什么是免疫組化？免疫組化的原理是什么,？

1,、定義：用標記的特異性抗體對組織切片或細胞標本中某些化學成分的分布和含量進行組織和細胞原位定性、定位或定量研究,，這種技術稱為免疫組織化學（immunohistochemistry）技術或免疫細胞化學（immunocytochemistry）技術,。

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2,、原理：根據抗原抗體反應和化學顯色原理，組織切片或細胞標本中的抗原先和一抗結合,，再利用一抗與標記生物素,、熒光素等的二抗進行反應，前者再用標記辣根過氧化物酶（HRP）或堿性磷酸酶（AKP）等的抗生物素（如鏈霉親和素等）結合,，通過呈色反應或熒光來顯示細胞或組織中化學成分,，在光學顯微鏡或熒光顯微鏡下可清晰看見細胞內發(fā)生的抗原抗體反應產物,，從而能夠在細胞爬片或組織切片上原位確定某些化學成分的分布和含量。 英瀚斯生物,，組織包埋,、切片、染色,、免疫組化拍照,、報告分析，一站式搞定,！江西什么是免疫組化怎么樣

免疫組化在在病理診斷中,，隨著各種抗體新的用途不斷被發(fā)現及越來越多的新型抗體的出現，免疫組化在cancer診斷及鑒別診斷,、分類,、預后判斷等方面產生了重大的影響。由于免疫組化技術也存在一些局限性,，因此,，深入研究免疫組化原理和技術，并努力實現規(guī)范化的操作,，才能充分發(fā)揮免疫組化在病理的診斷及鑒別診斷,、判斷預后、指導臨床醫(yī)療中的作用,。

觀察組織切片中抗原的數量及其在組織中的分布情況,，對抗原進行定位、定性及定量的研究,，稱為免疫組織化學,，由于抗原與抗體特異性結合，因此通過免疫組化使標記抗體的顯色劑(酶,、熒光素,、同位素、金屬離子等等)顯色來確定組織細胞內抗原(多肽和蛋白質),。IHC所用標本主要為兩大類:組織標本和細胞標本,，其中制作組織標本更常用、更基本的方法是石蠟切片,。石蠟切片對于組織形態(tài)保存好,，有利于各種染色對照觀察，而且能長期保存;石蠟切片中使用的甲醛固定劑對組織內抗原暴露有一定的影響,，但可進行抗原修復,，是免疫組化中優(yōu)先選擇的組織標本制作方法。 山東組織免疫組化英瀚斯實驗外包,，病理染色切片免疫組化,，效率高,！

免疫組化實驗注意事項總結：

?本實驗室所用切片一般是石蠟切片。

?烘片：使蠟片水分蒸發(fā),，石蠟軟化,，組織切片牢固貼在玻片上；烘片至跟烘片前透明度有差異,。

?抗原修復時,，使片子始終浸沒在修復液中，液體不能干,。

?一抗孵育在37度培養(yǎng)箱,，濕盒放置1h，省時間和結合效果好,，不要超過1h,，容易過染。

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?二抗使用：兩個二抗放大信號或一個二抗；若抗體信號強,，可不用放大信號,，盡量增大信噪比。

?10XDAB在常溫溶解,，盡可能現用現配,，放于4度儲存時間久了效果不佳。

?復水和脫水時所用的梯度酒精不可混用,，要區(qū)分開,。

?加抗體和顯色液時，都要將片子甩干,，在半干半濕的狀態(tài)下再加，不然容易造成溶液的二次稀釋,。

?整個操作過程中在顯色之前,，一定不能干片。

免疫組化實驗所用的組織和細胞標本是什么樣的,？

實驗所用主要為組織標本和細胞標本兩大類,，前者包括石蠟切片（病理大片和組織芯片）和冰凍切片，后者包括組織印片,、細胞爬片和細胞涂片,。其中石蠟切片是制作組織標本**常用、**基本的方法,，對于組織形態(tài)保存好,，且能作連續(xù)切片,，有利于各種染色對照觀察；還能長期存檔,，供回顧性研究,；石蠟切片制作過程對組織內抗原暴露有一定的影響，但可進行抗原修復,，是免疫組化中優(yōu)先的組織標本制作方法,。

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細胞爬片免疫組化檢測實驗步驟

1、選擇貼壁良好的細胞爬片,，用4%多聚甲醛固定后15min后自然晾干,。

2、PBS洗3次,，每次5min,。3、切片放入3%過氧化氫溶液,，室溫下孵育10min,，以阻斷內源性過氧化物酶。

4,、PBS洗3次,，每次5min，甩干后5%BSA封閉20min（封閉電荷）,。

5,、去除BSA液，每張切片加入50μl稀釋的一抗覆蓋組織,，4℃過夜,。

6、PBS洗3次,，每次5min,。

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7,、去除PBS液,，每張切片加50μl-100μl相應種屬的二抗，4℃孵育50min,。

8,、PBS洗3次,，每次5min。

9,、去除PBS液,，每張切片加50-100μl新鮮配制DAB溶液，顯微鏡控制顯色,。

10,、顯色完全后，蒸餾水或自來水沖洗,，蘇木素復染,，1%鹽酸酒精分化（1s），自來水沖洗,，氨水返藍,，流水沖洗。

11,、切片經過梯度酒精（70-100%）10min一個梯度,，脫水干燥，二甲苯透明,，中性樹膠封固,。 免疫組化如何得到好的效果？江西什么是免疫組化怎么樣

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免疫組化指的是根據抗體與抗原特異結合的原理來檢測組織切片中的抗原（如蛋白）,。immuno的詞根來自操作中所使用的抗體，而histo意味著組織,。另一種類似的技術是免疫細胞化學（Immunocytochemistry,，簡稱ICC）。這兩個詞大家經?；熘?，看著好像差不多，但實際上還是有點區(qū)別,。IHCvsICC對于IHC,，組織是來自患者或動物，經過冷凍或石蠟包埋,。將這些組織制成約4μm厚的切片，封片后再處理,。通過這種方法,，研究人員可觀察細胞組分的定位，同時維持周圍組織的原先結構,。對于ICC,，大部分細胞外基質及其他基質組分被去除,，只剩下整個細胞來染色。ICC的來源可以是細胞懸液,，來自患者或動物（如血涂片,、拭子等），或在實驗室中進行的組織培養(yǎng)細胞系,。 江西什么是免疫組化怎么樣

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