確定來源不明的轉(zhuǎn)移瘤的原發(fā)部位,，臨床上免疫組化也可以進行操作。對于來源不明的轉(zhuǎn)移瘤,，用免疫組化技術(shù)有助于確定惡性cancer的組織學(xué)來源,，進一步確定原發(fā)部位。如角蛋白抗體(CK20)在胃腸道cancer,、膽管cancer,、胰腺cancer中陽性，而在肺cancer,、乳腺cancer,、腎cancer中陰性;Tg陽性可考慮甲狀腺轉(zhuǎn)移;波形蛋白(Vimentin)陽性支持肉瘤的診斷;前列腺特異性抗原(PSA)陽性可考慮前列腺轉(zhuǎn)移;甲狀腺球蛋白陽性可考慮甲狀腺濾泡細胞cancer;肌動蛋白(Actin)、肌球蛋白(Myosin),、結(jié)蛋白(Desmin),、肌紅蛋白(Myoglobin)陽性可考慮橫紋肌肉瘤;S-100蛋白陽性支持黑色素瘤的診斷;等等這些都為cancer的醫(yī)療及預(yù)后提供了依據(jù)。免疫組化的那些小知識,，都在這里,！甘肅靠譜免疫組化哪家好

英瀚斯生物為您整理免疫組化實驗步驟

1、石蠟切片置于65℃烘箱中烘片2h,，脫蠟至水,，用PBS沖洗三次，每次5min,。

2,、切片置于EDTA緩沖液中微波修復(fù)，中火至沸后斷電,，間隔10min低火至沸,。

3、自然冷卻后PBS洗3次,，每次5min,。4、切片放入3%過氧化氫溶液,，室溫下孵育10min,，以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶。

5,、PBS洗3次,，每次5min，甩干后5%BSA封閉20min（封閉電荷）。

6,、去除BSA液,，每張切片加入50μl稀釋的一抗覆蓋組織，4℃過夜,。

7,、PBS洗3次，每次5min,。

8,、去除PBS液，每張切片加50μl-100μl相應(yīng)種屬的二抗,，4℃孵育50min,。

9、PBS洗3次,，每次5min,。

10、去除PBS液,，每張切片加50-100μl新鮮配制DAB溶液,，顯微鏡控制顯色。

11,、顯色完全后,，蒸餾水或自來水沖洗，蘇木素復(fù)染,，1%鹽酸酒精分化（1s）,，自來水沖洗，氨水返藍,，流水沖洗,。

12、切片經(jīng)過梯度酒精（70-100%）10min一個梯度,，脫水干燥，二甲苯透明,，中性樹膠封固,。 吉林組織免疫組化推薦做好免疫組化，你需要了解這些,！

免疫組化的結(jié)果分析：

免疫組化實驗通常需要設(shè)置陽性對照,、陰性對照（或替代對照）（陽性對照是排除方法和實驗系統(tǒng)有無問題；陰性對照與替代對照是排除有無非特異性染色）,。一般情況下,，陽性對照顏色的特點為：Ag定位，包漿、胞核,、胞膜,、間質(zhì)具有結(jié)構(gòu)性。且染色的強度不同（顏色深淺不一）,；陰性對照的特點為：染色細胞與組織無區(qū)別,，顏色具有彌散性，分布均勻,。

英瀚斯生物可承接各類病理染色,，包括免疫組化。

說明：免疫組化實驗可以對結(jié)果進行定量分析,，但要實驗得到的必須是高質(zhì)量的染色切片,，要求背景染色淺且特異性染色較深，這樣分析的結(jié)果才會比較準確,。

免疫組化分類中免疫酶標方法,，英瀚斯生物為您介紹。免疫酶標方法是繼免疫熒光后,，于60年代發(fā)展起來的技術(shù),。基本原理是先以酶標記的抗體與組織或細胞作用,，然后加入酶的底物,，生成有色的不溶性產(chǎn)物或具有一定電子密度的顆粒，通過光鏡或電鏡,，對細胞表面和細胞內(nèi)的各種抗原成分進行定位研究,。免疫酶標技術(shù)是目前定位準確、對比度好,、染色標本可長期保存,，適合于光、電鏡研究等,。免疫酶標方法的發(fā)展非常迅速,，已經(jīng)衍生出了多種標記方法，目前在病理診斷中廣為使用的當屬***法（過氧化物酶-抗過氧化物酶）,、ABC法（卵白素-生物素-過氧化物酶復(fù)合物）,、SP法（鏈霉菌抗生物素蛋白-過氧化物酶）、即用型二步法（聚合物鏈接）等,。免疫組化技術(shù)的原理,、分類和優(yōu)點！

免疫組化（IHC）利用抗體檢測組織切片中蛋白質(zhì)和其他抗原的定位,。

英瀚斯生物實驗外包,，自有專業(yè)病理實驗室，可高效完成免疫組化檢測。

抗體-抗原的相互作用通過有色酶底物顯色檢測或熒光染料熒光檢測進行觀察,。雖然IHC在定量方面不如蛋白質(zhì)印跡或ELISA,，但是IHC可以提供完整組織中蛋白定位的寶貴信息。蛋白表達譜對病理學(xué)家以及作為診斷工具都具有重要意義,。

IHC實驗成功的關(guān)鍵在于穩(wěn)定,、優(yōu)化且可重復(fù)的染色方案，而該方案應(yīng)使用高質(zhì)量的特異性試劑,。 病理免疫組化多少錢,？云南什么是免疫組化怎么樣

免疫組化流程是什么樣的？甘肅靠譜免疫組化哪家好

免疫組化應(yīng)該選擇石蠟切片還是冰凍切片,？ 

（1）要求做冰凍切片的不一定能做石蠟切片,，這是***我向一老師請教得出的結(jié)論。因為作石蠟切片時要高溫烤片,，可能會破壞組織的抗原性,，如果組織的抗原性較穩(wěn)定，則可作石蠟切片,；但是要求做石蠟切片的,，可作冰凍切片。

（2）冰凍切片的優(yōu)點是能夠較好的保存組織的抗原免疫活性,，做免疫組化時不需抗原修復(fù)這一步,。缺點是細胞內(nèi)易形成冰晶而破壞細胞結(jié)構(gòu)，可能會使抗原彌散,；切片厚度較石蠟的厚,，做的片子沒石蠟的漂亮。當你買一抗時,，目錄上都寫著做什么樣的切片,，如果它寫著只能做冰凍，就不能做石蠟,，如寫著兩者都可,，那就都能做。

（3）石蠟切片的優(yōu)點可以保持組織細胞的形態(tài)結(jié)構(gòu),，且容易存放在室溫,，而冰凍切片比較麻煩，一定要存在-80度的低溫冰箱中,，尤其是用來做原位雜交的的切片，為了防止RNA降解,，保存一貫很重要,。由于石蠟切片可以切到4微米左右，所以原位雜交探針容易滲透到組織中去，容易成功,，而且得到的顏色/形態(tài)都較冰凍切片好,。

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