當(dāng)外泌體在1980年初次被發(fā)現(xiàn)后,，其被認(rèn)為是細(xì)胞排泄廢物的一種方式，如今隨著大量對其生物來源,、其物質(zhì)構(gòu)成及運輸,、細(xì)胞間信號的傳導(dǎo)以及在體液中的分布的研究發(fā)現(xiàn)外泌體具有多種多樣的功能。外泌體的功能取決于其所來源的細(xì)胞類型,，其可參與到機體免疫應(yīng)答,、抗原提呈、細(xì)胞遷移,、細(xì)胞分化,、肉瘤侵襲等方方面面。有研究表明肉瘤來源的外泌體參與到肉瘤細(xì)胞與基底細(xì)胞的遺傳信息的交換,，從而導(dǎo)致大量新生血管的生成,，促進了肉瘤的生長與侵襲。外泌體天然存在于體液中,，包括血液、唾液,、尿液,、腦脊液和乳汁中。外泌體用的

外泌體的相關(guān)成分：1、外泌體的膜同細(xì)胞一樣,，是磷脂雙分子層,。2、外泌體膜含有MHC-1/2蛋白,，能綁定特異性的肽鏈,。3、外泌體膜中有跨膜蛋白PGRL,、LAMP1,、LAMP2。4,、外泌體膜中有膜轉(zhuǎn)運融合蛋白annexins,、RAN、GTPases,。5,、外泌體膜上有脂質(zhì)筏Chol、ceramide,、SM,、PC，限制膜流動,，參與包括跨膜信號轉(zhuǎn)導(dǎo),、物質(zhì)內(nèi)吞、脂質(zhì)及蛋白定向分選的多種功能,。6,、外泌體中含有核酸，包括miRNA,、DNA,、lncRNA、mRNA,；同時還有一些蛋白,、脂類也能被包裹到外泌體中。7,、與外泌體產(chǎn)生相關(guān)的重要分子：Ral,、ARF6、PLD2,、RAB家族,。8、一些物質(zhì)進行外泌體中是特異性的：如hnRNPA2B1能結(jié)合lncRNA或miRNA特異性的序列（GGAG/CCCU）,，進行主動包埋,。細(xì)菌提取試劑盒廠家外泌體作為一個新型的研究熱點,，由于它在體內(nèi)存在的普遍性和獲取的便捷性。

細(xì)胞攝取診療性外泌體：從樹突狀細(xì)胞,、成纖維細(xì)胞和間充質(zhì)細(xì)胞中分離出的診療性外泌體可對靶細(xì)胞產(chǎn)生特定的作用,，包括新抗原呈遞、免疫調(diào)節(jié)和藥物有效載荷傳遞,。診療性外泌體對靶細(xì)胞的影響可能是通過不同的進入或相互作用機制來控制的,。完整的外泌體的進入可能包括受體介導(dǎo)的內(nèi)吞作用、網(wǎng)格蛋白包被小凹,、脂筏,、吞噬作用、小凹和大胞飲作用,。外泌體內(nèi)容物的進入或外泌體信號的誘導(dǎo)可能涉及配體受體誘導(dǎo)的細(xì)胞內(nèi)信號或融合,，從而將外泌體內(nèi)容物沉積到細(xì)胞質(zhì)中。

外泌體發(fā)現(xiàn)于1986年,，是一種直徑約30~100nm的雙層膜囊泡狀結(jié)構(gòu)小體,，可由機體內(nèi)多種細(xì)胞如免疫細(xì)胞、干細(xì)胞,、心血管細(xì)胞,、網(wǎng)織紅細(xì)胞、血小板,、神經(jīng)細(xì)胞和肉瘤細(xì)胞等主動分泌產(chǎn)生,，普遍分布于外周血、尿液,、唾液,、乳汁、腹水,、羊水等體液中,。外泌體攜帶大量特異性的蛋白質(zhì)（如細(xì)胞因子、生長因子）以及功能性的mRNAs,、miRNAs等生物活性物質(zhì),，在體內(nèi)參與細(xì)胞通訊、細(xì)胞遷移,、促血管新生和抗肉瘤免疫等生理過程,，與多種疾病的發(fā)生和進程密切相關(guān)。由于外泌體的特殊結(jié)構(gòu)和功能,，使得它具有潛在的應(yīng)用價值,，一方面可以作為診斷多種疾病的生物指標(biāo)，另一方面也可以作為診療手段,，未來有可能作為藥物的天然載體用于臨床診療,。外泌體的提取的方式：PS親和法,。

NTA技術(shù)已被作為外泌體表征手段之一，相較于其他表征方式NTA技術(shù)的樣本處理更簡單,、更能保證外泌體原始狀態(tài)、檢測速度更快,。大致方法是：將分離的外泌體樣本注入納米顆粒追蹤分析儀,，用激光光束穿過樣本，激光在腔室內(nèi)與顆粒相互作用時會發(fā)生散射,，通過裝有攝像頭的顯微鏡收集散射光,，捕捉外泌體的布朗運動，實現(xiàn)顆?？梢暬?。然后使用Stokes-Einstein方程來測量粒子的平均速度，繼而估算粒子的大小,。NTA能夠測量粒徑10-1000nm之間的顆粒,，包含了外泌體50-150nm的徑粒范圍，但是NTA鑒定需要大于0.5毫升的樣品體積以及優(yōu)化的數(shù)據(jù)收集和分析參數(shù),，另外,，NTA比較難區(qū)分與外泌體具有相似布朗運動的蛋白質(zhì)聚集體，因此無法排除其他物質(zhì)干擾,。干細(xì)胞外泌體攝取流式細(xì)胞技術(shù)是細(xì)胞和小顆粒定性和定量表征的有效方法,。福建外泌體蛋白質(zhì)組學(xué)

通過臨床數(shù)據(jù)分析顯示外泌體整合素可作為預(yù)測腫細(xì)胞轉(zhuǎn)移的部位傾向性的診斷指標(biāo)。外泌體用的

超速離心是外泌體提取較常用的方法也被認(rèn)為是金標(biāo)準(zhǔn),，主要是根據(jù)外泌體的沉降系數(shù),、大小和形狀將其分離出來。首先4℃低速離心（300-500g,，10min）去除死細(xì)胞以及細(xì)胞碎片,，隨后以較高離心速度(2000xg，10min)去除生物聚合物以及凋亡小體,，然后用10000xg,30min離心去除大型囊泡,，結(jié)尾以超速離心沉淀外泌體。通過懸浮以及重復(fù)超速離心去除外泌體沉淀中的非外泌體蛋白,。超速離心法具有操作簡單,、不易被分離試劑污染、獲得的外泌體數(shù)量較多等優(yōu)點,。但是此方法需要昂貴的超高速離心機,，每次處理的樣本量較小，費時,，電鏡鑒定時還發(fā)現(xiàn)外泌體易聚集成塊,，且上清中仍能檢測到大型囊泡,，純度不高，另外高速離心會損傷外泌體影響下游實驗,。外泌體通過內(nèi)體途徑分泌到細(xì)胞外空間,，并將各種生物活性分子（貨物）轉(zhuǎn)運至靶細(xì)胞。外泌體用的

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