HE染色病理技術(shù)中**常用的一種方法,,通過它可以做出病理診斷和發(fā)現(xiàn)尋求別的輔助方法,以達(dá)到準(zhǔn)確,,完整的病理診斷,。一、染色目的 病理學(xué)的所有切片,,都必須通過一種以上的染料,,通過各種不同的方法,,將切片中各種不同的物質(zhì),,在不同染液的作用下,將其顯示出來,,使之在光學(xué)顯微鏡下,,能夠完全的觀看各種結(jié)構(gòu)。例如,,HE染色,,好質(zhì)量的切片可以清晰地顯示出多不同的結(jié)構(gòu),細(xì)胞核著藍(lán)黑色,細(xì)胞漿著粉紅色,,軟骨著藍(lán)色等,。清晰的結(jié)構(gòu)為診斷提供的依據(jù),因此,,染色技術(shù)也是病理技術(shù)中的重要組成部分,,必須不斷地總結(jié),方能提高,。HE染色的基本原理和結(jié)果分析,。湖南比較好的HE染色
HE染色伊紅著色淡分析及應(yīng)對(duì)原因:(1)伊紅染液的pH值可能大于5;(2)藍(lán)化液殘留過多,;(3)切片太?。唬?)切片經(jīng)伊紅染色后在乙醇脫水時(shí)間過長(zhǎng),。對(duì)策:檢查伊紅染液的pH值,,如果必要的話,用乙酸將其調(diào)節(jié)在4~5之間,,從而使伊紅染色彩艷麗,。確保每次藍(lán)化步驟完成后,使用的弱堿性溶液被充分洗去,,玻片上沒有殘留的弱堿性溶液,。檢查切片的厚度。脫水時(shí)不要讓切片在低濃度乙醇停留時(shí)間過長(zhǎng),,因?yàn)楹嗟牡蜐舛纫掖紩?huì)將伊紅的顏色分化掉,。山東性價(jià)比高的HE染色價(jià)格HE染色,即是蘇木精-伊紅染色法,,是形態(tài)學(xué)比較常用的染色方法,。
HE染色是目前國(guó)內(nèi)外病理診斷上***采用的常規(guī)染色方法。切片質(zhì)量的好壞,,可直接影響疾病診斷的及時(shí)與準(zhǔn)確性,。因此,能制作出一張高質(zhì)量的HE染色切片,,是必須掌握的技術(shù)之一,。送檢樣本經(jīng)4%多聚甲醛固定,固定狀態(tài)良好后,,嚴(yán)格按照本單位病理實(shí)驗(yàn)檢測(cè)SOP程序進(jìn)行修剪,、脫水、包埋,、切片,、染色,、封片***鏡檢合格的樣片。在顯微鏡下瀏覽切片或?yàn)g覽數(shù)字切片,,在不同倍數(shù)下詳細(xì)觀察組織切片情況,,對(duì)切片中基本病理改變?nèi)绯溲⒂傺?、出血,、水腫、變性,、壞死,、增生、纖維化,、機(jī)化,、肉芽組織、炎性變化等情況文字描述,,并反映出片子之間的差異,。對(duì)典型病變部位成像并在word文檔中用箭頭標(biāo)識(shí)。
HE染色法的話,,不能準(zhǔn)確說出細(xì)胞器的顏色,,實(shí)驗(yàn)記錄或考試時(shí)只能說染色效果為 :細(xì)胞核藍(lán)色,胞質(zhì),、肌纖維,、膠原纖維和紅細(xì)胞呈深淺不一的紅色?;蛘咴敿?xì)說明如下:細(xì)胞核被蘇木精染成鮮明的藍(lán)色,,軟骨基質(zhì)、鈣鹽顆粒呈深藍(lán)色,,粘液呈灰藍(lán)色,。細(xì)胞漿被伊紅染成深淺不同的粉紅色至桃紅色,胞漿內(nèi)嗜酸性顆粒呈反光強(qiáng)的鮮紅色,。膠原纖維呈淡粉紅色,,彈力纖維呈亮粉紅色,紅血球呈橘紅色,,蛋白性液體呈粉紅色,。蘇木精染液為堿性 ,主要使細(xì)胞核內(nèi)的染色質(zhì)與胞質(zhì)內(nèi)的核糖體著紫藍(lán)色 ;伊紅為酸性染料 ,主要使細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞外基質(zhì)中的成分著紅色,。HE染色是常見的病理染色,,是比較基礎(chǔ)是病理染色之一。
HE染色常見問題:Q3:細(xì)胞核染色過淺,,顏色暗淡答:切片在蘇木素染液中停留過短,或蘇木素過度氧化失效,或分化時(shí)間太長(zhǎng),。對(duì)策:重新染色,。將組織切片放入0.01%氫氧化鈉、0.5%氨水,、飽和的碳酸氫鈉溶液,、乙醇溶液,每個(gè)3-5min即可,,接著重新染色,。可以適當(dāng)?shù)亟M織的嗜堿性以增強(qiáng)核染色,,如Zenker液固定的切片可放入5%碳酸氫鈉溶液中3h,,自來水沖洗5-10min染色,或Bouin液固定的切片可放入5%碳酸氫鈉溶液中1h,,自來水沖洗10min染色,。Q4:細(xì)胞核染色過深,胞漿著藍(lán)色答:切片在蘇木素染液中停留過長(zhǎng),;或切片太厚,;或分化時(shí)間太短。這種情況首先鏡下看看切片厚度(比較好厚度1-2層細(xì)胞核),,要么重新染色,,要么重新制片。南京英瀚斯,,專業(yè)的病理染色實(shí)驗(yàn)服務(wù)平臺(tái),。HE染色規(guī)范化流程以及注意事項(xiàng)。湖南比較好的HE染色
海馬組織HE染色如何觀察,。湖南比較好的HE染色
HE染色注意事項(xiàng):1,、染色時(shí)調(diào)節(jié)pH值很重要。如果組織塊在福爾馬林中固定時(shí)間長(zhǎng),,組織酸化而影響細(xì)胞核著色,。因此,要在自來水中沖洗時(shí)間長(zhǎng)一些或在飽和碳酸鋰水溶液中處理10-30min,,這樣可以使細(xì)胞核著色較深,。染伊紅時(shí)胞漿著色不佳,可在伊紅溶液中滴加1-2滴冰醋酸,。2,、切片染蘇木精后,分色這一步是關(guān)鍵,,應(yīng)在顯微鏡下控制進(jìn)行,,一般以細(xì)胞核染色清楚(晰)而細(xì)胞質(zhì)基本無色為佳,。如果過分延長(zhǎng)分色時(shí)間將導(dǎo)致染色太淺,應(yīng)重新染色后再行分色,。3,、切片經(jīng)酒精脫水后,入二甲苯時(shí)可出現(xiàn)白色不透明狀態(tài),,此為脫水不徹底,,應(yīng)將切片退回?zé)o水酒精,更換酒精,、二甲苯,,以求徹底脫水與透明。4,、在染色過程中不要讓切片干燥,,以免切片收縮、變形,,影響神經(jīng)元形態(tài),。5、切片從二甲苯取出或進(jìn)入二甲苯前,,切片周邊均應(yīng)擦干凈或吸干多余水分,。6、***封固時(shí),,要用中性樹脂,,防止日后褪色,蓋片要選大于組織塊的面積,,如漏出一部分不久將會(huì)褪色,,所用樹脂濃度要適當(dāng),樹脂封固時(shí)不能有氣泡,。湖南比較好的HE染色
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