免疫組化中IHC vs ICC的區(qū)別,。英瀚斯生物為您說明。除了生物學來源,，IHC和ICC在樣品處理的程度上也有所不同,。ICC需要透化，要么通過固定過程,，要么是單獨的透化步驟,，這樣抗體才能與細胞內的靶點相結合。而IHC可能不要單獨的透化步驟,，這取決于切片的厚度和固定方法,。包埋在石蠟中的IHC切片必須進一步處理，才能進行抗體染色,。一旦處理好樣品,，IHC和ICC的染色操作就幾乎沒什么差異了,。當然，就染色而言,，根據所使用的抗體來優(yōu)化還是少不了的,。免疫組化樣本如何處理？江蘇動物組織免疫組化外包

免疫組化的DAB顯色時間如何把握,？

1,、DAB顯色時間不是固定的，主要由顯微鏡下控制顯色時間,，到出現淺棕色本底時即可沖洗,；

2、DAB顯色時間很短（如幾秒或幾十秒）就出現很深的棕褐色,，這很可能說明你的抗體濃度過高或抗體孵育時間過長,，需要下調抗體濃度或縮短你的抗體孵育時間；

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3、此外,，若很短時間就出現背景很深,，還有可能你前面的封閉非特異性蛋白不全，需要延長封閉時間,；

4,、DAB顯色時間很長（如超過十幾分鐘）才出現陽性染色，一方面可能說明你的抗體濃度過低或孵育時間過短（比較好一抗4度過夜）,；另一方面就是封閉時間過長,。 河南大鼠免疫組化怎么樣英瀚斯生物，專業(yè)承接免疫組化等各類病理染色檢測,！

免疫組化如何才能充分脫蠟,？

 （1）蠟不溶于水，如果脫蠟不干凈,，少許蠟存留于切片上，將會引起染色不均勻,、陽性物時隱時現,、真假難辨、背景染色增加等,。為了解決上述的問題,，切片在染色前必須徹底脫蠟，目前用于脫蠟的試劑主要是二甲苯,，因它脫蠟力強,，脫蠟時間較短,； 

（2）脫蠟的時間要根據季節(jié)，室溫和試劑的新鮮謀面是在不同,。如果在夏天,，室溫較高，脫蠟試劑也新鮮,，則脫蠟時間不需很多,，3-5分鐘就已足夠。如果在冬天,，室溫較低,，脫蠟試劑也較陳舊，則脫蠟時間需要延長,，10-20分鐘或更長,。

（3）當天切的切片，燒烤2小時后進行染色,，切片帶有溫度進行脫蠟這將可加速脫蠟的過程,，如果預先切好烤好的切片，在染色前,，還必須對切片進行加溫10-20分鐘,，然后再行脫蠟，這樣脫蠟速度加快,，效果魁偉更好,。總之,，操作時應根據不同的季節(jié),，不同的室溫，不同的試劑來決定,，脫蠟的時間,，原則上是要徹底、干凈,、完全地脫去切片上的蠟,。

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醫(yī)療和預后有關的免疫組化,。與醫(yī)療及預后有關的標記物主要分以下為三類:(1)cancer基因標記物:如cancer基因C-erbB2、c-myc,、P53蛋白等,，卵巢上皮性cancer中P53的過表達與cancer的擴散、分化,、術后殘存cancer灶呈正相關;乳腺cancer中表達C-erbB2的浸潤性cancer患者預后差;肺cancer中突變型P53基因蛋白表達增高,，PTEN基因表達減弱,，提示cancer預后不良。(2)細胞增殖性標記物:cancer細胞增生是否活躍直接影響著臨床的醫(yī)療與預后,，如表皮生長因子受體(EGFR),、Ki-67、PCNA,、cycling等可對cancer細胞的增生做出評價,，表達指數越高，表明其增殖指數越活躍,，惡性度增高,，預后不良，其中以惡性淋巴瘤乳腺cancer較為明顯;在對乳腺cancer的研究中發(fā)現Ki-67,、EGFR陽性者,，淋巴結轉移率高，并與ji素受體的表達呈負相關,。(3)類固醇ji素受體:如雌ji素受體(ER),、孕ji素受體(PR)等，應用更為范圍廣的的是子宮內膜cancer及乳腺cancer,，如對乳腺cancer中ER,、PR的檢測，有助于決定臨床醫(yī)療中是否需要加入內分泌ji素阻斷醫(yī)療,，并能判斷預后,，ER及PR陽性表達、原cancer基因(C-erbB-2)陰性表達病例對三苯氧胺等ji素醫(yī)療反應良好,，而ERPR,、C-erbB-2三種抗體均陰性(TNBC)患者采用三苯氧胺可能意義不大。免疫組化怎么做,？步驟方法,？

免疫組化中免疫膠體金技術，英瀚斯生物小編為您說明介紹,。免疫膠體金技術是以膠體金這樣一種特殊的金屬顆粒作為標記物,。膠體金是指金的水溶膠，它能迅速而穩(wěn)定地吸附蛋白,，對蛋白的生物學活性則沒有明顯的影響,。因此，用膠體金標記一抗,、二抗或其他能特異性結合免疫球蛋白的分子(如葡萄球菌A蛋白)等作為探針，就能對組織或細胞內的抗原進行定性,、定位,，甚至定量研究,。由于膠體金有不同大小的顆粒，且膠體金的電子密度高,，所以免疫膠體金技術特別適合于免疫電鏡的單標記或多標記定位研究,。由于膠體金本身呈淡至深紅色，因此也適合進行光鏡觀察,。如應用銀加強的免疫金銀法則更便于光鏡觀察,。動物、細胞的免疫組化,、免疫熒光,，就找英瀚斯生物！江蘇動物組織免疫組化外包

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免疫組化結果要如何分析？

 （1）陽性著色細胞計數法,。在40*光鏡下,，隨機選擇不重疊的10個視野，機器或人工計數陽性著色細胞,，每組3~6張不同動物組織切片,，然后進行組間比較即可。

（2）灰密度分析法,?？梢酝ㄟ^在不同組別和不同動物組織切片上選擇相同區(qū)域、相同條件下用image j進行灰密度分析,，然后進行統(tǒng)計分析即可,。

（3）評分法。用光學顯微鏡下對組織切片分別按染色程度（0~3分為陰性著色,、淡黃色,、淺褐色、深褐色）,、陽性范圍進行評分（1~4分為0~25%,、26~50%、51~75%,、76~100%）,，**終可以分數相加，再進行比較,。對于以上這幾種方法,，各有利弊，請細心選擇,。要想得到正確結果的前提是你要做出著色均勻,、背景很淺的高質量切片,。

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