HE染色法的話,,不能準(zhǔn)確說(shuō)出細(xì)胞器的顏色,,實(shí)驗(yàn)記錄或考試時(shí)只能說(shuō)染色效果為 :細(xì)胞核藍(lán)色,,胞質(zhì),、肌纖維,、膠原纖維和紅細(xì)胞呈深淺不一的紅色?;蛘咴敿?xì)說(shuō)明如下:細(xì)胞核被蘇木精染成鮮明的藍(lán)色,,軟骨基質(zhì)、鈣鹽顆粒呈深藍(lán)色,,粘液呈灰藍(lán)色,。細(xì)胞漿被伊紅染成深淺不同的粉紅色至桃紅色,胞漿內(nèi)嗜酸性顆粒呈反光強(qiáng)的鮮紅色,。膠原纖維呈淡粉紅色,,彈力纖維呈亮粉紅色,紅血球呈橘紅色,,蛋白性液體呈粉紅色,。蘇木精染液為堿性 ,主要使細(xì)胞核內(nèi)的染色質(zhì)與胞質(zhì)內(nèi)的核糖體著紫藍(lán)色 ;伊紅為酸性染料 ,主要使細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞外基質(zhì)中的成分著紅色,。讓您放心的實(shí)驗(yàn)外包公司,,專業(yè)HE染色實(shí)驗(yàn)服務(wù)平臺(tái)。山西質(zhì)量好的HE染色外包
HE染色常見問題:Q3:細(xì)胞核染色過淺,,顏色暗淡答:切片在蘇木素染液中停留過短,,或蘇木素過度氧化失效,或分化時(shí)間太長(zhǎng),。對(duì)策:重新染色,。將組織切片放入0.01%氫氧化鈉、0.5%氨水,、飽和的碳酸氫鈉溶液,、乙醇溶液,每個(gè)3-5min即可,,接著重新染色,。可以適當(dāng)?shù)亟M織的嗜堿性以增強(qiáng)核染色,,如Zenker液固定的切片可放入5%碳酸氫鈉溶液中3h,,自來(lái)水沖洗5-10min染色,或Bouin液固定的切片可放入5%碳酸氫鈉溶液中1h,,自來(lái)水沖洗10min染色,。Q4:細(xì)胞核染色過深,,胞漿著藍(lán)色答:切片在蘇木素染液中停留過長(zhǎng),;或切片太厚;或分化時(shí)間太短,。這種情況首先鏡下看看切片厚度(比較好厚度1-2層細(xì)胞核),,要么重新染色,要么重新制片。南京英瀚斯,,專業(yè)的病理染色實(shí)驗(yàn)服務(wù)平臺(tái),。山西質(zhì)量好的HE染色外包HE染色觀察細(xì)胞形態(tài)變化。
HE染色主要是為通細(xì)胞及胞核形態(tài),、大小來(lái)區(qū)別各種細(xì)胞的,并不是直接通過顏色來(lái)區(qū)分的蘇木精染液為堿性,主要使細(xì)胞核內(nèi)的染色質(zhì)與胞質(zhì)內(nèi)的核糖體著紫藍(lán)色,;伊紅為酸性染料,主要使細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞外基質(zhì)中的成分著紅色.炎性細(xì)胞一類人體內(nèi)的免疫細(xì)胞,包括中性粒細(xì)胞、嗜酸粒細(xì)胞,、單核巨噬細(xì)胞,、淋巴細(xì)胞和漿細(xì)胞.淋巴細(xì)胞是**容易和其它幾種細(xì)胞區(qū)分的,細(xì)胞小而圓,核漿比很大,核濃染成深藍(lán)紫色.漿細(xì)胞大小介于淋巴細(xì)胞和巨噬/多核/巨細(xì)胞之間,胞漿略嗜堿,核偏位,核染色深,高倍鏡下可見核呈車輪狀.多核細(xì)胞和巨細(xì)胞的概念是不是有點(diǎn)重疊,多核細(xì)胞故名思意是有多個(gè)核的大型細(xì)胞,如朗漢氏巨細(xì)胞,常在肺結(jié)核的干酪樣壞死灶周圍出現(xiàn),多個(gè)核排成一圈,異物巨細(xì)胞也是有許多個(gè)核的體積巨大的細(xì)胞,這兩種巨細(xì)胞胞質(zhì)都偏酸.巨噬細(xì)胞似乎在不同的組織中有不同的名稱.
HE 染色是病理的主要常規(guī)染色,其命名是因?yàn)橹饕褂玫膬煞N試劑分別為Hematoxylin與Eosin Y,,藉由電荷與吸附性的差異,,組織結(jié)構(gòu)對(duì)不同染料的結(jié)合程度不同,我們可以發(fā)現(xiàn)Hematoxylin呈色在細(xì)胞核,,Eosin Y則表現(xiàn)在細(xì)胞質(zhì)與間質(zhì),,染色優(yōu)良的片子可以幫助我們?cè)陲@微鏡下看到清晰的細(xì)胞型態(tài)與變化。染色步驟依試劑提供者的建議而有所差異,,而且每個(gè)實(shí)驗(yàn)室需要的顏色深淺不一,,使用者可以依自己的需求另行調(diào)整,以下是力沛有限公司建議的HE染色步驟HE染色是常見的病理染色,,是比較基礎(chǔ)是病理染色之一,。
HE染色常見問題:Q5:細(xì)胞核呈棕紅色改變答:蘇木素染液過度氧化;或蘇木素染色后反藍(lán)不足導(dǎo)致,。應(yīng)該立即更換蘇木素染色液,。或在流動(dòng)自來(lái)水(一般自來(lái)水PH7.5-7.8),,或在稀釋的氨水溶液,,或在0.2%碳酸氫鈉中適當(dāng)浸泡,這些步驟均可一定程度地加強(qiáng)蘇木素染色后的反藍(lán)效果,。Q6:伊紅染色較淡答:伊紅的PH改變了(PH可能已大于5),;或反藍(lán)液體未漂洗干凈,殘留后影響胞漿嗜酸性染色,;或者切片太薄并且在隨后的脫水步驟停留過久,。對(duì)策:檢查伊紅染色液PH,可采用乙酸調(diào)至4.6-5.0,。根據(jù)以上提示,,調(diào)整實(shí)驗(yàn)步驟,。HE染色技術(shù)幾種常見的染色問題,。河北推薦的HE染色外包
HE染色注意事項(xiàng)以及常規(guī)的流程解析,。山西質(zhì)量好的HE染色外包
HE染色原理1、細(xì)胞核染色的原理:蘇木精為堿性天然染料,,可使細(xì)胞核著色。細(xì)胞核內(nèi)染色質(zhì)的成分主要是DNA,,在DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu)中,,兩條核苷酸鏈上的磷酸基向外,使DNA雙螺旋的外側(cè)帶負(fù)電荷,,呈酸性,,很容易與帶正電荷的蘇木精堿性燃料以離子鍵或氫鍵結(jié)合而被染色,。蘇木精在堿性溶液中呈藍(lán)色,,所以細(xì)胞核被染成藍(lán)色,。2,、細(xì)胞漿染色的原理:伊紅是一種化學(xué)合成的酸性染料,,在一定條件下可使細(xì)胞漿著色,。細(xì)胞漿的主要成分是蛋白質(zhì),為兩性化合物,,細(xì)胞漿的染色與染液的pH在胞漿蛋白質(zhì)等電點(diǎn)(4.7—5.0)以下時(shí),,胞漿蛋白質(zhì)以堿式電離,則細(xì)胞漿帶正電荷,,就可被帶負(fù)電荷的酸性染料染色。伊紅在水中離解成帶負(fù)電荷的陰離子,,與胞漿蛋白質(zhì)帶正電荷的陽(yáng)離子結(jié)合,,使細(xì)胞漿著色,,呈現(xiàn)紅色。山西質(zhì)量好的HE染色外包