血漿中的外泌體蛋白既可以當(dāng)作標(biāo)志物，也可以進(jìn)行機(jī)理研究,？首先,，研究人員將慢性淋巴瘤（CLL）患者分為2個亞組：疾病進(jìn)展期和疾病慢性期。然后利用質(zhì)譜技術(shù)分析了患者血漿外泌體蛋白組,，發(fā)現(xiàn)S100-A9蛋白在進(jìn)展期CLL患者中明顯高表達(dá),，可以作為CLL進(jìn)展期診斷的輔助標(biāo)志物。進(jìn)一步,，研究人員通過生信分析發(fā)現(xiàn)進(jìn)展期CLL患者外泌體中的高表達(dá)蛋白質(zhì)主要與炎癥和氧化應(yīng)激有關(guān),，而NF-κB通路正是承接此效應(yīng)的關(guān)鍵通路。通過從進(jìn)展期CLL患者中分離富含S100-A9蛋白的外泌體加入CLL患者的PBMC細(xì)胞中,，證實了S100-A9+外泌體能夠明顯促進(jìn)進(jìn)展期CLL患者PBMC細(xì)胞中IκBα蛋白的磷酸化上調(diào),，進(jìn)一步活躍NF-κB通路。研究證通過血漿外泌體蛋白組分析不只找到輔助診斷進(jìn)展期CLL的標(biāo)志物,，并證實了S100-A9+外泌體可通過形成正向反饋調(diào)控,，不斷活躍進(jìn)展期CLL患者自身PBMC細(xì)胞中的NF-κB通路，促進(jìn)CLL進(jìn)展的特殊機(jī)理。外泌體的大?。和饷隗w的直徑約30-150nm,。吉林外泌體PKH67

密度梯度離心法根據(jù)在蔗糖、碘海醇或碘克沙醇等惰性溶液中的浮力密度將外泌體分成特定的層,，目前普遍應(yīng)用的是蔗糖,，這種方法可以成功地將亞細(xì)胞成分（例如過氧化物酶體，線粒體和核內(nèi)體）分離到密度梯度溶液中的不同層中,。樣品被放置在梯度的頂部,，當(dāng)施加離心力時，樣品中的顆粒以獨(dú)特的速率通過梯度,，該梯度以從上到下的密度增加,。樣品中的外泌體將在1.13-1.19g/ml的密度范圍富集，隨后可以通過分餾收集,，密度梯度超速離心對從蛋白質(zhì)聚集體和非膜顆粒中分離出外泌體非常有效,。此方法獲得的外泌體純度較高，但步驟繁瑣,、費(fèi)時且會造成外泌體損失,。免疫印跡或蛋白質(zhì)印跡是分析外泌體較常用的方法之一，其原理是外泌體上特異性抗原與抗體結(jié)合,。正青春外泌體外泌體是指包含了復(fù)雜 RNA 和蛋白質(zhì)的小膜泡 (30-150nm),。

流式細(xì)胞技術(shù)是細(xì)胞和小顆粒定性和定量表征的有效方法，其用于外泌體定量檢測的準(zhǔn)確性也在不斷上升,。將外泌體表面特異性標(biāo)志物CD63,、CD81等相應(yīng)抗體進(jìn)行標(biāo)記，可用流式細(xì)胞儀檢測到陽性表達(dá),，從而實現(xiàn)對外泌體的定量,。但流式細(xì)胞技術(shù)檢測時需要單顆粒懸浮液，當(dāng)外泌體濃度高或分離過程中發(fā)生外泌體囊泡聚集時將導(dǎo)致一次觀察到多個顆粒,，從而導(dǎo)致數(shù)據(jù)不準(zhǔn)確,。因此，為了通過流式細(xì)胞儀觀察,，需要將外泌體通過免疫捕獲或共價結(jié)合固定在磁珠表面上，從而便于將外泌體囊泡暴露于已知或者預(yù)期在外泌體表面表達(dá)的抗原的熒光偶聯(lián)抗體中,。在流式細(xì)胞術(shù)之前,，可在落射熒光顯微鏡（EPI）下觀察與磁珠和熒光抗體偶聯(lián)的外泌體囊泡。當(dāng)樣品通過流式細(xì)胞儀時采集熒光信號,，不只可以對外泌體進(jìn)行高通量分析,，還可以基于抗原表達(dá)對外泌體進(jìn)行定量或分類。

細(xì)胞外囊泡是蛋白質(zhì),、mRNA,、miRNA和脂質(zhì)運(yùn)輸來完成細(xì)胞間通訊通路的重要媒介,，根據(jù)它們的大小和發(fā)生分為三類，包括外泌體,、微泡和凋亡小體,。其中，外泌體是直徑大約為40-100nm的包裝囊泡,，由多種細(xì)胞分泌,，內(nèi)含有特定的蛋白質(zhì)、脂質(zhì),、細(xì)胞因子或遺傳物質(zhì),。來源于不同的組織的外泌體不只具有其特異性蛋白分子，而且還包含其行使功能的關(guān)鍵分子,。近年來,，隨著外泌體研究的不斷深入，它的應(yīng)用已經(jīng)涉及瘤子診療領(lǐng)域,、醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)和免疫領(lǐng)域,、寄生蟲領(lǐng)域；臨床研究上已涉及心血管系統(tǒng),、內(nèi)分泌代謝系統(tǒng)等,。外泌體較有用的特性之一是它們穿過屏障（如細(xì)胞質(zhì)膜和血/腦屏障）的能力。

質(zhì)膜的連續(xù)內(nèi)陷較終導(dǎo)致多泡體的形成,，多泡體可與細(xì)胞內(nèi)的其他囊泡和細(xì)胞器交叉,，從而增加了外泌體成分的多樣性。根據(jù)細(xì)胞來源的不同,，細(xì)胞外囊泡,，包括外泌體，可以包含細(xì)胞的許多成分,，包括DNA,、RNA、脂質(zhì),、代謝物,、胞質(zhì)和細(xì)胞表面蛋白。目前產(chǎn)生外泌體的生理目的尚不清楚,，需要進(jìn)一步研究,。一個推測的作用是外泌體可能從細(xì)胞中去除多余和/或不必要的成分以維持細(xì)胞內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定。近來的研究也表明外泌體中特定細(xì)胞成分的功能,、靶向,、機(jī)制驅(qū)動的積累，提示它們在調(diào)節(jié)細(xì)胞間通訊中發(fā)揮作用。外泌體發(fā)揮功能：將細(xì)胞或組織中多余的或者有害的分子排除,，這為研究生物標(biāo)志物提供了可能,。組織外泌體PKH26

外泌體的膜蛋白有可能與細(xì)胞膜蛋白作用，活躍細(xì)胞內(nèi)通路,。吉林外泌體PKH67

外泌體中常見的細(xì)胞質(zhì)蛋白是Rabs蛋白,，是鳥苷酸三磷酸酶家族的一種。它可以調(diào)節(jié)外泌體膜與受體細(xì)胞的融合,，有文獻(xiàn)報道稱RAB4,RAB5和RAB11主要出現(xiàn)在早期以及回收的核內(nèi)體中,，RAB7和RAB9主要出現(xiàn)在晚期的核內(nèi)體。現(xiàn)有大量的研究發(fā)現(xiàn)外泌體中含有40種RAB蛋白,。除了RAB蛋白,，外泌體中富含具有外泌體膜交換以及融合作用的膜聯(lián)蛋白（包括膜聯(lián)蛋白1、2,、4,、5、6,、7,、11等）。外泌體膜上富含參與外泌體運(yùn)輸?shù)乃目缒さ鞍准易澹–D63,CD81和CD9)）,、熱休克蛋白家族（(HSP60,HSP70,HSPA5,CCT2和HSP90以及一些細(xì)胞特異性的蛋白包括A33（結(jié)腸上皮細(xì)胞來源）,、MHC-Ⅱ(抗原提呈細(xì)胞來源)、CD86(抗原提呈細(xì)胞來源)以及乳凝集素（不成熟的樹突狀細(xì)胞）,。外泌體的提取的方式：超速離心法,。吉林外泌體PKH67

上海宇玫博生物科技有限公司匯集了大量的優(yōu)秀人才，集企業(yè)奇思,，創(chuàng)經(jīng)濟(jì)奇跡,，一群有夢想有朝氣的團(tuán)隊不斷在前進(jìn)的道路上開創(chuàng)新天地，繪畫新藍(lán)圖,，在上海市等地區(qū)的醫(yī)藥健康中始終保持良好的信譽(yù),，信奉著“爭取每一個客戶不容易，失去每一個用戶很簡單”的理念,，市場是企業(yè)的方向,，質(zhì)量是企業(yè)的生命，在公司有效方針的領(lǐng)導(dǎo)下,，全體上下,，團(tuán)結(jié)一致，共同進(jìn)退,，**協(xié)力把各方面工作做得更好，努力開創(chuàng)工作的新局面，公司的新高度,，未來上海宇玫博生物科技供應(yīng)和您一起奔向更美好的未來,，即使現(xiàn)在有一點小小的成績，也不足以驕傲,，過去的種種都已成為昨日我們只有總結(jié)經(jīng)驗,，才能繼續(xù)上路，讓我們一起點燃新的希望,，放飛新的夢想,！