外泌體的脂質和蛋白質組成可以影響它們的藥代動力學特性,，它們的天然成分可能在提高生物利用度和減少不良反應方面發(fā)揮作用,。除了它們的診療潛力，外泌體也有幫助疾病診斷的潛力,。它們已經在所有的生物液體中被報道,，并且通過生物液體取樣(液體活組織檢查)可以比較容易地獲得外泌體的復雜貨物的組成,。基于外泌體的液體活檢在病癥和其他疾病的診斷和確定預后方面具有潛在的應用價值,。疾病的進展和對診療的反應也可以通過外泌體的多組分分析來確定的,。外泌體鑒定方法從物理特征到表面分子標志物，多角度進行鑒定,。腹膜透析液外泌體circRNA測序

外泌體的提取主要包括以下幾種方式：1,、免疫磁珠法，這種方法可以保證外泌體形態(tài)的完整,，特異性高,、操作簡單、不需要昂貴的儀器設備,，但是非中性pH和非生理性鹽濃度會影響外泌體生物活性,，不便進行下一步的實驗。2,、PS親和法,，該方法將PS（磷脂酰絲氨酸）與磁珠結合，利用親和原理捕獲外泌體囊泡外的PS,。該方法與免疫磁珠法相似,，獲得的外泌體形態(tài)完整，純度較高,。由于不使用變性劑,，不影響外泌體的生物活性，外泌體可用于細胞共培養(yǎng)和體內注射,。3,、色譜法，這種方法分離到的外泌體在電鏡下大小均一，但是需要特殊的設備,，應用不普遍,。外泌體作為核酸的藥物遞送載體。海洋生物外泌體融合實驗外泌體是一種存在于細胞外的多囊泡體,，通過細胞內吞泡膜向內凹陷形成,。

密度梯度離心法根據在蔗糖、碘海醇或碘克沙醇等惰性溶液中的浮力密度將外泌體分成特定的層,，目前普遍應用的是蔗糖,，這種方法可以成功地將亞細胞成分（例如過氧化物酶體，線粒體和核內體）分離到密度梯度溶液中的不同層中,。樣品被放置在梯度的頂部,，當施加離心力時，樣品中的顆粒以獨特的速率通過梯度,，該梯度以從上到下的密度增加,。樣品中的外泌體將在1.13-1.19g/ml的密度范圍富集，隨后可以通過分餾收集,，密度梯度超速離心對從蛋白質聚集體和非膜顆粒中分離出外泌體非常有效,。此方法獲得的外泌體純度較高，但步驟繁瑣,、費時且會造成外泌體損失,。免疫印跡或蛋白質印跡是分析外泌體較常用的方法之一，其原理是外泌體上特異性抗原與抗體結合,。

外泌體的納米球膜型結構由雙層脂質形成,。它也由各種類型的脂質和蛋白質組成，這些脂質和蛋白質衍生自形成外泌體的親代細胞,。根據外泌體數據庫ExoCarta的資料,，目前已知約有8000種蛋白質和194種脂質與外泌體相關。外泌體通過生物體液被多種不同類型的細胞分泌,，包括滑膜液,，母乳，血液,，尿液,，唾液，羊水和血液中的血清,，這表明它們在細胞間通訊和觸發(fā)生理反應中起著重要的作用,。外泌體功能在研究初期階段發(fā)現是參與細胞成熟過程中去除不必要的蛋白質。簡而言之,，它們是天然膜囊泡,，將蛋白質,，RNA，DNA和脂質從一個細胞攜帶到另一個細胞,，調節(jié)受體細胞的生物功能,。外泌體的提取的方式：密度梯度離心法。

外泌體提取在短時間（一周之內）使用,，可以放在4度保存,，如果長時間保存可以放在-20度或-80度保存。也可以將外泌體進行分裝,，分別放在-20度或-80度,。外泌體檢測方法：外泌體分離之后，需要經過一系列鑒定才能確定分離的是外泌體,。鑒定方法從物理特征到表面分子標志物,，多角度進行鑒定。l,、透射電鏡鑒定法：簡稱TEM,，適合外泌體雙層囊膜超微結構觀察，即通常為茶托型或一側凹陷的半球形,。2、納米顆粒追蹤分析法：簡稱NTA,，該方法能保證外泌體原始狀態(tài),、檢測速度快，檢測后能提供外泌體粒徑和濃度信息,。外泌體可由間充質干細胞,、淋巴細胞和瘤子細胞等多種類型細胞主動分泌釋放。血細胞提取試劑盒廠家

外泌體膜中有跨膜蛋白PGRL,、LAMP1,、LAMP2。腹膜透析液外泌體circRNA測序

外泌體的生物發(fā)生和鑒定,。液體和細胞外成分,，如蛋白質、脂類,、代謝物,、小分子和離子，可以通過內吞作用和質膜內陷,，與細胞表面蛋白一起進入細胞,。由此產生的胞腔側質膜芽的形成表現為質膜的外-內取向。這一出芽過程導致芽的形成可能與內質網,、跨高爾基網絡(TGN)和線粒體預先形成的早期核內體融合,。ESEs也可以與ER和TGN融合,，這可能解釋了內吞物如何到達它們的。因此,，一些ESEs可以包含膜和腔的成分,，可以表示不同的起源。外泌體表面蛋白包括四聚體蛋白,、整合蛋白,、免疫調節(jié)蛋白等。外泌體可以包含不同類型的細胞表面蛋白,、細胞內蛋白,、RNA、DNA,、氨基酸和代謝物,。腹膜透析液外泌體circRNA測序

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