外泌體發(fā)現(xiàn)于1986年,，是一種直徑約30~100nm的雙層膜囊泡狀結(jié)構(gòu)小體,，可由機(jī)體內(nèi)多種細(xì)胞如免疫細(xì)胞、干細(xì)胞,、心血管細(xì)胞,、網(wǎng)織紅細(xì)胞、血小板,、神經(jīng)細(xì)胞和肉瘤細(xì)胞等主動(dòng)分泌產(chǎn)生,，普遍分布于外周血、尿液,、唾液,、乳汁、腹水,、羊水等體液中,。外泌體攜帶大量特異性的蛋白質(zhì)（如細(xì)胞因子、生長(zhǎng)因子）以及功能性的mRNAs,、miRNAs等生物活性物質(zhì),，在體內(nèi)參與細(xì)胞通訊、細(xì)胞遷移,、促血管新生和抗肉瘤免疫等生理過(guò)程,，與多種疾病的發(fā)生和進(jìn)程密切相關(guān)。由于外泌體的特殊結(jié)構(gòu)和功能,，使得它具有潛在的應(yīng)用價(jià)值,，一方面可以作為診斷多種疾病的生物指標(biāo)，另一方面也可以作為診療手段,，未來(lái)有可能作為藥物的天然載體用于臨床診療,。外泌體的膜蛋白有可能與細(xì)胞膜蛋白作用，活躍細(xì)胞內(nèi)通路,。北京外泌體透射電鏡檢測(cè)

外泌體攜帶大量特異性的蛋白質(zhì)（如細(xì)胞因子,、生長(zhǎng)因子）以及功能性的mRNAs、miRNAs等生物活性物質(zhì),，在體內(nèi)參與細(xì)胞通訊,、細(xì)胞遷移、促血管新生和抗瘤子免疫等生理過(guò)程,，與多種疾病的發(fā)生和進(jìn)程密切相關(guān),。由于外泌體的特殊結(jié)構(gòu)和功能，使得它具有潛在的應(yīng)用價(jià)值,，一方面可以作為診斷多種疾病的生物指標(biāo),，另一方面也可以作為診療手段，未來(lái)有可能作為藥物的天然載體用于臨床診療,。外泌體研究,，應(yīng)選用血漿還是血清,？答：血清是血液凝固之后收集的液體，所以其中少了纖維蛋白原,，凝血因子,，以及多了比較多凝血產(chǎn)物。纖維蛋白原可轉(zhuǎn)化為纖維蛋白,，具有凝血功能。在凝血過(guò)程中血小板會(huì)分泌大量的外泌體,，有研究發(fā)現(xiàn)血清中有接近50%的外泌體來(lái)自額外的分泌,。免疫印跡或蛋白質(zhì)印跡是分析外泌體較常用的方法之一，其原理是外泌體上特異性抗原與抗體結(jié)合,。細(xì)胞上清外泌體測(cè)序在免疫系統(tǒng)中,，據(jù)報(bào)道趨化因子受體CCR5通過(guò)外泌體在細(xì)胞之間轉(zhuǎn)移是細(xì)胞人類(lèi)免疫缺陷病毒傳染的一種機(jī)制。

質(zhì)膜的連續(xù)內(nèi)陷較終導(dǎo)致多泡體的形成,，多泡體可與細(xì)胞內(nèi)的其他囊泡和細(xì)胞器交叉,，從而增加了外泌體成分的多樣性。根據(jù)細(xì)胞來(lái)源的不同,，細(xì)胞外囊泡,，包括外泌體，可以包含細(xì)胞的許多成分,，包括DNA,、RNA、脂質(zhì),、代謝物,、胞質(zhì)和細(xì)胞表面蛋白。目前產(chǎn)生外泌體的生理目的尚不清楚,，需要進(jìn)一步研究,。一個(gè)推測(cè)的作用是外泌體可能從細(xì)胞中去除多余和/或不必要的成分以維持細(xì)胞內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定。較近的研究也表明外泌體中特定細(xì)胞成分的功能,、靶向,、機(jī)制驅(qū)動(dòng)的積累，提示它們?cè)谡{(diào)節(jié)細(xì)胞間通訊中發(fā)揮作用,。

血漿中的外泌體蛋白既可以當(dāng)作標(biāo)志物,，也可以進(jìn)行機(jī)理研究？首先,，研究人員將慢性淋巴瘤（CLL）患者分為2個(gè)亞組：疾病進(jìn)展期和疾病慢性期,。然后利用質(zhì)譜技術(shù)分析了患者血漿外泌體蛋白組，發(fā)現(xiàn)S100-A9蛋白在進(jìn)展期CLL患者中明顯高表達(dá),，可以作為CLL進(jìn)展期診斷的輔助標(biāo)志物,。進(jìn)一步,，研究人員通過(guò)生信分析發(fā)現(xiàn)進(jìn)展期CLL患者外泌體中的高表達(dá)蛋白質(zhì)主要與炎癥和氧化應(yīng)激有關(guān)，而NF-κB通路正是承接此效應(yīng)的關(guān)鍵通路,。通過(guò)從進(jìn)展期CLL患者中分離富含S100-A9蛋白的外泌體加入CLL患者的PBMC細(xì)胞中,，證實(shí)了S100-A9+外泌體能夠明顯促進(jìn)進(jìn)展期CLL患者PBMC細(xì)胞中IκBα蛋白的磷酸化上調(diào)，進(jìn)一步活躍NF-κB通路,。研究證通過(guò)血漿外泌體蛋白組分析不只找到輔助診斷進(jìn)展期CLL的標(biāo)志物,，并證實(shí)了S100-A9+外泌體可通過(guò)形成正向反饋調(diào)控，不斷活躍進(jìn)展期CLL患者自身PBMC細(xì)胞中的NF-κB通路,，促進(jìn)CLL進(jìn)展的特殊機(jī)理,。外泌體作為一個(gè)新型的研究熱點(diǎn)，由于它在體內(nèi)存在的普遍性和獲取的便捷性,。

Exosome,，中文名外泌體，是一種能被大多數(shù)細(xì)胞分泌的微小膜泡,，具有脂質(zhì)雙層膜結(jié)構(gòu),，直徑大約40-100nm。盡管外泌體較初在1983年就被發(fā)現(xiàn),，但人們一直認(rèn)為它只是一種細(xì)胞的廢棄物,。然而較近幾年，人們發(fā)現(xiàn)這種微小膜泡中含有細(xì)胞特異的蛋白,、脂質(zhì)和核酸,，能作為信號(hào)分子傳遞給其他細(xì)胞從而改變其他細(xì)胞的功能。這些發(fā)現(xiàn)點(diǎn)燃了人們對(duì)細(xì)胞分泌膜泡的興趣,。2015年,，隨著精確醫(yī)學(xué)概念的提出，越來(lái)越多的人開(kāi)始關(guān)注如何能做到疾病的精確診斷和診療,。外泌體作為一個(gè)新型的研究熱點(diǎn),，由于它在體內(nèi)存在的普遍性和獲取的便捷性，已經(jīng)成為了疾病診斷診療的潛在有效方式,，在精確醫(yī)學(xué)發(fā)展上有著光明的前景,。對(duì)外泌體的分析和檢測(cè)可以輔助疾病的早期診斷、療效評(píng)價(jià)和預(yù)后分析,。浙江腦脊液外泌體

外泌體是其中一類(lèi)小囊泡,，直徑為30~150nm，密度1.10~1.18g/ml,。北京外泌體透射電鏡檢測(cè)

PEG沉淀法分離外泌體：通常通過(guò)將無(wú)水聚合物,，如聚乙二醇（PEG），與樣品混合來(lái)沉淀外泌體,。PEG聚合物競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合水分子,，增加疏水性蛋白和脂質(zhì)分子的相互結(jié)合力從而沉淀外泌體,，然后通過(guò)離心分離外泌體。這種分離的方法快速,，簡(jiǎn)便,，可用于各種起始體積（從100μL到幾毫升）適合于各種研究和臨床設(shè)定。然而,，這種方法缺乏選擇性,，PEG聚合物不只會(huì)導(dǎo)致外泌體小泡沉淀，還會(huì)引起其他細(xì)胞外囊泡,、細(xì)胞外蛋白質(zhì)和蛋白質(zhì)聚集體沉淀,。因此，在使用這種方法之前,，必須進(jìn)行樣品預(yù)處理，例如過(guò)濾或超速離心,，以減少較終的外泌體制劑的污染,。北京外泌體透射電鏡檢測(cè)

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