病理實驗外包常見染色介紹MASSON染色:masson染色是指用兩種或三種陰離子染料混合,,膠原纖維呈藍色,,肌纖維呈紅色。用來顯示組織中纖維以及炎性因子的染色方法之一,。Masson染色是顯示膠原纖維分布的經典染色方法,,利用染色的兩種不同分子量的陰離子在組織滲透性的差異,根據不同的滲透性能差異,,區(qū)分出不同的組織成分,。經Masson染色后,膠原纖維呈現藍色,,肌纖維紅色,,細胞核藍黑色。Masson染色可用作心梗模型,、肺纖維化,、肝纖維化以及腎纖維化模型的定性與膠原纖維沉積的半定量分析,。南京英瀚斯,專業(yè)的病理染色實驗服務平臺,。病理實驗外包檢測,,公司自有實驗室,歡迎考察,。陜西哪家做病理實驗外包
病理實驗外包,,病理染色多聚甲醛保存組織的注意事項:多聚甲醛放置過久其中的醛基可能會被氧化為酸,使溶液pH降低,,從而影響染色,。不同細胞或組織樣品所需的固定時間有所不同,應當根據細胞或組織的種類以及組織塊的大小來調整固定時間,。多聚甲醛雖然作用溫和,,但能硬化組織,固定時間過久會導致組織變脆,,切片時易碎,。因此固定時間通常不宜超過24小時。多聚甲醛可長期存在于固定過的細胞或組織樣品中,,固定完成后用適當的洗滌液或水沖洗數小時仍會有殘留,,因此后續(xù)實驗結果如果受醛基影響,須盡量洗去殘留的多聚甲醛,。醛基與抗原蛋白的氨基交聯形成羧甲基,,使抗原決定簇的三維構象出現空間障礙。分子間交聯形成的網格結構可能部分或完全掩蓋某些抗原決定簇,,使之不能充分暴露,,可造成假陰性的染色,影響免疫組化結果,。因此,,4%多聚甲醛固定的細胞或組織樣品在進行免疫組化檢測時,有時需要對抗原先進行修復,,然后才能進行免疫染色等后續(xù)操作,。陜西哪家做病理實驗外包電鏡檢測,病理實驗外包選南京英瀚斯,。
病理實驗外包,,病理染色常見染色介紹油紅O染色:油紅O脂肪染色法是指在日常病理診斷和科研工作中為了顯示組織內的脂肪常采用油紅O進行染色的方法,油紅O為脂溶性染料,,在脂肪內能高度溶解,,可特異性的使組織內甘油三酯等中性脂肪著色。肝細胞內的脂肪滴呈紅色,細胞核呈藍色1.標本人或動物的肝組織等,甲醛—鈣液固定,冰凍切片,厚10μm。2.改良的油紅O染色液油紅O0.5g,50%乙醇100ml,。將油紅O溶于乙醇內,且不斷攪拌至完全溶解即可,。配制好的染液置磨口瓶內保存?zhèn)溆谩?.染色步驟①切片干燥后入50%乙醇稍洗;②油紅O乙醇染液作用8min;③50%乙醇分化,自來水終止分化;④蘇木素復染核,自來水返藍,甘油明膠封片。
病理實驗外包,,病理染色常見染色介紹TUNEL染色:基因組DNA斷裂時,,暴露的3’-OH可以在末端脫氧核苷酸轉移酶(TerminalDeoxynucleotidylTransferase,TdT)的催化下加上熒光素(FITC)標記的dUTP(fluorescein-dUTP),從而可以通過熒光顯微鏡或流式細胞儀進行檢測,,這就是TUNEL(TdT-mediateddUTPNick-EndLabeling)法檢測細胞凋亡的原理,。實驗步驟使細胞或組織貼在載玻片上?固定?洗滌?通透?洗滌?預平衡?用熒光素12-dUTP標記斷裂的DNA鏈?終止反應?洗滌?封片?分析樣品南京英瀚斯,專業(yè)的病理染色實驗服務平臺,。病理實驗外包研究整體解決方案_英瀚斯生物,。
病理實驗外包,病理染色HE染色常見問題:Q3:細胞核染色過淺,,顏色暗淡答:切片在蘇木素染液中停留過短,或蘇木素過度氧化失效,,或分化時間太長,。對策:重新染色。將組織切片放入0.01%氫氧化鈉,、0.5%氨水,、飽和的碳酸氫鈉溶液、乙醇溶液,,每個3-5min即可,,接著重新染色??梢赃m當地組織的嗜堿性以增強核染色,,如Zenker液固定的切片可放入5%碳酸氫鈉溶液中3h,自來水沖洗5-10min染色,,或Bouin液固定的切片可放入5%碳酸氫鈉溶液中1h,,自來水沖洗10min染色。Q4:細胞核染色過深,,胞漿著藍色答:切片在蘇木素染液中停留過長,;或切片太厚;或分化時間太短,。這種情況首先鏡下看看切片厚度(比較好厚度1-2層細胞核),,要么重新染色,要么重新制片,。南京英瀚斯,,專業(yè)的病理染色實驗服務平臺。病理實驗外包檢測,經驗豐富,,操作熟練,。陜西哪家做病理實驗外包
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病理實驗外包,,病理染色骨組織的處理方式:組織里存有鈣鹽可妨礙用常規(guī)方法制作良好切片,。骨組織及鈣化病灶,經過固定后,,需要先將鈣鹽除去使組織軟化,,才能進行常規(guī)切片。如果脫鈣不全,,則切片容易撕開或碎裂,,損傷切片刀刀刃。脫去鈣鹽的過程,,稱為脫鈣,。骨組織固定24小時后,鋸下不超過0.5cm厚的薄骨片,,以4%甲醛溶液固定后,,進行脫鈣。骨組織過厚則需延長脫鈣時間,,但長時間浸于強酸會影響切片染色效果,。取材骨組織固定于10%甲醛溶液24小時后再鋸取厚度約0.5cm骨片固定以10%甲醛溶液固定2天脫鈣將組織置于脫鈣劑中,每日更換新鮮液,,直至組織軟化為止除酸流水沖洗24小時脫水,、浸蠟、切片進行常規(guī)脫水,、透明,、浸蠟、切片南京英瀚斯,,專業(yè)的病理染色實驗服務平臺,。陜西哪家做病理實驗外包