在臨床應(yīng)用中,，免疫組化還可以進一步分類不同qi官與組織交界處cancer,。由于重疊的特征,，在一些組織qi官交界處的cancer,，只憑組織學(xué)基礎(chǔ)對cancer進行分類很困難,。如胃腸道梭形細胞肉瘤是肌肉起源的平滑肌肉瘤,，是間質(zhì)起源的胃腸道間質(zhì)瘤(GIST)，還是神經(jīng)起源的神經(jīng)鞘瘤;同樣發(fā)生于組織交界處的cancer有睪丸胚胎cancer與精原細胞cancer,，兩者較難區(qū)別，且醫(yī)療與預(yù)后明顯的不同,，但用免疫組化檢測角蛋白就較易于區(qū)別:角蛋白陰性則為精原細胞cancer，而角蛋白陽性則為胚胎cancer,。哪里可以做免疫組化,？新疆大鼠免疫組化多少錢

細胞爬片免疫組化檢測實驗步驟

1,、選擇貼壁良好的細胞爬片，用4%多聚甲醛固定后15min后自然晾干,。

2,、PBS洗3次，每次5min,。3,、切片放入3%過氧化氫溶液，室溫下孵育10min,，以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶,。

4,、PBS洗3次,，每次5min，甩干后5%BSA封閉20min（封閉電荷）,。

5,、去除BSA液，每張切片加入50μl稀釋的一抗覆蓋組織,，4℃過夜,。

6、PBS洗3次,，每次5min。

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7,、去除PBS液,，每張切片加50μl-100μl相應(yīng)種屬的二抗，4℃孵育50min,。

8,、PBS洗3次，每次5min,。

9,、去除PBS液，每張切片加50-100μl新鮮配制DAB溶液,，顯微鏡控制顯色,。

10、顯色完全后,，蒸餾水或自來水沖洗,，蘇木素復(fù)染，1%鹽酸酒精分化（1s）,，自來水沖洗,，氨水返藍，流水沖洗,。

11,、切片經(jīng)過梯度酒精（70-100%）10min一個梯度，脫水干燥,，二甲苯透明,，中性樹膠封固。 遼寧大鼠免疫組化多少錢免疫組化失敗的原因,？

免疫組化應(yīng)該選擇石蠟切片還是冰凍切片,？ 

（1）要求做冰凍切片的不一定能做石蠟切片，這是***我向一老師請教得出的結(jié)論,。因為作石蠟切片時要高溫烤片,，可能會破壞組織的抗原性，如果組織的抗原性較穩(wěn)定,，則可作石蠟切片,；但是要求做石蠟切片的，可作冰凍切片,。

（2）冰凍切片的優(yōu)點是能夠較好的保存組織的抗原免疫活性,，做免疫組化時不需抗原修復(fù)這一步。缺點是細胞內(nèi)易形成冰晶而破壞細胞結(jié)構(gòu),，可能會使抗原彌散,；切片厚度較石蠟的厚,，做的片子沒石蠟的漂亮。當(dāng)你買一抗時,，目錄上都寫著做什么樣的切片,，如果它寫著只能做冰凍，就不能做石蠟,，如寫著兩者都可,，那就都能做。

（3）石蠟切片的優(yōu)點可以保持組織細胞的形態(tài)結(jié)構(gòu),，且容易存放在室溫,，而冰凍切片比較麻煩，一定要存在-80度的低溫冰箱中,，尤其是用來做原位雜交的的切片,，為了防止RNA降解，保存一貫很重要,。由于石蠟切片可以切到4微米左右,，所以原位雜交探針容易滲透到組織中去，容易成功,，而且得到的顏色/形態(tài)都較冰凍切片好,。

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免疫組化技術(shù)應(yīng)用于臨床cancer良惡性的判斷,，英瀚斯生物為您介紹。對于反應(yīng)性增生還是cancer性增生,，可用免疫球蛋白(Ig)的輕鏈抗體檢測B淋巴細胞增生的單克隆或多克隆性來區(qū)別,。在濾泡反應(yīng)性增生時，濾泡反應(yīng)中心的細胞不表達細胞凋亡蛋白(bcl-2),，bcl-2陰性;而在濾泡性淋巴瘤中,，由于90%以上cancer性濾泡細胞有bcl-2的高表達，bcl-2陽性,。而增殖細胞核抗原(PCNA),，周期素(Cycling)，核抗原(Ki-67)通過對cancer細胞增生的程度作出評價,，從而提示增生細胞的良惡性。免疫組化怎么做,？步驟方法,？

免疫組化結(jié)果要如何分析？

 （1）陽性著色細胞計數(shù)法,。在40*光鏡下,，隨機選擇不重疊的10個視野,，機器或人工計數(shù)陽性著色細胞，每組3~6張不同動物組織切片,，然后進行組間比較即可,。

（2）灰密度分析法?？梢酝ㄟ^在不同組別和不同動物組織切片上選擇相同區(qū)域,、相同條件下用image j進行灰密度分析，然后進行統(tǒng)計分析即可,。

（3）評分法,。用光學(xué)顯微鏡下對組織切片分別按染色程度（0~3分為陰性著色、淡黃色,、淺褐色,、深褐色）、陽性范圍進行評分（1~4分為0~25%,、26~50%,、51~75%、76~100%）,，**終可以分?jǐn)?shù)相加,，再進行比較。對于以上這幾種方法,，各有利弊,，請細心選擇。要想得到正確結(jié)果的前提是你要做出著色均勻,、背景很淺的高質(zhì)量切片,。

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免疫組化的結(jié)果分析：

免疫組化實驗通常需要設(shè)置陽性對照、陰性對照（或替代對照）（陽性對照是排除方法和實驗系統(tǒng)有無問題,；陰性對照與替代對照是排除有無非特異性染色）,。一般情況下，陽性對照顏色的特點為：Ag定位，包漿,、胞核,、胞膜、間質(zhì)具有結(jié)構(gòu)性,。且染色的強度不同（顏色深淺不一）,；陰性對照的特點為：染色細胞與組織無區(qū)別，顏色具有彌散性,，分布均勻,。

英瀚斯生物可承接各類病理染色，包括免疫組化,。

說明：免疫組化實驗可以對結(jié)果進行定量分析,，但要實驗得到的必須是高質(zhì)量的染色切片，要求背景染色淺且特異性染色較深,，這樣分析的結(jié)果才會比較準(zhǔn)確,。 新疆大鼠免疫組化多少錢