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HE染色不管怎么操作,,始終無法染色或淡染答:這種情況一般因為組織固定時采用了酸性甲醛;或者組織在甲醛中浸泡時間太長;或者久置的甲醛變性分解為甲酸,。補救:防患于未然,,要么使用新鮮的中性甲醛固定,要么在存放的甲醛中加一點碳酸鈉中和甲酸,。對于已經(jīng)固定的組織可考慮再次固定,;對于已經(jīng)制出的片子,染色前采用5%重鉻酸鉀溶液浸泡半小時以上,,然后自來水漂洗5min,,可改善染色。也可以將切片放入3%硫酸鐵銨溶液中,,補充染色媒介,,增強蘇木素與組織的親和力(蘇木素染色必須要媒介才能染上,單純的蘇木素與組織的親和力很弱),。石蠟組織切片的HE染色,。青海靠譜的HE染色價格
HE染色細(xì)胞漿染色原理:細(xì)胞漿內(nèi)主要成分是蛋白質(zhì),,為兩性化合物,、細(xì)胞漿的染色與pH值有密切關(guān)系,當(dāng)pH調(diào)到蛋白質(zhì)等電點4.7-5.0時,,胞漿對外不顯電性,,此時酸或堿性染料不易染色。當(dāng)pH調(diào)到6.7-6.8時,,大于蛋白質(zhì)的等電點pH值,,表現(xiàn)酸性電離,而帶負(fù)電荷的陰離子,,可被帶正電荷的染料染色,,現(xiàn)時胞核也被染色,核和胞漿難以區(qū)分,。因此必須把pH調(diào)至胞漿等電點以下,,在染液中加入醋酸使胞漿帶正電荷(陽離子),就可被帶負(fù)電荷(陰離子)的染料染色,。伊紅Y是一種化學(xué)合成的酸性染料,,在水中離解成帶負(fù)電荷的陰離子,與蛋白質(zhì)的氨基正電荷(陽離子)結(jié)合而使細(xì)胞漿染色,,細(xì)胞漿,、紅細(xì)胞、肌肉,、結(jié)締組織,,嗜伊紅顆料等被***成不同程度的紅色或粉紅色,與藍色的細(xì)胞核形成鮮明的對比,。甘肅結(jié)果客觀的HE染色哪家好HE染色小攻略技巧分析,。
HE染色顯微鏡下見切片內(nèi)有大量水珠分析以及應(yīng)對原因:切片經(jīng)梯度乙醇處理后沒有完全脫水,,導(dǎo)致二甲苯透明中性樹膠封固后殘留大量水分,。對策:移去蓋玻片,用二甲苯溶解封固劑如中性樹膠,。將切片置入新鮮的無水乙醇中,,待切片重新脫水完全后,用新二甲苯透明,,中性樹膠封固,。所有用于脫水和透明的液體,在使用一定時間以后,,應(yīng)即時更換,。光鏡下切片某些區(qū)域難以聚焦分析以及應(yīng)對原因:蓋玻片上可能有封固切片的封固劑。對策:移去蓋玻片,,重新用干凈的蓋玻片封片
HE染色全名為蘇木精和伊紅染色方法,,是**基本的病理學(xué)染色技術(shù),。由于組織或細(xì)胞的不同成分對蘇木精的親和力不同及染色性質(zhì)不一樣。經(jīng)蘇木精染色后,,細(xì)胞核及鈣鹽粘液等呈藍色,,可用鹽酸酒精分化和弱堿性溶液顯藍,如處理適宜,,可使細(xì)胞核著清楚的深藍色,,胞漿等其它成分脫色。再利用胞漿染料伊紅染胞漿,,使胞漿的各種不同成分又呈現(xiàn)出深淺不同的粉紅色,。故各種組織或細(xì)胞成分與病變的一般形態(tài)結(jié)構(gòu)特點均可顯示出來。質(zhì)量好的HE具備條件1.細(xì)胞核與細(xì)胞漿藍紅相映,,鮮艷亮麗,;2.胞核鮮明、核膜,、核染色質(zhì)顆粒均清晰可見,;3.組織或一般結(jié)構(gòu)特點及假物質(zhì)成分均能顯示出來。脾臟組織HE染色如何觀察,。
HE染色石蠟和冰凍切片樣本的處理,樣品處理:a.對于石蠟切片:二甲苯中脫蠟5-10分鐘;換用新鮮的二甲苯,,再脫蠟5-10分鐘;無水乙醇5分鐘;90%乙醇2分;70%乙醇2分鐘;蒸餾水2分鐘.b.對于冰凍切片:蒸餾水2分鐘,。c對于培養(yǎng)細(xì)胞:用4%多聚甲醛固定10分鐘以上。蒸餾水洗滌2分鐘,。換用新鮮的蒸餾水,,再洗滌2分鐘。蘇木素伊紅(HE)染色對于上述處理好的樣品:蘇木素染色液染色5-10分鐘(可以根據(jù)染色結(jié)果和要求調(diào)整時間),。浸自來水中沖洗去多余的染色液,約10分鐘,。蒸餾水再洗滌一遍(數(shù)秒鐘),。95%乙醇5秒。伊紅染色液染色30秒-2分鐘(可以根據(jù)染色結(jié)果和要求調(diào)整時間),。此時,,如果需要直接觀察,可以用70%乙醇洗滌2次,。如需脫水,、透明后封片按后續(xù)步驟進行,70%乙醇洗滌后仍可按照后續(xù)步驟進行脫水,、透明和封片處理,。腎臟組織HE染色如何觀察,。甘肅結(jié)果客觀的HE染色哪家好
肺部組織HE染色如何觀察。青??孔V的HE染色價格
HE染色切片中出現(xiàn)類似色素樣的點狀結(jié)晶和黑色光滑的細(xì)胞核原因:切片封片前放置在空氣中時間太長,,以至于二甲苯揮發(fā)切片干燥所致。對策:移去組織切片上的蓋玻片和封固劑,,重新處理,。將切片水洗數(shù)分鐘,然后重新脫水,、透明,、封固。封片過程中要保持組織切片的輕度濕潤,,盡量不要讓其干燥,。細(xì)胞核呈紅、棕色改變原因:蘇木精染色液過度氧化和切片在蘇木精染液染色后返藍不足,。對策:首先,,每次染色之前檢查蘇木精染色液的染色能力,發(fā)現(xiàn)氧化過度應(yīng)及時更換,。其次,,可用流水、溫水或弱堿性溶液如稀氨水,、0.2%碳酸氫鈉等,,在蘇木精染色后,給切片以足夠的藍化時間,。青??孔V的HE染色價格