外泌體的脂質(zhì)和蛋白質(zhì)組成可以影響它們的藥代動(dòng)力學(xué)特性,，它們的天然成分可能在提高生物利用度和減少不良反應(yīng)方面發(fā)揮作用,。除了它們的診療潛力，外泌體也有幫助疾病診斷的潛力,。它們已經(jīng)在所有的生物液體中被報(bào)道,，并且通過生物液體取樣(液體活組織檢查)可以比較容易地獲得外泌體的復(fù)雜貨物的組成?；谕饷隗w的液體活檢在病癥和其他疾病的診斷和確定預(yù)后方面具有潛在的應(yīng)用價(jià)值,。疾病的進(jìn)展和對(duì)診療的反應(yīng)也可以通過外泌體的多組分分析來確定的。外泌體鑒定方法從物理特征到表面分子標(biāo)志物,，多角度進(jìn)行鑒定,。腹膜透析液外泌體circRNA測(cè)序

外泌體的提取主要包括以下幾種方式：1、免疫磁珠法,，這種方法可以保證外泌體形態(tài)的完整,，特異性高、操作簡(jiǎn)單,、不需要昂貴的儀器設(shè)備,，但是非中性pH和非生理性鹽濃度會(huì)影響外泌體生物活性,，不便進(jìn)行下一步的實(shí)驗(yàn)。2,、PS親和法,，該方法將PS（磷脂酰絲氨酸）與磁珠結(jié)合，利用親和原理捕獲外泌體囊泡外的PS,。該方法與免疫磁珠法相似,，獲得的外泌體形態(tài)完整，純度較高,。由于不使用變性劑,，不影響外泌體的生物活性，外泌體可用于細(xì)胞共培養(yǎng)和體內(nèi)注射,。3,、色譜法，這種方法分離到的外泌體在電鏡下大小均一,，但是需要特殊的設(shè)備,，應(yīng)用不普遍。外泌體作為核酸的藥物遞送載體,。海洋生物外泌體融合實(shí)驗(yàn)外泌體是一種存在于細(xì)胞外的多囊泡體,，通過細(xì)胞內(nèi)吞泡膜向內(nèi)凹陷形成。

密度梯度離心法根據(jù)在蔗糖,、碘海醇或碘克沙醇等惰性溶液中的浮力密度將外泌體分成特定的層,，目前普遍應(yīng)用的是蔗糖，這種方法可以成功地將亞細(xì)胞成分（例如過氧化物酶體,，線粒體和核內(nèi)體）分離到密度梯度溶液中的不同層中,。樣品被放置在梯度的頂部，當(dāng)施加離心力時(shí),，樣品中的顆粒以獨(dú)特的速率通過梯度,，該梯度以從上到下的密度增加,。樣品中的外泌體將在1.13-1.19g/ml的密度范圍富集,，隨后可以通過分餾收集，密度梯度超速離心對(duì)從蛋白質(zhì)聚集體和非膜顆粒中分離出外泌體非常有效,。此方法獲得的外泌體純度較高,，但步驟繁瑣、費(fèi)時(shí)且會(huì)造成外泌體損失,。免疫印跡或蛋白質(zhì)印跡是分析外泌體較常用的方法之一,，其原理是外泌體上特異性抗原與抗體結(jié)合。

外泌體的納米球膜型結(jié)構(gòu)由雙層脂質(zhì)形成,。它也由各種類型的脂質(zhì)和蛋白質(zhì)組成,，這些脂質(zhì)和蛋白質(zhì)衍生自形成外泌體的親代細(xì)胞,。根據(jù)外泌體數(shù)據(jù)庫ExoCarta的資料，目前已知約有8000種蛋白質(zhì)和194種脂質(zhì)與外泌體相關(guān),。外泌體通過生物體液被多種不同類型的細(xì)胞分泌,，包括滑膜液，母乳,，血液,，尿液，唾液,，羊水和血液中的血清,，這表明它們?cè)诩?xì)胞間通訊和觸發(fā)生理反應(yīng)中起著重要的作用。外泌體功能在研究初期階段發(fā)現(xiàn)是參與細(xì)胞成熟過程中去除不必要的蛋白質(zhì),。簡(jiǎn)而言之,，它們是天然膜囊泡，將蛋白質(zhì),，RNA,，DNA和脂質(zhì)從一個(gè)細(xì)胞攜帶到另一個(gè)細(xì)胞，調(diào)節(jié)受體細(xì)胞的生物功能,。外泌體的提取的方式：密度梯度離心法,。

外泌體提取在短時(shí)間（一周之內(nèi)）使用，可以放在4度保存,，如果長(zhǎng)時(shí)間保存可以放在-20度或-80度保存,。也可以將外泌體進(jìn)行分裝，分別放在-20度或-80度,。外泌體檢測(cè)方法：外泌體分離之后,，需要經(jīng)過一系列鑒定才能確定分離的是外泌體。鑒定方法從物理特征到表面分子標(biāo)志物,，多角度進(jìn)行鑒定,。l、透射電鏡鑒定法：簡(jiǎn)稱TEM,，適合外泌體雙層囊膜超微結(jié)構(gòu)觀察,，即通常為茶托型或一側(cè)凹陷的半球形。2,、納米顆粒追蹤分析法：簡(jiǎn)稱NTA,，該方法能保證外泌體原始狀態(tài)、檢測(cè)速度快,，檢測(cè)后能提供外泌體粒徑和濃度信息,。外泌體可由間充質(zhì)干細(xì)胞、淋巴細(xì)胞和瘤子細(xì)胞等多種類型細(xì)胞主動(dòng)分泌釋放,。血細(xì)胞提取試劑盒廠家

外泌體膜中有跨膜蛋白PGRL,、LAMP1,、LAMP2。腹膜透析液外泌體circRNA測(cè)序

外泌體的生物發(fā)生和鑒定,。液體和細(xì)胞外成分,，如蛋白質(zhì)、脂類,、代謝物,、小分子和離子，可以通過內(nèi)吞作用和質(zhì)膜內(nèi)陷,，與細(xì)胞表面蛋白一起進(jìn)入細(xì)胞,。由此產(chǎn)生的胞腔側(cè)質(zhì)膜芽的形成表現(xiàn)為質(zhì)膜的外-內(nèi)取向。這一出芽過程導(dǎo)致芽的形成可能與內(nèi)質(zhì)網(wǎng),、跨高爾基網(wǎng)絡(luò)(TGN)和線粒體預(yù)先形成的早期核內(nèi)體融合,。ESEs也可以與ER和TGN融合，這可能解釋了內(nèi)吞物如何到達(dá)它們的,。因此,，一些ESEs可以包含膜和腔的成分，可以表示不同的起源,。外泌體表面蛋白包括四聚體蛋白,、整合蛋白、免疫調(diào)節(jié)蛋白等,。外泌體可以包含不同類型的細(xì)胞表面蛋白,、細(xì)胞內(nèi)蛋白、RNA,、DNA,、氨基酸和代謝物。腹膜透析液外泌體circRNA測(cè)序

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