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江蘇比較好的HE染色

來源: 發(fā)布時間:2025-05-04

HE染色原理:易于被堿性或酸性染料著色的性質(zhì)稱為嗜堿性(basophilia)和嗜酸性(acidophilia),;而對堿性染料和酸性染料親和力都比較弱的現(xiàn)象稱為中性(neutrophilia)。構(gòu)成組織內(nèi)蛋白質(zhì)的氨基酸的種類很多,,它們有不同的等電點,。在普通染色法中,染色液的酸堿度為pH6左右,,細(xì)胞內(nèi)的酸性物質(zhì)如細(xì)胞核的染色質(zhì),、腺細(xì)胞和神經(jīng)細(xì)胞內(nèi)的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)及透明軟骨基質(zhì)等均被堿性染料染色,這些物質(zhì)稱為嗜堿性,。而細(xì)胞質(zhì)中的其它蛋白質(zhì)如紅細(xì)胞中的血紅蛋白、嗜酸粒細(xì)胞的顆粒及膠原纖維和肌纖維等被酸性染料染色,,這些物質(zhì)稱為嗜酸型,。如果改變?nèi)旧旱乃釅A度,pH值升高時,,則原來被酸性染料染色的物質(zhì)可變?yōu)槭葔A性,;pH值降低時,原來被堿性染料染色的物質(zhì)則可變?yōu)槭人嵝?。所以說染色液的pH值可以影響染色的反應(yīng),。脫氧核糖核酸(DNA)兩條鏈上的磷酸基向外,帶負(fù)電荷,,呈酸性,,很容易與帶正電荷的蘇木精堿性染料以離子鍵結(jié)合而被染色。蘇木精在堿性溶液中呈藍(lán)色,,所以細(xì)胞核被染成藍(lán)色,。腦組織HE染色如何觀察?江蘇比較好的HE染色

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HE染色常見問題:Q5:細(xì)胞核呈棕紅色改變答:蘇木素染液過度氧化,;或蘇木素染色后反藍(lán)不足導(dǎo)致,。應(yīng)該立即更換蘇木素染色液?;蛟诹鲃幼詠硭?一般自來水PH7.5-7.8),,或在稀釋的氨水溶液,或在0.2%碳酸氫鈉中適當(dāng)浸泡,,這些步驟均可一定程度地加強蘇木素染色后的反藍(lán)效果,。Q6:伊紅染色較淡答:伊紅的PH改變了(PH可能已大于5);或反藍(lán)液體未漂洗干凈,殘留后影響胞漿嗜酸性染色,;或者切片太薄并且在隨后的脫水步驟停留過久,。對策:檢查伊紅染色液PH,可采用乙酸調(diào)至4.6-5.0,。根據(jù)以上提示,,調(diào)整實驗步驟。新疆性價比高的HE染色檢測比較基礎(chǔ)的病理染色HE染色,。

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HE染色顯微鏡下見切片內(nèi)有大量水珠分析以及應(yīng)對原因:切片經(jīng)梯度乙醇處理后沒有完全脫水,,導(dǎo)致二甲苯透明中性樹膠封固后殘留大量水分。對策:移去蓋玻片,,用二甲苯溶解封固劑如中性樹膠,。將切片置入新鮮的無水乙醇中,待切片重新脫水完全后,,用新二甲苯透明,,中性樹膠封固。所有用于脫水和透明的液體,,在使用一定時間以后,,應(yīng)即時更換。光鏡下切片某些區(qū)域難以聚焦分析以及應(yīng)對原因:蓋玻片上可能有封固切片的封固劑,。對策:移去蓋玻片,,重新用干凈的蓋玻片封片

HE染色等常規(guī)染色,組化或是熒光優(yōu)先推薦做石蠟切片,。原因:石蠟切片對組織的形態(tài)保存比冰凍切片好,,并且對抗原基本無影響。脂質(zhì)染色(油紅O染**odipy染色,,尼羅紅染色)必須做冰凍切片,,不能做石蠟切片。以下染色必須要新鮮或冷凍組織冰凍切片:ROS染**-半乳糖甘酶染色,,ATP染色,,膽固醇染色。如果標(biāo)本已經(jīng)放在-80°冰箱冷凍了之后又想要做石蠟切片,,將標(biāo)本取出來千萬不要解凍直接放于固定液內(nèi)固定(在固定液內(nèi)邊解凍邊固定),。組織形態(tài)結(jié)構(gòu)保存完好順序:新鮮組織立即投入固定液內(nèi)固定石蠟切片>組織-80°冷凍后投入固定液內(nèi)固定石蠟切片>新鮮組織立即投入固定液內(nèi)固定冰凍切片>組織-80°冷凍后直接冰凍切片。HE染色切片知識以及如何做出漂亮的切片,。

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HE 染色是病理的主要常規(guī)染色,,其命名是因為主要使用的兩種試劑分別為Hematoxylin與Eosin Y,藉由電荷與吸附性的差異,,組織結(jié)構(gòu)對不同染料的結(jié)合程度不同,,我們可以發(fā)現(xiàn)Hematoxylin呈色在細(xì)胞核,,Eosin Y則表現(xiàn)在細(xì)胞質(zhì)與間質(zhì),染色優(yōu)良的片子可以幫助我們在顯微鏡下看到清晰的細(xì)胞型態(tài)與變化,。染色步驟依試劑提供者的建議而有所差異,,而且每個實驗室需要的顏色深淺不一,使用者可以依自己的需求另行調(diào)整,,以下是力沛有限公司建議的HE染色步驟HE染色技術(shù)幾種常見的染色問題,。江蘇比較好的HE染色

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HE染色骨組織的處理方式:組織里存有鈣鹽可妨礙用常規(guī)方法制作良好切片,。骨組織及鈣化病灶,,經(jīng)過固定后,需要先將鈣鹽除去使組織軟化,,才能進(jìn)行常規(guī)切片,。如果脫鈣不全,則切片容易撕開或碎裂,,損傷切片刀刀刃,。脫去鈣鹽的過程,稱為脫鈣,。骨組織固定24小時后,,鋸下不超過0.5cm厚的薄骨片,以4%甲醛溶液固定后,,進(jìn)行脫鈣。骨組織過厚則需延長脫鈣時間,,但長時間浸于強酸會影響切片染色效果,。取材骨組織固定于10%甲醛溶液24小時后再鋸取厚度約0.5cm骨片固定以10%甲醛溶液固定2天脫鈣將組織置于脫鈣劑中,每日更換新鮮液,,直至組織軟化為止除酸流水沖洗24小時脫水,、浸蠟、切片進(jìn)行常規(guī)脫水,、透明,、浸蠟、切片南京英瀚斯,,專業(yè)的病理染色實驗服務(wù)平臺,。江蘇比較好的HE染色