免疫組化臨床應(yīng)用對“未分化”cancer的分類,。未分化cancer包括cancer或肉瘤，在HE切片上由于cancer的“未分化”而缺少cancer細胞的起源特征不能分類,，初步區(qū)分組織學(xué)類型用非特異性抗體,，在其基礎(chǔ)上再選用特異性抗體做進一步鑒定。如分化差的cancer可顯示Vimentin或S-100蛋白,，有時淋巴瘤可以表達上皮膜抗原,，一些黑色素瘤表現(xiàn)出角蛋白，這同時也強調(diào)了在cancer診斷中應(yīng)使用一組抗體而不是單個抗體,。如果您有實驗外包的需求,，可以與我們南京英瀚斯生物進行聯(lián)系，我們也有做免疫組化的服務(wù),！英瀚斯生物做免疫組化怎么樣,？江西靠譜免疫組化怎么樣

免疫組化中IHC vs ICC的區(qū)別。英瀚斯生物為您說明,。除了生物學(xué)來源,，IHC和ICC在樣品處理的程度上也有所不同。ICC需要透化,，要么通過固定過程,，要么是單獨的透化步驟，這樣抗體才能與細胞內(nèi)的靶點相結(jié)合,。而IHC可能不要單獨的透化步驟,，這取決于切片的厚度和固定方法。包埋在石蠟中的IHC切片必須進一步處理,，才能進行抗體染色,。一旦處理好樣品，IHC和ICC的染色操作就幾乎沒什么差異了,。當(dāng)然,，就染色而言，根據(jù)所使用的抗體來優(yōu)化還是少不了的,。浙江什么是免疫組化檢測動物,、細胞的免疫組化、免疫熒光,，就找英瀚斯生物,！

實驗失敗常見問題分析有哪些：

為什么在顯微鏡下觀察發(fā)現(xiàn)所有的切片都成陰性？

答：這種現(xiàn)象主要是由操作不當(dāng)導(dǎo)致,，可能的原因有：1.染色操作不當(dāng),，致使染色失敗,；2.漏加一種抗體或者制備出的抗體沒有活性,；3.緩沖液中有疊氮化鈉,，抑制了酶的活性；4.復(fù)染或脫水劑使用不當(dāng)?shù)?。建議逐一排查,，找到原因后重新進行實驗。

在顯微鏡下觀察發(fā)現(xiàn)所有的切片都成陽性,，這是為什么,？答：與上一個問題類似，出現(xiàn)的原因也是試驗操作存在問題,，可能的原因有：1.切片在染色過程中抗體過濃,，或者干片了；使用的呈色底物溶液已變色或呈色反應(yīng)時間過長,；3.抗體溫育的時間過長等,。

在顯微鏡下觀察發(fā)現(xiàn)切片的背景很深，這是為什么,？答：以下幾方面會導(dǎo)致切片的背景過深：1.蛋白質(zhì)封閉不夠或所用血清溶血,，造成抗體的非特異性反應(yīng)；2.內(nèi)源性過氧化酶沒有完全阻斷,，顯色過程中過氧化酶與酶底物反應(yīng),，造成背景；3.底物呈色反應(yīng)時間過長或呈色反應(yīng)后漂洗不徹底,。

確定來源不明的轉(zhuǎn)移瘤的原發(fā)部位,，臨床上免疫組化也可以進行操作。對于來源不明的轉(zhuǎn)移瘤,，用免疫組化技術(shù)有助于確定惡性cancer的組織學(xué)來源，進一步確定原發(fā)部位,。如角蛋白抗體(CK20)在胃腸道cancer,、膽管cancer、胰腺cancer中陽性,，而在肺cancer,、乳腺cancer、腎cancer中陰性;Tg陽性可考慮甲狀腺轉(zhuǎn)移;波形蛋白(Vimentin)陽性支持肉瘤的診斷;前列腺特異性抗原(PSA)陽性可考慮前列腺轉(zhuǎn)移;甲狀腺球蛋白陽性可考慮甲狀腺濾泡細胞cancer;肌動蛋白(Actin),、肌球蛋白(Myosin),、結(jié)蛋白(Desmin)、肌紅蛋白(Myoglobin)陽性可考慮橫紋肌肉瘤;S-100蛋白陽性支持黑色素瘤的診斷;等等這些都為cancer的醫(yī)療及預(yù)后提供了依據(jù),。哪里可以做免疫組化,？

目前幾種常用免疫組化方法簡單介紹

1）免疫熒光方法是**早建立的免疫組織化學(xué)技術(shù)。由于免疫熒光技術(shù)特異性強,、靈敏度高,、快速簡便,，所以在臨床病理診斷、檢驗中應(yīng)用較廣,。它利用抗原抗體特異性結(jié)合的原理,，先將已知抗體標上熒光素，以此作為探針檢查細胞或組織內(nèi)的相應(yīng)抗原,，在熒光顯微鏡下觀察,。當(dāng)抗原抗體復(fù)合物中的熒光素受激發(fā)光的照射后即會發(fā)出一定波長的熒光，從而可確定組織中某種抗原的定位,，進而還可進行定量分析,。

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2）免疫酶標方法免疫酶標方法是繼免疫熒光后,，于60年代發(fā)展起來的技術(shù)?；驹硎窍纫悦笜擞浀目贵w與組織或細胞作用,，然后加入酶的底物，生成有色的不溶性產(chǎn)物或具有一定電子密度的顆粒,，通過光鏡或電鏡,，對細胞表面和細胞內(nèi)的各種抗原成分進行定位研究。免疫酶標技術(shù)是目前**常用的技術(shù),。本方法與免疫熒光技術(shù)相比的主要優(yōu)點是：定位準確,，對比度好，染色標本可長期保存,，適合于光,、電鏡研究等。免疫酶標方法的發(fā)展非常迅速,，已經(jīng)衍生出了多種標記方法,，且隨著方法的不斷改進和創(chuàng)新，其特異性和靈敏度都在不斷提高,，使用也越來越方便,。目前在病理診斷中廣為使用的有ABC法、SP三步法,、即用型二步法檢測系統(tǒng)等,。

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免疫組化如何得到好的效果,？江西靠譜免疫組化怎么樣

免疫組化應(yīng)該選擇石蠟切片還是冰凍切片？ 

（1）要求做冰凍切片的不一定能做石蠟切片,，這是***我向一老師請教得出的結(jié)論,。因為作石蠟切片時要高溫烤片,，可能會破壞組織的抗原性，如果組織的抗原性較穩(wěn)定,，則可作石蠟切片,；但是要求做石蠟切片的，可作冰凍切片,。

（2）冰凍切片的優(yōu)點是能夠較好的保存組織的抗原免疫活性,，做免疫組化時不需抗原修復(fù)這一步。缺點是細胞內(nèi)易形成冰晶而破壞細胞結(jié)構(gòu),，可能會使抗原彌散,；切片厚度較石蠟的厚，做的片子沒石蠟的漂亮,。當(dāng)你買一抗時,，目錄上都寫著做什么樣的切片，如果它寫著只能做冰凍,，就不能做石蠟,，如寫著兩者都可，那就都能做,。

（3）石蠟切片的優(yōu)點可以保持組織細胞的形態(tài)結(jié)構(gòu),，且容易存放在室溫，而冰凍切片比較麻煩,，一定要存在-80度的低溫冰箱中,，尤其是用來做原位雜交的的切片，為了防止RNA降解,，保存一貫很重要,。由于石蠟切片可以切到4微米左右，所以原位雜交探針容易滲透到組織中去,，容易成功,，而且得到的顏色/形態(tài)都較冰凍切片好。

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