NTA技術(shù)已被作為外泌體表征手段之一,，相較于其他表征方式NTA技術(shù)的樣本處理更簡(jiǎn)單,、更能保證外泌體原始狀態(tài),、檢測(cè)速度更快。大致方法是：將分離的外泌體樣本注入納米顆粒追蹤分析儀,，用激光光束穿過(guò)樣本，激光在腔室內(nèi)與顆粒相互作用時(shí)會(huì)發(fā)生散射,，通過(guò)裝有攝像頭的顯微鏡收集散射光,，捕捉外泌體的布朗運(yùn)動(dòng)，實(shí)現(xiàn)顆?？梢暬?。然后使用Stokes-Einstein方程來(lái)測(cè)量粒子的平均速度，繼而估算粒子的大小,。NTA能夠測(cè)量粒徑10-1000nm之間的顆粒,，包含了外泌體50-150nm的徑粒范圍,，但是NTA鑒定需要大于0.5毫升的樣品體積以及優(yōu)化的數(shù)據(jù)收集和分析參數(shù)，另外,，NTA比較難區(qū)分與外泌體具有相似布朗運(yùn)動(dòng)的蛋白質(zhì)聚集體,，因此無(wú)法排除其他物質(zhì)的干擾。度梯度離心法,，用此種方法分離到的外泌體純度高,。血清外泌體PKH67

透射電子顯微鏡（TEM）和掃描電子顯微鏡（SEM）是用于評(píng)估外泌體形態(tài)、大小和表型的的兩種常見(jiàn)的電子顯微鏡,。SEM和TEM均使用電子束產(chǎn)生高分辨率的亞微米顆粒放大圖像,，以區(qū)分外泌體與殘留在樣品中相似大小的非外泌體顆粒，該方法還可用于檢查樣品的純度,。TEM與SEM之間的區(qū)別在于檢測(cè)電子類別,，在SEM中，電子與樣品中的粒子相互作用時(shí)會(huì)發(fā)生散射,，捕獲并檢測(cè)散射的電子,，從而生成粒子圖像。但是,，在TEM中,，不與粒子相互作用的電子穿過(guò)樣品，并使用熒光屏進(jìn)行檢測(cè),。電子顯微鏡下外泌體大小不一,，通常呈茶托樣的圓形或橢圓形。采用電子顯微鏡檢測(cè)外泌體時(shí)對(duì)樣品的預(yù)處理和制備要求較高,，外泌體的提取方法和品質(zhì)會(huì)對(duì)電鏡結(jié)果造成影響,；另外樣品的準(zhǔn)備階段比較復(fù)雜，不適合進(jìn)行大量快速的測(cè)量,；而且由于樣本經(jīng)過(guò)了干燥,、固定以及冷凍等預(yù)處理和制備過(guò)程，對(duì)生物樣本的結(jié)構(gòu)會(huì)造成一定的破壞,，從而影響觀察的效果,，無(wú)法準(zhǔn)確測(cè)量外泌體濃度。安徽植物外泌體鑒定磁珠免疫法分離的外泌體,，生物活性易受pH和鹽濃度影響,，不利于下游實(shí)驗(yàn)，難以普遍普及,。體液外泌體Dir需要開(kāi)發(fā)大規(guī)模生產(chǎn)質(zhì)量可控的外泌體并快速純化外泌體的技術(shù)和策略,。

外泌體中常見(jiàn)的細(xì)胞質(zhì)蛋白是Rabs蛋白，是鳥苷酸三磷酸酶家族的一種,。它可以調(diào)節(jié)外泌體膜與受體細(xì)胞的融合,，有文獻(xiàn)報(bào)道稱RAB4,RAB5和RAB11主要出現(xiàn)在早期以及回收的核內(nèi)體中,，RAB7和RAB9主要出現(xiàn)在晚期的核內(nèi)體。現(xiàn)有大量的研究發(fā)現(xiàn)外泌體中含有40種RAB蛋白,。除了RAB蛋白,，外泌體中富含具有外泌體膜交換以及融合作用的膜聯(lián)蛋白（包括膜聯(lián)蛋白1、2,、4,、5、6,、7,、11等）。外泌體膜上富含參與外泌體運(yùn)輸?shù)乃目缒さ鞍准易澹–D63,CD81和CD9)）,、熱休克蛋白家族（(HSP60,HSP70,HSPA5,CCT2和HSP90以及一些細(xì)胞特異性的蛋白包括A33（結(jié)腸上皮細(xì)胞來(lái)源）,、MHC-Ⅱ(抗原提呈細(xì)胞來(lái)源)、CD86(抗原提呈細(xì)胞來(lái)源)以及乳凝集素,。

外泌體的相關(guān)成分：1,、外泌體的膜同細(xì)胞一樣，是磷脂雙分子層,。2,、外泌體膜含有MHC-1/2蛋白，能綁定特異性的肽鏈,。3,、外泌體膜中有跨膜蛋白PGRL、LAMP1,、LAMP2,。4、外泌體膜中有膜轉(zhuǎn)運(yùn)融合蛋白annexins,、RAN、GTPases,。5,、外泌體膜上有脂質(zhì)筏Chol、ceramide,、SM,、PC，限制膜流動(dòng),，參與包括跨膜信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo),、物質(zhì)內(nèi)吞、脂質(zhì)及蛋白定向分選的多種功能,。6,、外泌體中含有核酸,，包括miRNA、DNA,、lncRNA,、mRNA；同時(shí)還有一些蛋白,、脂類也能被包裹到外泌體中,。7、與外泌體產(chǎn)生相關(guān)的重要分子：Ral,、ARF6,、PLD2、RAB家族,。8,、一些物質(zhì)進(jìn)行外泌體中是特異性的：如hnRNPA2B1能結(jié)合lncRNA或miRNA特異性的序列（GGAG/CCCU），進(jìn)行主動(dòng)包埋,。超速離心是目前分離外泌體的主要技術(shù),。外泌體可由間充質(zhì)干細(xì)胞、淋巴細(xì)胞和腫細(xì)胞細(xì)胞等多種類型細(xì)胞主動(dòng)分泌釋放,。

密度梯度離心法根據(jù)在蔗糖,、碘海醇或碘克沙醇等惰性溶液中的浮力密度將外泌體分成特定的層，目前普遍應(yīng)用的是蔗糖,，這種方法可以成功地將亞細(xì)胞成分（例如過(guò)氧化物酶體,，線粒體和核內(nèi)體）分離到密度梯度溶液中的不同層中。樣品被放置在梯度的頂部,，當(dāng)施加離心力時(shí),，樣品中的顆粒以獨(dú)特的速率通過(guò)梯度，該梯度以從上到下的密度增加,。樣品中的外泌體將在1.13-1.19g/ml的密度范圍富集,，隨后可以通過(guò)分餾收集，密度梯度超速離心對(duì)從蛋白質(zhì)聚集體和非膜顆粒中分離出外泌體非常有效,。此方法獲得的外泌體純度較高,，但步驟繁瑣、費(fèi)時(shí)且會(huì)造成外泌體損失,。免疫印跡或蛋白質(zhì)印跡是分析外泌體較常用的方法之一,，其原理是外泌體上特異性抗原與抗體結(jié)合。外泌體發(fā)揮功能方式：細(xì)胞-細(xì)胞之間的通訊,，譬如抗原遞呈,，這是發(fā)揮功能的主要方式。研究所外泌體提取試劑盒步驟

尚未完全發(fā)現(xiàn)調(diào)節(jié)外泌體細(xì)胞結(jié)合的途徑,。血清外泌體PKH67

眾所周知外泌體是供體細(xì)胞分泌出來(lái)的胞外囊泡,，被受體細(xì)胞吸收后起到調(diào)控受體細(xì)胞功能,，這篇綜述文章主要討論了外泌體的生成、生化性質(zhì)以及作為藥物遞送載體的潛力,。外泌體在比較多生理病理上起著重要的作用,，如免疫中抗原呈遞、肉瘤的生長(zhǎng)與遷移,、組織損傷的修復(fù)等,。不同細(xì)胞分泌的外泌體具有不同的組成成分和功能，可作為疾病診斷的生物標(biāo)志物,。外泌體具有脂質(zhì)雙層膜結(jié)構(gòu),，能比較好的保護(hù)其包被的物質(zhì)，且能靶向特定細(xì)胞或組織,，因此是一種比較好靶向給藥系統(tǒng),。血清外泌體PKH67

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