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來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2024-09-29

HE染色組織樣本水化:將浸泡過(guò)二甲苯的待測(cè)組織樣本先放入無(wú)水乙醇中浸泡5min,,使脫蠟時(shí)用的二甲苯可以被洗脫出去,,使水可以進(jìn)入組織中;再依次置于95%,、85%,、70%乙醇中各浸泡5min以達(dá)到充分水化的效果,。組織切片蘇木素染色、分化與反藍(lán):將水化后的組織樣本的切片使用PBS溶液浸泡清洗,,每次浸泡5min,,總共清洗3次。之后用移液***吸取已經(jīng)預(yù)先配制好的蘇木素染色液,,每個(gè)組織切片滴加100ul,,充分染色10min。染色完畢后使用蒸餾水洗去多余的蘇木素染色液,。然后再使用1%的鹽酸乙醇進(jìn)行分化,,使細(xì)胞核中結(jié)合過(guò)多的染液和細(xì)胞漿中的多余的染液被除去。分化完成后,,再用雙蒸水將組織切片沖洗干凈,。為了使蘇木素染藍(lán)色,使用弱堿性的促藍(lán)液加入組織切片中,,讓細(xì)胞核染藍(lán)色,。反藍(lán)結(jié)束后先用清水進(jìn)行清洗,再用雙蒸水將組織切片沖洗干凈,。HE染色的實(shí)驗(yàn)?zāi)康囊约皩?shí)驗(yàn)結(jié)果分析,。內(nèi)蒙古性價(jià)比高的HE染色外包

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HE染色石蠟和冰凍切片樣本的處理,樣品處理:a.對(duì)于石蠟切片:二甲苯中脫蠟5-10分鐘;換用新鮮的二甲苯,,再脫蠟5-10分鐘;無(wú)水乙醇5分鐘;90%乙醇2分;70%乙醇2分鐘;蒸餾水2分鐘.b.對(duì)于冰凍切片:蒸餾水2分鐘,。c對(duì)于培養(yǎng)細(xì)胞:用4%多聚甲醛固定10分鐘以上。蒸餾水洗滌2分鐘,。換用新鮮的蒸餾水,,再洗滌2分鐘。蘇木素伊紅(HE)染色對(duì)于上述處理好的樣品:蘇木素染色液染色5-10分鐘(可以根據(jù)染色結(jié)果和要求調(diào)整時(shí)間),。浸自來(lái)水中沖洗去多余的染色液,,約10分鐘。蒸餾水再洗滌一遍(數(shù)秒鐘),。95%乙醇5秒,。伊紅染色液染色30秒-2分鐘(可以根據(jù)染色結(jié)果和要求調(diào)整時(shí)間)。此時(shí),,如果需要直接觀察,,可以用70%乙醇洗滌2次。如需脫水,、透明后封片按后續(xù)步驟進(jìn)行,,70%乙醇洗滌后仍可按照后續(xù)步驟進(jìn)行脫水、透明和封片處理。新疆專業(yè)的HE染色價(jià)格讓您放心的實(shí)驗(yàn)外包公司,,專業(yè)HE染色實(shí)驗(yàn)服務(wù)平臺(tái),。

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HE染色原理:一、細(xì)胞核染色原理:蘇木精為堿性天然染料,,可使細(xì)胞核著色,。細(xì)胞核內(nèi)染色質(zhì)的成分主要是DNA,在DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu)中,,兩條核苷酸鏈上的磷酸基向外,。使DNA雙螺旋的外側(cè)帶負(fù)電荷,呈酸性,,很容易與帶正電荷的蘇木精堿性燃料以離子鍵或氫鍵結(jié)合而被染色,。蘇木精在堿性溶液中呈藍(lán)色,所以細(xì)胞核被染成藍(lán)色,。二,、細(xì)胞漿染色原理:細(xì)胞漿內(nèi)主要成分是蛋白質(zhì),為兩性化合物,、細(xì)胞漿的染色與pH值有密切關(guān)系,,當(dāng)pH調(diào)到蛋白質(zhì)等電點(diǎn)4.7-5.0時(shí),胞漿對(duì)外不顯電性,,此時(shí)酸或堿性染料不易染色,。當(dāng)pH調(diào)到6.7-6.8時(shí),大于蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)pH值,,表現(xiàn)酸性電離,,而帶負(fù)電荷的陰離子,可被帶正電荷的染料染色,,現(xiàn)時(shí)胞核也被染色,,核和胞漿難以區(qū)分。因此必須把pH調(diào)至胞漿等電點(diǎn)以下,,在染液中加入醋酸使胞漿帶正電荷(陽(yáng)離子),,就可被帶負(fù)電荷(陰離子)的染料染色。伊紅Y是一種化學(xué)合成的酸性染料,,在水中離解成帶負(fù)電荷的陰離子,,與蛋白質(zhì)的氨基正電荷(陽(yáng)離子)結(jié)合而使細(xì)胞漿染色,細(xì)胞漿,、紅細(xì)胞,、肌肉、結(jié)締組織,,嗜伊紅顆料等被***成不同程度的紅色或粉紅色,,與藍(lán)色的細(xì)胞核形成鮮明的對(duì)比

HE染色法的話,,不能準(zhǔn)確說(shuō)出細(xì)胞器的顏色,實(shí)驗(yàn)記錄或考試時(shí)只能說(shuō)染色效果為 :細(xì)胞核藍(lán)色,,胞質(zhì)、肌纖維,、膠原纖維和紅細(xì)胞呈深淺不一的紅色,。或者詳細(xì)說(shuō)明如下:細(xì)胞核被蘇木精染成鮮明的藍(lán)色,,軟骨基質(zhì),、鈣鹽顆粒呈深藍(lán)色,粘液呈灰藍(lán)色,。細(xì)胞漿被伊紅染成深淺不同的粉紅色至桃紅色,,胞漿內(nèi)嗜酸性顆粒呈反光強(qiáng)的鮮紅色。膠原纖維呈淡粉紅色,,彈力纖維呈亮粉紅色,,紅血球呈橘紅色,蛋白性液體呈粉紅色,。蘇木精染液為堿性 ,主要使細(xì)胞核內(nèi)的染色質(zhì)與胞質(zhì)內(nèi)的核糖體著紫藍(lán)色 ,;伊紅為酸性染料 ,主要使細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞外基質(zhì)中的成分著紅色。HE染色取材和樣本保存方式,。

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HE染色在**染色中的應(yīng)用,,小細(xì)胞肺*是肺*中分化程度比較低、惡性程度比較高的一種惡性**,,生長(zhǎng)迅速,,轉(zhuǎn)移較早,五年存活率*為1%-2%,,預(yù)后非常差,。其小細(xì)胞肺***細(xì)胞HE染色的特征,主要表現(xiàn)為組織結(jié)構(gòu),,包括巢狀,、小梁狀、實(shí)性片狀,,常有菊形團(tuán)形成,,*巢周圍的瘤細(xì)胞呈柵欄狀排列,*細(xì)胞較小,,一般小于三個(gè)靜止的淋巴細(xì)胞,,呈圓形、卵圓形或短梭形,,胞質(zhì)稀少,,胞界不清,核染色質(zhì)呈細(xì)顆粒狀,核仁缺乏或不明顯,,核分裂象每十個(gè)高倍視野大于十一個(gè),,常見大片狀壞死。專業(yè)的HE染色服務(wù)平臺(tái),,南京英瀚斯生物,。新疆專業(yè)的HE染色價(jià)格

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HE染色法,,。蘇木精染液為堿 ,,主要使細(xì)胞核內(nèi)的染色質(zhì)與胞質(zhì)內(nèi)的核糖體著紫藍(lán)色 ,;伊紅為酸染料 ,主要使細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞外基質(zhì)中的成分著紅色,。而線粒體用HE染色不可見,,活細(xì)胞通常要求活細(xì)胞近似無(wú)色線粒體需要用健那綠來(lái)染色,再在高倍鏡下觀察,。從人或動(dòng)物新鮮尸體上取下塊(一般厚度不超過(guò)0.5厘米)投入預(yù)先配好的固定液中(10%福爾馬林,,Bouin氏固定液等)使、細(xì)胞的蛋白質(zhì)變凝固,,以防止細(xì)胞后的自溶或細(xì)菌的分解,,從而保持細(xì)胞本來(lái)的形態(tài)結(jié)構(gòu)。一般用由低濃度到高濃度酒精作脫水劑,,逐漸脫去塊中的水份,。再將塊置于既溶于酒精,又溶于石蠟的透明劑二甲苯中透明,,以二甲苯替換出塊的中酒精,,才能浸蠟包埋。內(nèi)蒙古性價(jià)比高的HE染色外包