外泌體生物學(xué)功能：1、在心血管系統(tǒng)中，據(jù)報(bào)道,，源自人胚胎干細(xì)胞（ESC）的間充質(zhì)干細(xì)胞（MSC）外泌體可減少小鼠和豬模型中的心肌缺血和再灌注損傷,；2、在免疫系統(tǒng)中,，據(jù)報(bào)道趨化因子受體CCR5通過外泌體在細(xì)胞之間轉(zhuǎn)移是細(xì)胞人類免疫缺陷病毒傳染的一種機(jī)制,；3、在中樞的神經(jīng)系統(tǒng)中,，外泌體的作用是消除廢物并介導(dǎo)大腦活動,，從而阻止神經(jīng)退行性疾病的發(fā)病機(jī)理；迄今為止,，尚未完全發(fā)現(xiàn)調(diào)節(jié)外泌體-細(xì)胞結(jié)合的途徑,。然而，比較明顯,，其結(jié)合過程從外泌體識別受體細(xì)胞PM上的特定受體開始,。膜受體的識別是外泌體細(xì)胞反應(yīng)的基礎(chǔ)，它可能活躍受體并隨后導(dǎo)致相關(guān)信號通路的活躍,，外泌體與PM融合或外泌體的內(nèi)吞作用,，從而導(dǎo)致蛋白質(zhì)和RNA直接釋放到受體細(xì)胞中。超速離心法,，這是目前外泌體提取較常用的方法,。遼寧腦脊液外泌體

外泌體的納米球膜型結(jié)構(gòu)由雙層脂質(zhì)形成。它也由各種類型的脂質(zhì)和蛋白質(zhì)組成,，這些脂質(zhì)和蛋白質(zhì)衍生自形成外泌體的親代細(xì)胞,。根據(jù)外泌體數(shù)據(jù)庫ExoCarta的資料，目前已知約有8000種蛋白質(zhì)和194種脂質(zhì)與外泌體相關(guān),。外泌體通過生物體液被多種不同類型的細(xì)胞分泌,，包括滑膜液，母乳,，血液,，尿液，唾液,，羊水和血液中的血清,，這表明它們在細(xì)胞間通訊和觸發(fā)生理反應(yīng)中起著重要的作用。外泌體功能在研究初期階段發(fā)現(xiàn)是參與細(xì)胞成熟過程中去除不必要的蛋白質(zhì),。簡而言之,，它們是天然膜囊泡，將蛋白質(zhì),，RNA,，DNA和脂質(zhì)從一個細(xì)胞攜帶到另一個細(xì)胞,，調(diào)節(jié)受體細(xì)胞的生物功能。鼻腔灌洗液外泌體示蹤外泌體發(fā)揮功能方式：細(xì)胞-細(xì)胞之間的通訊,，譬如抗原遞呈,，這是發(fā)揮功能的主要方式。

外泌體的提取分離方法：1,、PEG-base沉淀法：聚乙二醇（PEG）可與疏水性蛋白和脂質(zhì)分子結(jié)合共沉淀,，早先應(yīng)用于從血清等樣本中收集病毒，現(xiàn)在也被用來沉淀外泌體,，其原理可能與競爭性結(jié)合游離水分子有關(guān),。利用PEG沉淀外泌體存在不少問題：比如純度和回收率低，雜蛋白較多（假陽性）,，顆粒大小不均一,，產(chǎn)生難以去除的聚合物，機(jī)械力或者吐溫-20等化學(xué)添加物將會破壞外泌體等,，因此發(fā)表文章時易受質(zhì)疑,。2、試劑盒提?。航鼛啄陙?，市場上已出現(xiàn)各種商業(yè)化的外泌體提取試劑盒，有的是通過特殊設(shè)計(jì)的過濾器過濾掉雜質(zhì)成分,，有的則采用空間排阻色譜法(SEC)進(jìn)行分離純化,，也有的則利用化合物沉淀將法外泌體沉淀出來。

外泌體的基本信息：1,、外泌體的大?。和饷隗w的直徑約40-150nm。2,、從研究上來講并不太嚴(yán)格區(qū)分外泌體或微泡,。3、外泌體屬于胞外囊泡類,，除了外泌體之外細(xì)胞還分泌微泡以及其它的膜囊泡,。4、外泌體的直接比微泡的要小,，后者直徑為100nm-1μm,。5、外泌體的數(shù)量：人體中大約有1014個,，近乎于平均每個細(xì)胞產(chǎn)生1000-10000個,。6、外泌體的細(xì)胞源：人體中幾乎所有類型的細(xì)胞均能產(chǎn)生外泌體。7,、外泌體具有異質(zhì)性,，即使是同一種細(xì)胞分泌的外泌體都有可能具有比較大功能區(qū)別。8,、外泌體的存在：外泌體幾乎存在于所有的組織,、細(xì)胞間隙、體液中,。9,、外泌體產(chǎn)生于細(xì)胞中的多泡體?；谕饷隗w的液體活檢在病癥和其他疾病的診斷和確定預(yù)后方面具有潛在的應(yīng)用價值。

近年來,，外泌體的捕獲技術(shù)越來越多,，微流體系也被用于外泌體提取，此方法能根據(jù)其物理和生化特性同時分離外泌體,。采用這種方法獲得的樣品純度高,，且可及時獲取外泌體用于疾病的相關(guān)檢測。在初次注射時外泌體粘附在微流控設(shè)備的內(nèi)表面,，并在隨后的PBS注射中沖洗掉,。此方法采用的設(shè)備復(fù)雜，所需的樣本量取決于流動通道的長度,。另外,，樣品量的注入速率比較低，因此,，對于大樣品量,，將需要較長的處理時間。外泌體在包括瘤子在內(nèi)的各種疾病的發(fā)病機(jī)理中具有重要的功能,。目前,，研究人員已開發(fā)了多種方法來分離外泌體，離心技術(shù)仍然是常用方法,，其他方法,，例如過濾、磁珠分離和色譜法等,，也顯示出獨(dú)特的優(yōu)勢,，但目前仍然沒有一種公認(rèn)有效的提取方法，研究人員應(yīng)針對不同來源的樣本以及不同的下游分析選取較適宜的提取方案,。超離法是較常用的外泌體純化手段,。湖北外泌體PKH26

外泌體作為小分子的藥物傳遞載體。遼寧腦脊液外泌體

常規(guī)生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中,，實(shí)時定量PCR技術(shù)（RT-PCR）普遍用于microRNA的檢測實(shí)踐中,，但外泌體樣品中的microRNA豐度極低,，普通RT-PCR技術(shù)的靈敏度已經(jīng)不能夠滿足。第三代微滴式數(shù)字PCR——ddPCR技術(shù),，成為外泌體microRNA檢測的選擇技術(shù),。微滴式數(shù)字PCR（DropletdigitalPCR），又成為“油包水PCR”,，在傳統(tǒng)的PCR擴(kuò)增前對樣品進(jìn)行微滴化處理,，即將含有核酸分子的反應(yīng)體系分成成千上萬個納升級的微滴，其中每個微滴或不含待檢核酸靶分子,，或者含有一個至數(shù)個待檢核酸靶分子,。經(jīng)PCR擴(kuò)增后，逐個對每個微滴進(jìn)行檢測,，有熒光信號的微滴判讀為1,，沒有熒光信號的微滴判讀為0，根據(jù)泊松分布原理及陽性微滴的個數(shù)與比例即可得出靶分子的起始拷貝數(shù)或濃度,。遼寧腦脊液外泌體

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