HE染色堿染料染主要使細(xì)胞核內(nèi)的染色質(zhì)與胞質(zhì)內(nèi)的核糖體著色,。學(xué)上常用的一種染色方法為蘇木精 伊紅染色法。蘇木精 伊紅染色法 ( hematoxylin-eosin staining ) ,,簡稱HE染色法 ,石蠟切片技術(shù)里常用的染色法之一 ,。蘇木精染液為堿 ,,主要使細(xì)胞核內(nèi)的染色質(zhì)與胞質(zhì)內(nèi)的核糖體著紫藍(lán)色 ,;伊紅為酸染料 ,,主要使細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞外基質(zhì)中的成分著紅色 。細(xì)胞核被蘇木精染成鮮明的藍(lán)色,,軟骨基質(zhì),、鈣鹽顆粒呈深藍(lán)色,粘液呈灰藍(lán)色,。細(xì)胞漿被伊紅染成深淺不同的粉紅色至桃紅色,,胞漿內(nèi)嗜酸顆粒呈強(qiáng)的鮮紅色。膠原纖維呈淡粉紅色,,力纖維呈亮粉紅色,,紅血球呈橘紅色,蛋白液體呈粉紅色,。關(guān)于HE染色,,常用的結(jié)果分析原理。廣東專業(yè)的HE染色多少錢
HE染色觀察細(xì)胞凋亡,,凋亡檢測中形態(tài)學(xué)方法是**直觀,、可靠的方法之一。對(duì)組織和各種細(xì)胞進(jìn)行染色后,,在光學(xué)顯微鏡,、熒光顯微鏡或電子顯微鏡下觀察,通過觀察細(xì)胞的形態(tài)或染色的類型來判斷凋亡的發(fā)生與否。細(xì)胞涂片或細(xì)胞甩片的制備:對(duì)于貼壁細(xì)胞,,可將蓋玻片放于培養(yǎng)器皿中,,讓培養(yǎng)細(xì)胞長于玻片上,然后用藥物誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡后取出,,用4%多聚甲醛固定5min,。對(duì)于懸浮細(xì)胞,用藥物誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡后,,離心1000r/min收集細(xì)胞,,用PBS洗2次,收集調(diào)整細(xì)胞數(shù)為1X105/ml,,涂片或用離心甩片,,用4%多聚甲醛固定5min;在光學(xué)顯微鏡下,,貼壁細(xì)胞由原來的梭形或多角形變小,、變圓,核呈藍(lán)色或藍(lán)黑色,,胞漿呈淡紅色,,核固縮、破碎,,形成凋亡小體等,。懸浮細(xì)胞,整個(gè)細(xì)胞皺縮,,核固縮,,破碎,形成凋亡小體,,染色質(zhì)顏色加深等,。江蘇推薦的HE染色價(jià)格腎臟組織HE染色如何觀察。
HE染色結(jié)果判讀:細(xì)胞核被蘇木精染成鮮明的藍(lán)色,,軟骨基質(zhì)、鈣鹽顆粒呈深藍(lán)色,,粘液呈灰藍(lán)色,。細(xì)胞漿被伊紅染成深淺不同的粉紅色至桃紅色,胞漿內(nèi)嗜酸性顆粒呈反光強(qiáng)的鮮紅色,。膠原纖維呈淡粉紅色,,彈力纖維呈亮粉紅色,紅血球呈橘紅色,,蛋白性液體呈粉紅色,。著色狀況與組織或細(xì)胞的種類有關(guān),也隨其生活周期及病理變化而改變。例如,,細(xì)胞在新生時(shí)期胞漿對(duì)伊紅著色較淡或輕度嗜堿,,當(dāng)其衰老時(shí)或發(fā)生退行性變則呈現(xiàn)嗜伊紅濃染。膠原纖維在老化和出現(xiàn)透明變性時(shí),,伊紅著色由淺變深,。H-E染色評(píng)定標(biāo)準(zhǔn):(1)切片完整,厚度4-6微米,,厚薄均勻,,無皺褶無刀痕;(2)染色核漿分明,,紅藍(lán)適度,,透明潔凈,封裱美觀,。
HE染色原理1,、細(xì)胞核染色的原理:蘇木精為堿性天然染料,可使細(xì)胞核著色,。細(xì)胞核內(nèi)染色質(zhì)的成分主要是DNA,,在DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu)中,兩條核苷酸鏈上的磷酸基向外,,使DNA雙螺旋的外側(cè)帶負(fù)電荷,,呈酸性,很容易與帶正電荷的蘇木精堿性燃料以離子鍵或氫鍵結(jié)合而被染色,。蘇木精在堿性溶液中呈藍(lán)色,,所以細(xì)胞核被染成藍(lán)色。2,、細(xì)胞漿染色的原理:伊紅是一種化學(xué)合成的酸性染料,,在一定條件下可使細(xì)胞漿著色。細(xì)胞漿的主要成分是蛋白質(zhì),,為兩性化合物,,細(xì)胞漿的染色與染液的pH在胞漿蛋白質(zhì)等電點(diǎn)(4.7—5.0)以下時(shí),胞漿蛋白質(zhì)以堿式電離,,則細(xì)胞漿帶正電荷,,就可被帶負(fù)電荷的酸性染料染色。伊紅在水中離解成帶負(fù)電荷的陰離子,,與胞漿蛋白質(zhì)帶正電荷的陽離子結(jié)合,,使細(xì)胞漿著色,呈現(xiàn)紅色,。HE染色過程中常見的問題以及應(yīng)對(duì)方法,。
HE染色樣本組織固定與切片:首先將組織樣本進(jìn)行常規(guī)的石蠟包埋,。在模具中加入液態(tài)石蠟,將待包埋的組織樣本放入石蠟中,,確保組織位置規(guī)整,。補(bǔ)充少許液態(tài)的石蠟后,進(jìn)行降溫冷凍,,使石蠟變?yōu)楣虘B(tài)達(dá)到組織固定的效果,,然后使用石蠟切片機(jī)進(jìn)行切片,厚度在4-8um左右,。將切完后的組織切片放入載玻片上使用40℃溫水浸泡使組織充分伸展,。組織樣本脫蠟:將待測組織樣本切片放于二甲苯中,充分浸泡10min,,浸泡完后更換二甲苯繼續(xù)浸泡10min,,目的是使用二甲苯將切片中的石蠟溶解,這樣可以在進(jìn)行染液染色的時(shí)候,,染液可以充分進(jìn)入組織種,,同時(shí),二甲苯還可以起到透明的作用,,使切片更容易觀察,。HE染色中固定液如何配置。江蘇推薦的HE染色價(jià)格
HE染色取材和樣本保存方式,。廣東專業(yè)的HE染色多少錢
HE染色知識(shí)點(diǎn)1:對(duì)送檢組織標(biāo)本的要求送檢組織標(biāo)本在手術(shù)切除或活檢后應(yīng)當(dāng)立即放入4%中性緩沖甲醛溶液中固定,。尸檢標(biāo)本應(yīng)當(dāng)盡量在死亡后盡早取材固定。送檢組織需要全部取材的,,應(yīng)當(dāng)在送檢單上注明,,有特殊要求(如細(xì)菌培養(yǎng)、解釋道化學(xué)分析等)應(yīng)當(dāng)事先聯(lián)系,,并且在標(biāo)本未固定前進(jìn)行處理,。知識(shí)點(diǎn)2:組織取材要求在對(duì)送檢組織標(biāo)本進(jìn)行詳細(xì)檢查的基礎(chǔ)上,根據(jù)診斷的需要,,確定取材的部位和塊數(shù),。切取的組織應(yīng)當(dāng)按照不同的部位分別給予不同的編號(hào)或標(biāo)記,以便鏡檢時(shí)核對(duì),。另外,,盡可能在取材前對(duì)有意義的標(biāo)本的表面及剖面鏡下攝影,并編號(hào)存檔南京英瀚斯,,專業(yè)的病理染色實(shí)驗(yàn)服務(wù)平臺(tái)。廣東專業(yè)的HE染色多少錢
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