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HE染色攻略:HE染色又稱為蘇木精-伊紅染色,,染色后組織或細(xì)胞可以借助普通光學(xué)顯微鏡觀察與鑒別細(xì)胞凋亡與細(xì)胞壞死的一種染色方法,。這種方法適用范圍***,對組織細(xì)胞的各種成分都可著色,,便于***觀察組織構(gòu)造,,而且適用于各種固定液固定的材料,染色后不易褪色可長期保存,。經(jīng)過HE染色,,細(xì)胞核被蘇木素染成藍(lán)紫色,細(xì)胞質(zhì)被伊紅染色呈粉紅色,??梢杂^察細(xì)胞結(jié)構(gòu)、組織層次等等,。首先切片組織是否完整,,組織有無損傷;然后看切片有無刀痕,;***細(xì)胞核是否清晰可見,,胞核與包漿要對比鮮明。腎臟組織HE染色如何觀察,。上海專業(yè)的HE染色檢測
HE染色脫蠟不凈的原因及驗(yàn)證方法:1)二甲苯使用過久,,含蠟成分太高或脫蠟效果差:可更換二甲苯驗(yàn)證。2)切片經(jīng)烤片,,冷卻后放入二甲苯脫蠟或室溫太低,;延長拖拉時間或用熱的切片脫蠟驗(yàn)證。3)脫蠟時間太短或振蕩太少,幅度太??;可延長脫蠟時間或以多振蕩來驗(yàn)證。4)洗滌二甲苯用的乙醇使用時間過久,,導(dǎo)致乙醇中二甲苯含量過高,,二甲苯殘留在切片上(由于二甲苯與水不相溶,切片上有二甲苯的地方,,蘇木精就沒有辦法滲透進(jìn)去,,在切片染色完成后留下了點(diǎn)狀的不著**域):更換各道乙醇驗(yàn)證。5)二甲苯,、乙醇質(zhì)量不佳(偶有試劑瓶內(nèi)裝的試劑與試劑名不相符):換批號驗(yàn)證,。6)更換脫蠟液體時試劑拿錯:需重新配置驗(yàn)證。7)更換脫蠟液體時試劑次序放錯:需重新配置驗(yàn)證,。8)烤片時間短,,切片上水分沒有烤干,也會導(dǎo)致著色不勻,,出現(xiàn)點(diǎn)狀發(fā)白區(qū)域,。上海值得信賴的HE染色服務(wù)海馬組織HE染色如何觀察。
HE染色觀察肝臟HE染色切片,,首先要在顯微鏡下找到肝臟的標(biāo)志性結(jié)構(gòu)——肝小葉,。顯微鏡首先調(diào)4倍物鏡,調(diào)準(zhǔn)焦螺旋至視野清晰,,可以看到肝小葉結(jié)構(gòu),。人的肝小葉之間結(jié)締組織少,小葉分隔不明顯,,但動物如豬或小鼠,,其肝小葉分界非常明顯。肝小葉**有**靜脈,,在橫切片上顯示為空洞,。肝小葉之間為將物鏡調(diào)制10倍或20倍,就可以清楚地看到肝小葉結(jié)構(gòu),。肝細(xì)胞以**靜脈為中心向周圍放射狀排列,,稱為肝板,。一般在20倍物鏡下可以清晰看到肝細(xì)胞,。20倍物鏡下,肝細(xì)胞內(nèi)染色為藍(lán)色的是細(xì)胞核,,細(xì)胞核大而圓,,居中,,異染色質(zhì)少而著色淺,能清晰看到核仁,。肝細(xì)胞胞質(zhì)豐富,,多成嗜酸性,當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)合成旺盛時,,胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)散在的嗜堿性物質(zhì),。肝細(xì)胞內(nèi)有豐富的細(xì)胞器比如溶酶體、高爾基體,、內(nèi)質(zhì)網(wǎng),,等等,但是在光鏡下是無法看到的,,需要在電鏡下才能觀察到,。當(dāng)然,肝小葉內(nèi)除了肝細(xì)胞,,還有膽小管,、肝血竇、肝巨噬細(xì)胞等組織形態(tài),,但是在HE染色時并不容易觀察到,。做肝臟HE染色切片主要目的一般都是為了觀察肝細(xì)胞形態(tài)是否完整、胞核有無增大,、肝小葉形態(tài)是否完整,,以檢測藥物等刺激因素對肝臟的損傷作用。
HE染色多聚甲醛保存組織的注意事項(xiàng):多聚甲醛放置過久其中的醛基可能會被氧化為酸,,使溶液pH降低,,從而影響染色。不同細(xì)胞或組織樣品所需的固定時間有所不同,,應(yīng)當(dāng)根據(jù)細(xì)胞或組織的種類以及組織塊的大小來調(diào)整固定時間。多聚甲醛雖然作用溫和,,但能硬化組織,,固定時間過久會導(dǎo)致組織變脆,切片時易碎,。因此固定時間通常不宜超過24小時,。多聚甲醛可長期存在于固定過的細(xì)胞或組織樣品中,固定完成后用適當(dāng)?shù)南礈煲夯蛩疀_洗數(shù)小時仍會有殘留,,因此后續(xù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果如果受醛基影響,,須盡量洗去殘留的多聚甲醛。醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基,,使抗原決定簇的三維構(gòu)象出現(xiàn)空間障礙,。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)可能部分或完全掩蓋某些抗原決定簇,使之不能充分暴露,可造成假陰性的染色,,影響免疫組化結(jié)果,。因此,4%多聚甲醛固定的細(xì)胞或組織樣品在進(jìn)行免疫組化檢測時,,有時需要對抗原先進(jìn)行修復(fù),,然后才能進(jìn)行免疫染色等后續(xù)操作。比較常見的病理染色HE染色,?
HE染色在**染色中的應(yīng)用,,小細(xì)胞肺*是肺*中分化程度比較低、惡性程度比較高的一種惡性**,,生長迅速,,轉(zhuǎn)移較早,五年存活率*為1%-2%,,預(yù)后非常差,。其小細(xì)胞肺***細(xì)胞HE染色的特征,主要表現(xiàn)為組織結(jié)構(gòu),,包括巢狀,、小梁狀、實(shí)性片狀,,常有菊形團(tuán)形成,,*巢周圍的瘤細(xì)胞呈柵欄狀排列,*細(xì)胞較小,,一般小于三個靜止的淋巴細(xì)胞,,呈圓形、卵圓形或短梭形,,胞質(zhì)稀少,,胞界不清,核染色質(zhì)呈細(xì)顆粒狀,,核仁缺乏或不明顯,,核分裂象每十個高倍視野大于十一個,常見大片狀壞死,。冰凍切片是否可以做HE染色,?上海專業(yè)的HE染色檢測
HE染色試驗(yàn)技術(shù)及注意事項(xiàng)。上海專業(yè)的HE染色檢測
HE染色結(jié)果判讀:細(xì)胞核被蘇木精染成鮮明的藍(lán)色,,軟骨基質(zhì),、鈣鹽顆粒呈深藍(lán)色,粘液呈灰藍(lán)色,。細(xì)胞漿被伊紅染成深淺不同的粉紅色至桃紅色,,胞漿內(nèi)嗜酸性顆粒呈反光強(qiáng)的鮮紅色,。膠原纖維呈淡粉紅色,彈力纖維呈亮粉紅色,,紅血球呈橘紅色,,蛋白性液體呈粉紅色。著色狀況與組織或細(xì)胞的種類有關(guān),,也隨其生活周期及病理變化而改變,。例如,細(xì)胞在新生時期胞漿對伊紅著色較淡或輕度嗜堿,,當(dāng)其衰老時或發(fā)生退行性變則呈現(xiàn)嗜伊紅濃染,。膠原纖維在老化和出現(xiàn)透明變性時,伊紅著色由淺變深,。H-E染色評定標(biāo)準(zhǔn):(1)切片完整,,厚度4-6微米,厚薄均勻,,無皺褶無刀痕,;(2)染色核漿分明,紅藍(lán)適度,,透明潔凈,,封裱美觀。上海專業(yè)的HE染色檢測