外泌體是包含了復(fù)雜RNA和蛋白質(zhì)的小膜泡(30–150nm)，由所有體外和體內(nèi)細(xì)胞持續(xù)分泌,。由于人體內(nèi)復(fù)雜的功能,，包括細(xì)胞間通訊和信號轉(zhuǎn)導(dǎo)，外泌體正在改變研究,。這些細(xì)胞外囊泡正在生長,，這既是為了了解其生物學(xué)功能，也是為了將其用于實(shí)際應(yīng)用,，如無創(chuàng)診斷和高級調(diào)理開發(fā),。Dynabeads提供一系列外泌體分離產(chǎn)品和工具，用于表征和分析其RNA和蛋白質(zhì)含量,，以及體外和體內(nèi)追蹤,，以幫助您進(jìn)一步了解這些迷人的外泌體。超速離心方案可能冗長乏味且耗時的,。您可使用靈活且可擴(kuò)展的總外泌體分離試劑從細(xì)胞培養(yǎng)基或任何體液中即刻分離完整的外泌體,。這些試劑及其隨附的方案是多種試驗的理想選擇，包括處理少量樣本和處理多個樣本,。外泌體是具有生物活性的脂雙層囊泡,。河南外泌體circRNA測序

近年來，外泌體的捕獲技術(shù)越來越多,，微流體系也被用于外泌體提取,，此方法能根據(jù)其物理和生化特性同時分離外泌體。采用這種方法獲得的樣品純度高,，且可及時獲取外泌體用于疾病的相關(guān)檢測,。在初次注射時外泌體粘附在微流控設(shè)備的內(nèi)表面，并在隨后的PBS注射中沖洗掉,。此方法采用的設(shè)備復(fù)雜,，所需的樣本量取決于流動通道的長度。另外,，樣品量的注入速率比較低,，因此，對于大樣品量,，將需要較長的處理時間,。外泌體在包括瘤子在內(nèi)的各種疾病的發(fā)病機(jī)理中具有重要的功能。目前,，研究人員已開發(fā)了多種方法來分離外泌體,，離心技術(shù)仍然是常用方法,，其他方法，例如過濾,、磁珠分離和色譜法等,，也顯示出獨(dú)特的優(yōu)勢，但目前仍然沒有一種公認(rèn)有效的提取方法,，研究人員應(yīng)針對不同來源的樣本以及不同的下游分析選取較適宜的提取方案,。江西外泌體lncRNA測序選擇的分離方式是利用超速離心的方式分離外泌體，并且可以選用梯度密度離心法得到純度更高的外泌體,。

外泌體研究背景：胞外囊泡是從細(xì)胞膜上脫落或者由細(xì)胞分泌的具有雙層膜結(jié)構(gòu)的囊泡狀小體,，主要由微囊泡、凋亡小體,、外泌體組成,。而外泌體是其中一類小囊泡，直徑為30~150nm,，密度1.10~1.18g/ml,，可攜帶核酸、蛋白質(zhì)質(zhì)和脂質(zhì)等,，存在于血液,、唾液,、尿液等多種體液中,。越來越多的研究證實(shí)，外泌體可以通過細(xì)胞間轉(zhuǎn)移核酸,、蛋白質(zhì),、脂質(zhì)等特定物質(zhì)，發(fā)揮特殊的功能,。如在抗原提呈細(xì)胞中呈遞抗原程中,、肉瘤細(xì)胞發(fā)生了發(fā)展、神經(jīng)細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)過程中都發(fā)揮著重要作用,。對外泌體的分析和檢測可以輔助疾病的早期診斷,、療效評價和預(yù)后分析。

血漿中的外泌體蛋白既可以當(dāng)作標(biāo)志物,，也可以進(jìn)行機(jī)理研究,？首先，研究人員將慢性淋巴瘤（CLL）患者分為2個亞組：疾病進(jìn)展期和疾病慢性期,。然后利用質(zhì)譜技術(shù)分析了患者血漿外泌體蛋白組,，發(fā)現(xiàn)S100-A9蛋白在進(jìn)展期CLL患者中明顯高表達(dá)，可以作為CLL進(jìn)展期診斷的輔助標(biāo)志物,。進(jìn)一步,，研究人員通過生信分析發(fā)現(xiàn)進(jìn)展期CLL患者外泌體中的高表達(dá)蛋白質(zhì)主要與炎癥和氧化應(yīng)激有關(guān)，而NF-κB通路正是承接此效應(yīng)的關(guān)鍵通路。通過從進(jìn)展期CLL患者中分離富含S100-A9蛋白的外泌體加入CLL患者的PBMC細(xì)胞中,，證實(shí)了S100-A9+外泌體能夠明顯促進(jìn)進(jìn)展期CLL患者PBMC細(xì)胞中IκBα蛋白的磷酸化上調(diào),，進(jìn)一步活躍NF-κB通路。該研究證通過血漿外泌體蛋白組分析不只找到輔助診斷進(jìn)展期CLL的標(biāo)志物,，并證實(shí)了S100-A9+外泌體可通過形成正向反饋調(diào)控,，不斷活躍進(jìn)展期CLL患者自身PBMC細(xì)胞中的NF-κB通路，促進(jìn)CLL進(jìn)展的特殊機(jī)理,。度梯度離心法,，用此種方法分離到的外泌體純度高。

外泌體的相關(guān)成分：1,、外泌體的膜同細(xì)胞一樣,，是磷脂雙分子層。2,、外泌體膜含有MHC-1/2蛋白,，能綁定特異性的肽鏈。3,、外泌體膜中有跨膜蛋白PGRL,、LAMP1、LAMP2,。4,、外泌體膜中有膜轉(zhuǎn)運(yùn)融合蛋白annexins、RAN,、GTPases,。5、外泌體膜上有脂質(zhì)筏Chol,、ceramide,、SM、PC,，限制膜流動,，參與包括跨膜信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、物質(zhì)內(nèi)吞,、脂質(zhì)及蛋白定向分選的多種功能,。6、外泌體中含有核酸,，包括miRNA,、DNA、lncRNA,、mRNA,；同時還有一些蛋白,、脂類也能被包裹到外泌體中。7,、與外泌體產(chǎn)生相關(guān)的重要分子：Ral,、ARF6、PLD2,、RAB家族,。8、一些物質(zhì)進(jìn)行外泌體中是特異性的：如hnRNPA2B1能結(jié)合lncRNA或miRNA特異性的序列（GGAG/CCCU）,，進(jìn)行主動包埋,。外泌體的膜同細(xì)胞一樣，是磷脂雙分子層,。超速離心是目前分離外泌體的主要技術(shù),。血液中外泌體提取

外泌體的膜蛋白有可能與細(xì)胞膜蛋白作用，活躍細(xì)胞內(nèi)通路,。河南外泌體circRNA測序

外泌體的納米球膜型結(jié)構(gòu)由雙層脂質(zhì)形成,。它也由各種類型的脂質(zhì)和蛋白質(zhì)組成，這些脂質(zhì)和蛋白質(zhì)衍生自形成外泌體的親代細(xì)胞,。根據(jù)外泌體數(shù)據(jù)庫ExoCarta的資料,，目前已知約有8000種蛋白質(zhì)和194種脂質(zhì)與外泌體相關(guān)。外泌體通過生物體液被多種不同類型的細(xì)胞分泌,，包括滑膜液,，母乳，血液,，尿液,，唾液，羊水和血液中的血清,，這表明它們在細(xì)胞間通訊和觸發(fā)生理反應(yīng)中起著重要的作用。外泌體功能在研究初期階段發(fā)現(xiàn)是參與細(xì)胞成熟過程中去除不必要的蛋白質(zhì),。簡而言之,，它們是天然膜囊泡，將蛋白質(zhì),，RNA,，DNA和脂質(zhì)從一個細(xì)胞攜帶到另一個細(xì)胞，調(diào)節(jié)受體細(xì)胞的生物功能,。河南外泌體circRNA測序

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