HE染色石蠟和冰凍切片樣本的處理,，樣品處理：a.對于石蠟切片:二甲苯中脫蠟5-10分鐘;換用新鮮的二甲苯,，再脫蠟5-10分鐘;無水乙醇5分鐘;90%乙醇2分;70%乙醇2分鐘;蒸餾水2分鐘.b.對于冰凍切片：蒸餾水2分鐘,。c對于培養(yǎng)細胞：用4%多聚甲醛固定10分鐘以上,。蒸餾水洗滌2分鐘,。換用新鮮的蒸餾水,，再洗滌2分鐘,。蘇木素伊紅(HE)染色對于上述處理好的樣品：蘇木素染色液染色5-10分鐘(可以根據(jù)染色結(jié)果和要求調(diào)整時間),。浸自來水中沖洗去多余的染色液,，約10分鐘,。蒸餾水再洗滌一遍(數(shù)秒鐘),。95%乙醇5秒。伊紅染色液染色30秒-2分鐘(可以根據(jù)染色結(jié)果和要求調(diào)整時間),。此時，如果需要直接觀察,，可以用70%乙醇洗滌2次,。如需脫水、透明后封片按后續(xù)步驟進行,，70%乙醇洗滌后仍可按照后續(xù)步驟進行脫水,、透明和封片處理,。南京英瀚斯，專業(yè)的技術(shù)提供專業(yè)的HE染色服務,。貴州比較好的HE染色

HE染色常見問題：切片染色不均勻,，有片狀的弱著**存在答：（1）取材時組織太厚，固定過久,，導致深部組織固定不佳，而表淺組織過度固定,，而透明、脫水,、浸蠟均是如此,，這樣在后期染色時就會出現(xiàn)染色不均勻。應該將厚的組織剖開固定,。（2）制片過程有問題，切片厚薄不一,，或者有刀痕,，或組織與玻片間存在氣泡。同一張切片厚薄不一,，一般都是在制片時,，刀片固定不佳或刀片鈍或刀片與組織角度不佳（一般比較好角度為5°）（3）脫蠟前未烘烤，脫蠟時間過短或脫蠟液使用過久,，導致脫蠟不徹底,。（4）染色液過少，著色不均勻,；或染色時部分組織干涸而另一部分濕潤,，這樣會導致組織吸附染料的能力不一。（5）分化不當,。南京英瀚斯,，專業(yè)的病理染色實驗服務平臺。新疆推薦的HE染色公司腎臟組織HE染色如何觀察,。

HE染色注意事項：1,、染色時調(diào)節(jié)pH值很重要。如果組織塊在福爾馬林中固定時間長,，組織酸化而影響細胞核著色,。因此，要在自來水中沖洗時間長一些或在飽和碳酸鋰水溶液中處理10-30min,，這樣可以使細胞核著色較深,。染伊紅時胞漿著色不佳，可在伊紅溶液中滴加1-2滴冰醋酸,。2,、切片染蘇木精后，分色這一步是關(guān)鍵,，應在顯微鏡下控制進行,，一般以細胞核染色清楚（晰）而細胞質(zhì)基本無色為佳。如果過分延長分色時間將導致染色太淺,，應重新染色后再行分色,。3、切片經(jīng)酒精脫水后,，入二甲苯時可出現(xiàn)白色不透明狀態(tài),，此為脫水不徹底，應將切片退回無水酒精,，更換酒精,、二甲苯，以求徹底脫水與透明,。4,、在染色過程中不要讓切片干燥，以免切片收縮,、變形,，影響神經(jīng)元形態(tài),。5,、切片從二甲苯取出或進入二甲苯前，切片周邊均應擦干凈或吸干多余水分。6,、***封固時,，要用中性樹脂，防止日后褪色,，蓋片要選大于組織塊的面積,，如漏出一部分不久將會褪色，所用樹脂濃度要適當,，樹脂封固時不能有氣泡,。

HE染色原理1、細胞核染色的原理：蘇木精為堿性天然染料,，可使細胞核著色,。細胞核內(nèi)染色質(zhì)的成分主要是DNA，在DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu)中,，兩條核苷酸鏈上的磷酸基向外,，使DNA雙螺旋的外側(cè)帶負電荷,，呈酸性,，很容易與帶正電荷的蘇木精堿性燃料以離子鍵或氫鍵結(jié)合而被染色,。蘇木精在堿性溶液中呈藍色，所以細胞核被染成藍色,。2,、細胞漿染色的原理：伊紅是一種化學合成的酸性染料，在一定條件下可使細胞漿著色,。細胞漿的主要成分是蛋白質(zhì)，為兩性化合物,，細胞漿的染色與染液的pH在胞漿蛋白質(zhì)等電點（4.7—5.0）以下時,，胞漿蛋白質(zhì)以堿式電離,，則細胞漿帶正電荷,，就可被帶負電荷的酸性染料染色。伊紅在水中離解成帶負電荷的陰離子,，與胞漿蛋白質(zhì)帶正電荷的陽離子結(jié)合,，使細胞漿著色,，呈現(xiàn)紅色。HE染色原理 試劑 染色步驟 注意事項 ,。

HE染色知識點1：對送檢組織標本的要求送檢組織標本在手術(shù)切除或活檢后應當立即放入4%中性緩沖甲醛溶液中固定,。尸檢標本應當盡量在死亡后盡早取材固定。送檢組織需要全部取材的,，應當在送檢單上注明，有特殊要求（如細菌培養(yǎng),、解釋道化學分析等）應當事先聯(lián)系,，并且在標本未固定前進行處理,。知識點2：組織取材要求在對送檢組織標本進行詳細檢查的基礎上,，根據(jù)診斷的需要,，確定取材的部位和塊數(shù),。切取的組織應當按照不同的部位分別給予不同的編號或標記，以便鏡檢時核對,。另外,，盡可能在取材前對有意義的標本的表面及剖面鏡下攝影,，并編號存檔南京英瀚斯，專業(yè)的病理染色實驗服務平臺,。冰凍切片是否可以做HE染色,？質(zhì)量好的HE染色哪家好

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HE染色細胞質(zhì)過染分析及應對原因：（1）伊紅染色液濃度太高,，特別是焰紅燃料,、四溴四氯熒光素鈉的存在；（2）切片在伊紅染色時間過長,；（3）切片在伊紅染色后經(jīng)乙醇脫水步驟時過的太快,，而使乙醇分化伊紅的作用不能產(chǎn)生,。對策：適當稀釋伊紅染色液，減少伊紅染色時間,，或者使切片在乙醇脫水等步驟時,，停留時間相對均勻。同樣,，也要檢查切片的厚度是否合適,。切片中出現(xiàn)藍黑色沉淀物分析及應對原因：蘇木精染色液中的金屬膜，黏附在玻片上,。對策：每天染色前仔細過濾蘇木精染色液,，或建議使用半氧化蘇木精染色液,，如Gill蘇木精染色液,可以避免過多的金屬膜產(chǎn)生,。貴州比較好的HE染色

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