免疫組化染色切片的好壞直接影響著病理醫(yī)生對(duì)其染色結(jié)果的判斷,，進(jìn)而影響病理診斷，所以制作一張良好的免疫組化切片至關(guān)重要,，它需要病理醫(yī)生與病理技師兩者間的相互協(xié)調(diào),，密切配合和共同努力，病理醫(yī)生選擇抗體,，設(shè)置對(duì)照,，判讀結(jié)果,，指導(dǎo)技術(shù);而技術(shù)人員進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作,，保證染色質(zhì)量。在免疫組化切片的制作過(guò)程存在多個(gè)環(huán)節(jié),，每一環(huán)節(jié)的失誤都可能影響檢測(cè)結(jié)果,，如抗原保存，蛋白酶消化,，增強(qiáng)技術(shù)及對(duì)抗體的管理,、使用和試劑的濃度等等，因此制作一張高質(zhì)量的免疫組織化學(xué)切片是多方面相互配合的結(jié)果,。南京有靠譜的能做免疫組化的公司嗎,？寧夏免疫組化要多久

免疫組化實(shí)驗(yàn)所用的組織和細(xì)胞標(biāo)本是什么樣的？

實(shí)驗(yàn)所用主要為組織標(biāo)本和細(xì)胞標(biāo)本兩大類,，前者包括石蠟切片（病理大片和組織芯片）和冰凍切片,，后者包括組織印片、細(xì)胞爬片和細(xì)胞涂片,。其中石蠟切片是制作組織標(biāo)本**常用,、**基本的方法,，對(duì)于組織形態(tài)保存好，且能作連續(xù)切片,，有利于各種染色對(duì)照觀察,；還能長(zhǎng)期存檔，供回顧性研究,；石蠟切片制作過(guò)程對(duì)組織內(nèi)抗原暴露有一定的影響,，但可進(jìn)行抗原修復(fù)，是免疫組化中優(yōu)先的組織標(biāo)本制作方法,。

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在臨床應(yīng)用中,，免疫組化還可以進(jìn)一步分類不同qi官與組織交界處cancer,。由于重疊的特征，在一些組織qi官交界處的cancer,，只憑組織學(xué)基礎(chǔ)對(duì)cancer進(jìn)行分類很困難,。如胃腸道梭形細(xì)胞肉瘤是肌肉起源的平滑肌肉瘤，是間質(zhì)起源的胃腸道間質(zhì)瘤(GIST),，還是神經(jīng)起源的神經(jīng)鞘瘤;同樣發(fā)生于組織交界處的cancer有睪丸胚胎cancer與精原細(xì)胞cancer,，兩者較難區(qū)別，且醫(yī)療與預(yù)后明顯的不同,，但用免疫組化檢測(cè)角蛋白就較易于區(qū)別:角蛋白陰性則為精原細(xì)胞cancer,，而角蛋白陽(yáng)性則為胚胎cancer。

免疫組化結(jié)果中的假陰性是指所有抗體標(biāo)記的切片均呈陰性,，無(wú)陽(yáng)性信號(hào),，假陰性結(jié)果不是真實(shí)的反應(yīng)。導(dǎo)致假陰性結(jié)果的原因有:(1)抗原修復(fù)方法選擇不當(dāng),，根據(jù)不同的抗原特點(diǎn)采用不同的修復(fù)方法,，大多數(shù)抗體要求熱修復(fù)，熱修復(fù)又包括高壓修復(fù),、微波修復(fù)及煮沸熱修復(fù);而對(duì)某些細(xì)胞內(nèi)抗原和細(xì)胞間質(zhì)抗原需要用酶消化,，如表皮生長(zhǎng)因子(EGFR)要求胃蛋白酶(Pepsin)消化，而Vimentin則不用修復(fù);(2)一抗本身的問(wèn)題:一抗效價(jià)降低或失效,。在免疫組化中染色結(jié)果的假陰性會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)診或漏診,，進(jìn)而影響臨床診斷及延誤醫(yī)療。解決這一問(wèn)題的可通過(guò)設(shè)立陽(yáng)性對(duì)照，比較兩者染色結(jié)果,。若陽(yáng)性對(duì)照有表達(dá),，表明試劑和染色體系及實(shí)驗(yàn)步驟均無(wú)問(wèn)題;若陽(yáng)性對(duì)照無(wú)表達(dá)，則檢測(cè)過(guò)程中某一試劑或某個(gè)步驟存在問(wèn)題,，應(yīng)逐一查找原因,。英瀚斯生物，組織包埋,、切片,、染色、免疫組化拍照,、報(bào)告分析,，一站式搞定！

免疫組化的局限性：在病理診斷中,，隨著各種抗體新的用途不斷被發(fā)現(xiàn)及越來(lái)越多的新型抗體的出現(xiàn),，免疫組化在病理診斷和醫(yī)療中已有了很重要的位置，對(duì)于cancer診斷,、鑒別診斷,、分類及諸多方面產(chǎn)生了重大的影響。但是免疫組化技術(shù)還存在著缺陷和不足,，作為病理醫(yī)生和病理技術(shù)人員不僅要充分認(rèn)識(shí)到缺陷和不足,，而且要努力避免由于缺陷和不足給診斷帶來(lái)的誤區(qū)，這就要求病理醫(yī)生和病理技術(shù)人員在工作中不斷學(xué)習(xí)與研究,，在實(shí)際操作中總結(jié)經(jīng)驗(yàn)教訓(xùn),，分析失敗原因，努力實(shí)現(xiàn)操作規(guī)范化,、標(biāo)準(zhǔn)化,，才能充分發(fā)揮免疫組化在病理診斷及鑒別診斷、臨床醫(yī)療中的指導(dǎo)作用,。免疫組化失敗的原因,？新疆細(xì)胞免疫組化實(shí)驗(yàn)

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免疫組化結(jié)果要如何分析,？

 （1）陽(yáng)性著色細(xì)胞計(jì)數(shù)法。在40*光鏡下,，隨機(jī)選擇不重疊的10個(gè)視野,，機(jī)器或人工計(jì)數(shù)陽(yáng)性著色細(xì)胞，每組3~6張不同動(dòng)物組織切片,，然后進(jìn)行組間比較即可,。

（2）灰密度分析法?？梢酝ㄟ^(guò)在不同組別和不同動(dòng)物組織切片上選擇相同區(qū)域,、相同條件下用image j進(jìn)行灰密度分析,，然后進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析即可。

（3）評(píng)分法,。用光學(xué)顯微鏡下對(duì)組織切片分別按染色程度（0~3分為陰性著色,、淡黃色、淺褐色,、深褐色）,、陽(yáng)性范圍進(jìn)行評(píng)分（1~4分為0~25%、26~50%,、51~75%,、76~100%），**終可以分?jǐn)?shù)相加,，再進(jìn)行比較,。對(duì)于以上這幾種方法，各有利弊,，請(qǐng)細(xì)心選擇,。要想得到正確結(jié)果的前提是你要做出著色均勻、背景很淺的高質(zhì)量切片,。

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