yī)藥健康行業(yè)的發(fā)展。在社會(huì)各界的鼎力支持下,持續(xù)創(chuàng)新,,不斷鑄造***服務(wù)體驗(yàn),,為客戶成功提供堅(jiān)實(shí)有力的支持。