外泌體遞送藥物的優(yōu)勢(shì)：許多新的候選藥物（例如蛋白質(zhì)和核酸）在體內(nèi)環(huán)境中高度不穩(wěn)定，對(duì)診療結(jié)果的效果提出了重大挑戰(zhàn)。鑒于與許多當(dāng)前的納米微粒遞送系統(tǒng)相關(guān)的問(wèn)題,，外泌體作為“自然的遞送系統(tǒng)”允許遞送這些生物分子。由于外泌體體積小和其本身就是細(xì)胞產(chǎn)物,，通過(guò)外泌體遞送藥物可以避免巨噬細(xì)胞的吞噬作用或降解，還可以在體內(nèi)長(zhǎng)時(shí)間循環(huán),，保持效果,。其中，外泌體能夠穿過(guò)血腦屏障以將特定藥物輸送到中樞的神經(jīng)系統(tǒng)是外泌體遞送藥物的一個(gè)明顯優(yōu)勢(shì),。外泌體功能在研究初期階段發(fā)現(xiàn)是參與細(xì)胞成熟過(guò)程中去除不必要的蛋白質(zhì),。成都血液外泌體

外泌體的相關(guān)成分：1、外泌體的膜同細(xì)胞一樣,，是磷脂雙分子層,。2、外泌體膜含有MHC-1/2蛋白,，能綁定特異性的肽鏈,。3、外泌體膜中有跨膜蛋白PGRL,、LAMP1,、LAMP2。4,、外泌體膜中有膜轉(zhuǎn)運(yùn)融合蛋白annexins,、RAN,、GTPases,。5,、外泌體膜上有脂質(zhì)筏Chol、ceramide,、SM,、PC，限制膜流動(dòng),，參與包括跨膜信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo),、物質(zhì)內(nèi)吞、脂質(zhì)及蛋白定向分選的多種功能,。6,、外泌體中含有核酸，包括miRNA,、DNA,、lncRNA、mRNA,；同時(shí)還有一些蛋白,、脂類(lèi)也能被包裹到外泌體中。7,、與外泌體產(chǎn)生相關(guān)的重要分子：Ral,、ARF6、PLD2,、RAB家族,。8、一些物質(zhì)進(jìn)行外泌體中是特異性的：如hnRNPA2B1能結(jié)合lncRNA或miRNA特異性的序列（GGAG/CCCU）,，進(jìn)行主動(dòng)包埋,。外泌體的膜同細(xì)胞一樣，是磷脂雙分子層,。臍帶血外泌體免疫印跡或蛋白質(zhì)印跡是分析外泌體較常用的方法之一,，其原理是外泌體上特異性抗原與抗體結(jié)合。

外泌體的臨床應(yīng)用：間充質(zhì)干細(xì)胞是目前較普遍使用的細(xì)胞類(lèi)型,，它具有自我更新,，多向分化、分泌細(xì)胞因子和細(xì)胞外囊泡體,、免疫調(diào)節(jié),、來(lái)源普遍等特點(diǎn)，在臨床診療中取得了良好的成果,。間充質(zhì)干細(xì)胞來(lái)源外泌體與間充質(zhì)干細(xì)胞有著相似的功能,，包括修復(fù)與再生組織,、阻止炎癥反應(yīng)及調(diào)節(jié)機(jī)體免疫，但外泌體相對(duì)于間充質(zhì)干細(xì)胞又有許多優(yōu)勢(shì),。首先,，間充質(zhì)干細(xì)胞來(lái)源外泌體更穩(wěn)定，更好保存,，易于管理和控制,，可以人為改變其內(nèi)容物的種類(lèi)和數(shù)量。其次,，它們沒(méi)有活細(xì)胞,，不會(huì)像間充質(zhì)干細(xì)胞那樣可能會(huì)過(guò)多增殖而放大療效或者病變導(dǎo)致疾病加重；另外,，它有可能避免某些針對(duì)間充質(zhì)干細(xì)胞的調(diào)控問(wèn)題,，間充質(zhì)干細(xì)胞來(lái)源外泌體有代替間充質(zhì)干細(xì)胞的趨勢(shì)。干細(xì)胞外泌體攝取流式細(xì)胞技術(shù)是細(xì)胞和小顆粒定性和定量表征的有效方法,，其用于外泌體定量檢測(cè)的準(zhǔn)確性也在不斷上升,。

外泌體研究背景：胞外囊泡是從細(xì)胞膜上脫落或者由細(xì)胞分泌的具有雙層膜結(jié)構(gòu)的囊泡狀小體，主要由微囊泡,、凋亡小體,、外泌體組成。而外泌體是其中一類(lèi)小囊泡,，直徑為30~150nm,，密度1.10~1.18g/ml,，可攜帶核酸、蛋白質(zhì)質(zhì)和脂質(zhì)等,，存在于血液,、唾液、尿液等多種體液中,。越來(lái)越多的研究證實(shí),，外泌體可以通過(guò)細(xì)胞間轉(zhuǎn)移核酸,、蛋白質(zhì),、脂質(zhì)等特定物質(zhì)，發(fā)揮特殊的功能,。如在抗原提呈細(xì)胞中呈遞抗原程中,、腫細(xì)胞細(xì)胞發(fā)生了發(fā)展,、神經(jīng)細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)過(guò)程中都發(fā)揮著重要作用,。對(duì)外泌體的分析和檢測(cè)可以輔助疾病的早期診斷,、療效評(píng)價(jià)和預(yù)后分析,。外泌體較有用的特性之一是它們穿過(guò)屏障（如細(xì)胞質(zhì)膜和血/腦屏障）的能力。

外泌體的提取分離方法：1,、超濾離心：由于外泌體是一個(gè)大小約幾十納米的囊狀小體,，大于一般蛋白質(zhì)，利用不同截留相對(duì)分子質(zhì)量(MWCO)的超濾膜對(duì)樣品進(jìn)行選擇性分離,，便可獲得外泌體,。超濾離心法簡(jiǎn)單高效,，且不影響外泌體的生物活性,，是提取細(xì)胞外泌體的一種新方法,。2,、磁珠免疫法：外泌體表面有其特異性標(biāo)記物（如CD63、CD9蛋白）,，用包被抗標(biāo)記物抗體的磁珠與外泌體囊泡孵育后結(jié)合,，即可將外泌體吸附并分離出來(lái)。磁珠法具有特異性高,、操作簡(jiǎn)便,、不影響外泌體形態(tài)完整等優(yōu)點(diǎn)，但是效率低,，外泌體生物活性易受pH和鹽濃度影響,，不利于下游實(shí)驗(yàn)，難以普遍普及,。干細(xì)胞外泌體攝取流式細(xì)胞技術(shù)是細(xì)胞和小顆粒定性和定量表征的有效方法,。外泌體研究服務(wù)華美

外泌體的膜蛋白有可能與細(xì)胞膜蛋白作用，活躍細(xì)胞內(nèi)通路,。成都血液外泌體

肉瘤細(xì)胞可以通過(guò)產(chǎn)生異常的抗肉瘤或肉瘤免疫應(yīng)答并促進(jìn)瘤子細(xì)胞的活動(dòng)而大量產(chǎn)生外泌體，這些外泌體富含促病的細(xì)胞成分,，例如PD-L1,、mRNA和micro-RNA等免疫阻止蛋白，參與病癥的發(fā)展,、轉(zhuǎn)移和耐藥性,。值得注意的是,，肉瘤分泌的外泌體表面和外泌體顆粒中均存在的PD-L1,。ESCRT（運(yùn)輸所需的內(nèi)體分選復(fù)合體）參與將生物分子包裝到外泌體中，nSMase2（中性鞘磷脂酶2）和Rab蛋白調(diào)節(jié)外泌體分泌。已確定ESCRT,、Rab27a和nSMase2參與外泌體PD-L1的包裝和分泌,。外泌體可以將PD-L1轉(zhuǎn)運(yùn)至其他PD-L1表達(dá)低或沒(méi)有PD-L1的細(xì)胞,，并可能與PD-1結(jié)合,。成都血液外泌體

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