在臨床應(yīng)用中,,免疫組化還可以進一步分類不同qi官與組織交界處cancer。由于重疊的特征,,在一些組織qi官交界處的cancer,,只憑組織學(xué)基礎(chǔ)對cancer進行分類很困難。如胃腸道梭形細(xì)胞肉瘤是肌肉起源的平滑肌肉瘤,,是間質(zhì)起源的胃腸道間質(zhì)瘤(GIST),,還是神經(jīng)起源的神經(jīng)鞘瘤;同樣發(fā)生于組織交界處的cancer有睪丸胚胎cancer與精原細(xì)胞cancer,兩者較難區(qū)別,,且醫(yī)療與預(yù)后明顯的不同,,但用免疫組化檢測角蛋白就較易于區(qū)別:角蛋白陰性則為精原細(xì)胞cancer,,而角蛋白陽性則為胚胎cancer。免疫組化protocol,,詳情請看英瀚斯生物官網(wǎng),。青海大鼠免疫組化要多久
免疫組化的DAB顯色時間如何把握?
1,、DAB顯色時間不是固定的,,主要由顯微鏡下控制顯色時間,到出現(xiàn)淺棕色本底時即可沖洗,;
2,、DAB顯色時間很短(如幾秒或幾十秒)就出現(xiàn)很深的棕褐色,這很可能說明你的抗體濃度過高或抗體孵育時間過長,,需要下調(diào)抗體濃度或縮短你的抗體孵育時間;
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3、此外,,若很短時間就出現(xiàn)背景很深,,還有可能你前面的封閉非特異性蛋白不全,需要延長封閉時間,;
4,、DAB顯色時間很長(如超過十幾分鐘)才出現(xiàn)陽性染色,一方面可能說明你的抗體濃度過低或孵育時間過短(比較好一抗4度過夜),;另一方面就是封閉時間過長,。 江西組織免疫組化多少錢做免疫組化需要多少錢?
免疫組化染色呈陰性結(jié)果的原因有哪些,?
1,、抗體濃度和質(zhì)量問題以及抗體來源選擇錯誤。不是抗體濃度越高就越易出現(xiàn)陽性結(jié)果,,抗原抗體反應(yīng)有前帶和后帶效應(yīng),,必須摸索比較好濃度。
2,、抗原修復(fù)不全,,對于甲醛固定的組織必須用充分抗原修復(fù)來打開抗原表位,以利于與抗體結(jié)合,;建議微波修復(fù)用高火4次*6min試試,。有人做過實驗,這是比較好的時間和次數(shù),。若不行,,還可高壓修復(fù),。
3、組織切片本身這種抗原含量低,。
4,、血清封閉時間過長。
5,、DAB孵育時間過短,。
6、細(xì)胞通透不全,,抗體未能充分進入胞內(nèi)參與反應(yīng),。
7、開始做免疫組化,,建議一定要首先做個陽性對照片,,排除抗體等問題。
免疫組化分類中,,免疫熒光方法,,英瀚斯生物為您進行介紹。一開始建立的免疫組織化學(xué)技術(shù),。它利用抗原抗體特異性結(jié)合的原理,,先將已知抗體標(biāo)上熒光素,以此作為探針檢查細(xì)胞或組織內(nèi)的相應(yīng)抗原,,在熒光顯微鏡下觀察,。當(dāng)抗原抗體復(fù)合物中的熒光素受激發(fā)光的照射后即會發(fā)出一定波長的熒光,從而可確定組織中某種抗原的定位,,進而還可進行定量分析,。由于免疫熒光技術(shù)特異性強、靈敏度高,、快速簡便,,所以在臨床病理診斷、檢驗中應(yīng)用比較廣,。南京有靠譜的能做免疫組化的公司嗎,?
醫(yī)療和預(yù)后有關(guān)的免疫組化。與醫(yī)療及預(yù)后有關(guān)的標(biāo)記物主要分以下為三類:(1)cancer基因標(biāo)記物:如cancer基因C-erbB2,、c-myc,、P53蛋白等,卵巢上皮性cancer中P53的過表達與cancer的擴散,、分化,、術(shù)后殘存cancer灶呈正相關(guān);乳腺cancer中表達C-erbB2的浸潤性cancer患者預(yù)后差;肺cancer中突變型P53基因蛋白表達增高,PTEN基因表達減弱,,提示cancer預(yù)后不良,。(2)細(xì)胞增殖性標(biāo)記物:cancer細(xì)胞增生是否活躍直接影響著臨床的醫(yī)療與預(yù)后,,如表皮生長因子受體(EGFR)、Ki-67,、PCNA,、cycling等可對cancer細(xì)胞的增生做出評價,表達指數(shù)越高,,表明其增殖指數(shù)越活躍,,惡性度增高,預(yù)后不良,,其中以惡性淋巴瘤乳腺cancer較為明顯;在對乳腺cancer的研究中發(fā)現(xiàn)Ki-67,、EGFR陽性者,淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率高,,并與ji素受體的表達呈負(fù)相關(guān),。(3)類固醇ji素受體:如雌ji素受體(ER)、孕ji素受體(PR)等,,應(yīng)用更為范圍廣的的是子宮內(nèi)膜cancer及乳腺cancer,,如對乳腺cancer中ER、PR的檢測,,有助于決定臨床醫(yī)療中是否需要加入內(nèi)分泌ji素阻斷醫(yī)療,并能判斷預(yù)后,,ER及PR陽性表達,、原cancer基因(C-erbB-2)陰性表達病例對三苯氧胺等ji素醫(yī)療反應(yīng)良好,而ERPR,、C-erbB-2三種抗體均陰性(TNBC)患者采用三苯氧胺可能意義不大,。免疫組化的樣本保存要求是什么?河北切片免疫組化可以做什么
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免疫組化的抗原修復(fù)技術(shù)
抗原修復(fù)是免疫組化實驗中的重要步驟,,目的是暴露被固定過程掩蓋的抗原表位。常用的抗原修復(fù)方法有熱修復(fù)和酶消化,。免疫組化熱修復(fù)是通過加熱(如微波或高壓)使蛋白質(zhì)變性,,暴露抗原表位。常用的緩沖液有檸檬酸鹽緩沖液和EDTA緩沖液,。酶消化是通過蛋白酶(如胰蛋白酶)消化部分蛋白質(zhì),,暴露抗原表位。免疫組化實驗中不同的抗原修復(fù)方法適用于不同的抗原和抗體,,需要根據(jù)免疫組化具體實驗條件進行優(yōu)化調(diào)整,。 青海大鼠免疫組化要多久