外泌體發(fā)現(xiàn)于1986年，是一種直徑約30~100nm的雙層膜囊泡狀結(jié)構(gòu)小體，可由機體內(nèi)多種細胞如免疫細胞,、干細胞,、心血管細胞,、網(wǎng)織紅細胞,、血小板,、神經(jīng)細胞和肉瘤細胞等主動分泌產(chǎn)生,，普遍分布于外周血,、尿液、唾液,、乳汁,、腹水、羊水等體液中,。外泌體攜帶大量特異性的蛋白質(zhì)（如細胞因子,、生長因子）以及功能性的mRNAs、miRNAs等生物活性物質(zhì),，在體內(nèi)參與細胞通訊,、細胞遷移、促血管新生和抗肉瘤免疫等生理過程,，與多種疾病的發(fā)生和進程密切相關,。由于外泌體的特殊結(jié)構(gòu)和功能，使得它具有潛在的應用價值,，一方面可以作為診斷多種疾病的生物指標,，另一方面也可以作為診療手段，未來有可能作為藥物的天然載體用于臨床診療,。外泌體的膜蛋白有可能與細胞膜蛋白作用,，活躍細胞內(nèi)通路。北京外泌體透射電鏡檢測

外泌體攜帶大量特異性的蛋白質(zhì)（如細胞因子,、生長因子）以及功能性的mRNAs,、miRNAs等生物活性物質(zhì)，在體內(nèi)參與細胞通訊,、細胞遷移,、促血管新生和抗瘤子免疫等生理過程，與多種疾病的發(fā)生和進程密切相關,。由于外泌體的特殊結(jié)構(gòu)和功能,，使得它具有潛在的應用價值,，一方面可以作為診斷多種疾病的生物指標，另一方面也可以作為診療手段,，未來有可能作為藥物的天然載體用于臨床診療,。外泌體研究，應選用血漿還是血清,？答：血清是血液凝固之后收集的液體,，所以其中少了纖維蛋白原，凝血因子,，以及多了比較多凝血產(chǎn)物,。纖維蛋白原可轉(zhuǎn)化為纖維蛋白，具有凝血功能,。在凝血過程中血小板會分泌大量的外泌體,，有研究發(fā)現(xiàn)血清中有接近50%的外泌體來自額外的分泌。免疫印跡或蛋白質(zhì)印跡是分析外泌體較常用的方法之一,，其原理是外泌體上特異性抗原與抗體結(jié)合,。細胞上清外泌體測序在免疫系統(tǒng)中，據(jù)報道趨化因子受體CCR5通過外泌體在細胞之間轉(zhuǎn)移是細胞人類免疫缺陷病毒傳染的一種機制,。

質(zhì)膜的連續(xù)內(nèi)陷較終導致多泡體的形成,，多泡體可與細胞內(nèi)的其他囊泡和細胞器交叉，從而增加了外泌體成分的多樣性,。根據(jù)細胞來源的不同,，細胞外囊泡，包括外泌體,，可以包含細胞的許多成分,，包括DNA、RNA,、脂質(zhì),、代謝物、胞質(zhì)和細胞表面蛋白,。目前產(chǎn)生外泌體的生理目的尚不清楚,，需要進一步研究。一個推測的作用是外泌體可能從細胞中去除多余和/或不必要的成分以維持細胞內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定,。較近的研究也表明外泌體中特定細胞成分的功能、靶向,、機制驅(qū)動的積累,，提示它們在調(diào)節(jié)細胞間通訊中發(fā)揮作用。

血漿中的外泌體蛋白既可以當作標志物,，也可以進行機理研究,？首先,，研究人員將慢性淋巴瘤（CLL）患者分為2個亞組：疾病進展期和疾病慢性期。然后利用質(zhì)譜技術分析了患者血漿外泌體蛋白組,，發(fā)現(xiàn)S100-A9蛋白在進展期CLL患者中明顯高表達,，可以作為CLL進展期診斷的輔助標志物。進一步,，研究人員通過生信分析發(fā)現(xiàn)進展期CLL患者外泌體中的高表達蛋白質(zhì)主要與炎癥和氧化應激有關,，而NF-κB通路正是承接此效應的關鍵通路。通過從進展期CLL患者中分離富含S100-A9蛋白的外泌體加入CLL患者的PBMC細胞中,，證實了S100-A9+外泌體能夠明顯促進進展期CLL患者PBMC細胞中IκBα蛋白的磷酸化上調(diào),，進一步活躍NF-κB通路。研究證通過血漿外泌體蛋白組分析不只找到輔助診斷進展期CLL的標志物,，并證實了S100-A9+外泌體可通過形成正向反饋調(diào)控,，不斷活躍進展期CLL患者自身PBMC細胞中的NF-κB通路，促進CLL進展的特殊機理,。外泌體作為一個新型的研究熱點,，由于它在體內(nèi)存在的普遍性和獲取的便捷性。

Exosome,，中文名外泌體,，是一種能被大多數(shù)細胞分泌的微小膜泡，具有脂質(zhì)雙層膜結(jié)構(gòu),，直徑大約40-100nm,。盡管外泌體較初在1983年就被發(fā)現(xiàn)，但人們一直認為它只是一種細胞的廢棄物,。然而較近幾年,，人們發(fā)現(xiàn)這種微小膜泡中含有細胞特異的蛋白、脂質(zhì)和核酸,，能作為信號分子傳遞給其他細胞從而改變其他細胞的功能,。這些發(fā)現(xiàn)點燃了人們對細胞分泌膜泡的興趣。2015年,，隨著精確醫(yī)學概念的提出,，越來越多的人開始關注如何能做到疾病的精確診斷和診療。外泌體作為一個新型的研究熱點,，由于它在體內(nèi)存在的普遍性和獲取的便捷性,，已經(jīng)成為了疾病診斷診療的潛在有效方式，在精確醫(yī)學發(fā)展上有著光明的前景,。對外泌體的分析和檢測可以輔助疾病的早期診斷,、療效評價和預后分析。浙江腦脊液外泌體

外泌體是其中一類小囊泡,，直徑為30~150nm,，密度1.10~1.18g/ml,。北京外泌體透射電鏡檢測

PEG沉淀法分離外泌體：通常通過將無水聚合物，如聚乙二醇（PEG）,，與樣品混合來沉淀外泌體,。PEG聚合物競爭性結(jié)合水分子，增加疏水性蛋白和脂質(zhì)分子的相互結(jié)合力從而沉淀外泌體,，然后通過離心分離外泌體,。這種分離的方法快速，簡便,，可用于各種起始體積（從100μL到幾毫升）適合于各種研究和臨床設定,。然而，這種方法缺乏選擇性,，PEG聚合物不只會導致外泌體小泡沉淀,，還會引起其他細胞外囊泡、細胞外蛋白質(zhì)和蛋白質(zhì)聚集體沉淀,。因此,，在使用這種方法之前，必須進行樣品預處理,，例如過濾或超速離心,，以減少較終的外泌體制劑的污染。北京外泌體透射電鏡檢測

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