外泌體的來源與特征：外泌體是一種存在于細胞外的多囊泡體,，通過細胞內(nèi)吞泡膜向內(nèi)凹陷形成,，其大小均一,，直徑為40-100nm,，密度為1.10-1.18g/mL,。外泌體可由間充質(zhì)干細胞,、淋巴細胞和肉瘤細胞等多種類型細胞主動分泌釋放,。外泌體內(nèi)主要含有核酸,、蛋白質(zhì)和脂質(zhì)等，可作為疾病診斷標(biāo)記物,、調(diào)控靶細胞功能,、參與細胞生物學(xué)活動等。例如：含有miR-140-5p的滑膜間充質(zhì)干細胞來源外泌體(SMSC-Exo影響軟骨組織再生,；骨髓間充質(zhì)干細胞來源外泌體攜帶的miR-196a可調(diào)節(jié)成骨細胞分化促進大鼠顱骨缺損的骨再生,。疾病的進展和對診療的反應(yīng)可以通過外泌體的多組分分析來確定。植物外泌體蛋白質(zhì)組學(xué)

ELISA與WB的原理一樣,，在抗體包被的微孔板中加入待測樣品,、封閉、一抗孵育,，洗滌后加入酶標(biāo)待測物形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,，徹底洗滌后加顯色劑并用酶標(biāo)儀測定吸光值，結(jié)尾用標(biāo)準曲線計算外泌體表達量,。ELISA能實現(xiàn)對外泌體特異性蛋白的定量,。其他外泌體鑒定方法還有微流體測定法和外泌體蛋白質(zhì)組學(xué)分析等。由于外泌體在各種生命過程中的重要作用及其作為疾病生物標(biāo)志物和藥物輸送系統(tǒng)的潛力,，人們對此領(lǐng)域的興趣越來越高,。盡管目前在技術(shù)上取得了長足的進步，但尚未建立對外泌體進行準確和標(biāo)準化鑒定以及定量的方法,，關(guān)于外泌體的量應(yīng)由囊泡顆粒的數(shù)量,、囊泡蛋白的量或囊泡數(shù)與蛋白之比來定義仍存在比較多爭論。建立外泌體分離,、表征以及效價測定的標(biāo)準化方法將是外泌體作為診斷和診療用途之前需要解決的問題,。河南外泌體tmt外泌體可以作為“天然的納米粒子”來進行藥物遞送,。

外泌體生物學(xué)功能：1、在心血管系統(tǒng)中,，據(jù)報道,，源自人胚胎干細胞（ESC）的間充質(zhì)干細胞（MSC）外泌體可減少小鼠和豬模型中的心肌缺血和再灌注損傷；2,、在免疫系統(tǒng)中,，據(jù)報道趨化因子受體CCR5通過外泌體在細胞之間轉(zhuǎn)移是細胞人類免疫缺陷病毒傳染的一種機制；3,、在中樞的神經(jīng)系統(tǒng)（CNS）中,，外泌體的作用是消除廢物并介導(dǎo)大腦活動，從而阻止神經(jīng)退行性疾病的發(fā)病機理,；迄今為止,，尚未完全發(fā)現(xiàn)調(diào)節(jié)外泌體-細胞結(jié)合的途徑。然而,，比較明顯,，其結(jié)合過程從外泌體識別受體細胞PM上的特定受體開始。膜受體的識別是外泌體細胞反應(yīng)的基礎(chǔ),，它可能活躍受體并隨后導(dǎo)致相關(guān)信號通路的活躍,，外泌體與PM融合或外泌體的內(nèi)吞作用，從而導(dǎo)致蛋白質(zhì)和RNA直接釋放到受體細胞中,。從研究上來講并不太嚴格區(qū)分外泌體或微泡,。

DLS使用由于粒子的布朗運動而產(chǎn)生的波動散射光的強度來估計外泌體顆粒的大小分布及其zeta電位。DLS樣品制備方便,，只需要簡單的過濾,，測量速度較快，需要的樣品體積較少,。但由于動態(tài)光散射技術(shù)是基于光強測量,，散射光的強度與粒徑的六次方成正比，使得當(dāng)測量多種粒徑的混合懸浮液時,，通常會偏向于檢測較大粒徑產(chǎn)生的散射光,，比較難檢測到較小顆粒。所以DLS不適合對粒徑分布較寬的外泌體樣本的測量,，只適合尺寸較為均一的外泌體樣本,，并且無法測量樣品中外泌體的濃度。外泌體的提取的方式：密度梯度離心法,。

外泌體是細胞分泌到胞外的一種囊泡,，其大小為30-150nm，具有雙層膜結(jié)構(gòu)和茶托狀形態(tài),，含有豐富的內(nèi)含物（包括核酸,、蛋白和脂質(zhì)等）,，參與細胞間的分子傳遞。外泌體普遍存在于細胞培養(yǎng)上清以及各種體液中,，包括血液,、唾液、尿液,、乳汁等,，同時也存在于組織樣本中，如腦組織,、肌肉組織,、脂肪組織等。所有的細胞都能分泌外泌體,，但是不同細胞分泌的外泌體不管在數(shù)量上還是在內(nèi)含物中都具有比較大的差異性，這也決定了每種外泌體所行使的功能不一樣,。外泌體普遍參與細胞間物質(zhì)運輸與信息傳遞,，調(diào)控細胞生理活動。同時,，外泌體具有抗原提呈,、免疫逃逸、誘導(dǎo)正常細胞轉(zhuǎn)化,、促進瘤子發(fā)生和轉(zhuǎn)移等作用,；此外，外泌體還可以作為“天然的納米粒子”來進行藥物遞送,。外泌體普遍參與細胞間物質(zhì)運輸與信息傳遞,，調(diào)控細胞生理活動。細胞提取試劑盒廠家

近年來,，隨著外泌體研究的不斷深入,，它的應(yīng)用已經(jīng)涉及醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)和免疫領(lǐng)域、寄生蟲領(lǐng)域,。植物外泌體蛋白質(zhì)組學(xué)

被特定部位的細胞獲取的瘤子外泌體可為腫細胞的轉(zhuǎn)移準備轉(zhuǎn)移前微環(huán)境,。用肺轉(zhuǎn)傾向的腫細胞細胞來源的外泌體處理小鼠后可使骨轉(zhuǎn)傾向的腫細胞細胞重新定向。外泌體的蛋白質(zhì)組學(xué)分析發(fā)現(xiàn)不同部位傾向性的腫細胞細胞來源的外泌體具有不同的整合素（integrin）表達譜,，整合素α6β4和α6β1與肺轉(zhuǎn)有關(guān),，而整合素αvβ5與肝轉(zhuǎn)有關(guān)。敲低整合素α6β4和αvβ5可減少外泌體被靶部位細胞獲取,，進而分別降低了肺和肝的轉(zhuǎn)移,。進一步研究發(fā)現(xiàn)外泌體整合素被細胞獲取后活躍了Src的磷酸化和促炎的S100基因的表達。通過臨床數(shù)據(jù)分析顯示外泌體整合素可作為預(yù)測腫細胞轉(zhuǎn)移的部位傾向性的診斷指標(biāo),。外泌體的提取的方式：PS親和法,。植物外泌體蛋白質(zhì)組學(xué)

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