外泌體的提取主要包括以下幾種方式：1、免疫磁珠法,，這種方法可以保證外泌體形態(tài)的完整,，特異性高,、操作簡單、不需要昂貴的儀器設備,，但是非中性pH和非生理性鹽濃度會影響外泌體生物活性,，不便進行下一步的實驗,。2,、PS親和法，該方法將PS（磷脂酰絲氨酸）與磁珠結合,，利用親和原理捕獲外泌體囊泡外的PS,。該方法與免疫磁珠法相似，獲得的外泌體形態(tài)完整,，純度較高,。由于不使用變性劑，不影響外泌體的生物活性,，外泌體可用于細胞共培養(yǎng)和體內注射,。3、色譜法，這種方法分離到的外泌體在電鏡下大小均一,，但是需要特殊的設備,，應用不普遍。外泌體作為核酸的藥物遞送載體,。外泌體普遍存在于細胞培養(yǎng)上清以及各種體液中,，包括血液、唾液,、尿液,、乳汁等。組織外泌體提取試劑盒步驟

超速離心是外泌體提取較常用的方法也被認為是金標準,，主要是根據(jù)外泌體的沉降系數(shù),、大小和形狀將其分離出來。首先4℃低速離心（300-500g,，10min）去除死細胞以及細胞碎片,，隨后以較高離心速度(2000xg，10min)去除生物聚合物以及凋亡小體,，然后用10000xg,30min離心去除大型囊泡,，結尾以超速離心沉淀外泌體。通過懸浮以及重復超速離心去除外泌體沉淀中的非外泌體蛋白,。超速離心法具有操作簡單,、不易被分離試劑污染、獲得的外泌體數(shù)量較多等優(yōu)點,。但是此方法需要昂貴的超高速離心機,，每次處理的樣本量較小，費時,，電鏡鑒定時還發(fā)現(xiàn)外泌體易聚集成塊,，且上清中仍能檢測到大型囊泡，純度不高,，另外高速離心會損傷外泌體影響下游實驗,。湖南外泌體miRNA測序外泌體作為小分子的藥物傳遞載體。

外泌體的提取主要包括以下幾種方式,。一是超速離心法,，這是目前外泌體提取較常用的方法。此種方法得到的外泌體量多,，但是純度不足,，電鏡鑒定時發(fā)現(xiàn)外泌體聚集成塊，由于微泡和外泌體沒有非常統(tǒng)一的鑒定標準,，也有一些研究認為此種方法得到的是微泡不是外泌體,。二是過濾離心,，這種操作簡單、省時,，不影響外泌體的生物活性,，但同樣存在純度不足的問題。三是密度梯度離心法,，用此種方法分離到的外泌體純度高,，但是前期準備工作繁雜，耗時,，量少,。膜受體的識別是外泌體細胞反應的基礎，它可能活躍受體并隨后導致相關信號通路的活躍,。

外泌體遞送藥物的優(yōu)勢：許多新的候選藥物（例如蛋白質和核酸）在體內環(huán)境中高度不穩(wěn)定,，對診療結果的效果提出了重大挑戰(zhàn)。鑒于與許多當前的納米微粒遞送系統(tǒng)相關的問題,，外泌體作為“自然的遞送系統(tǒng)”允許遞送這些生物分子,。由于外泌體體積小和其本身就是細胞產物，通過外泌體遞送藥物可以避免巨噬細胞的吞噬作用或降解,，還可以在體內長時間循環(huán),，保持效果。其中,，外泌體能夠穿過血腦屏障以將特定藥物輸送到中樞的神經系統(tǒng)是外泌體遞送藥物的一個明顯優(yōu)勢,。外泌體作為核酸的藥物遞送載體。

外泌體的來源與特征：外泌體是一種存在于細胞外的多囊泡體,，通過細胞內吞泡膜向內凹陷形成,，其大小均一，直徑為40-100nm,，密度為1.10-1.18g/mL,。外泌體可由間充質干細胞、淋巴細胞和肉瘤細胞等多種類型細胞主動分泌釋放,。外泌體內主要含有核酸,、蛋白質和脂質等，可作為疾病診斷標記物,、調控靶細胞功能,、參與細胞生物學活動等。例如：含有miR-140-5p的滑膜間充質干細胞來源外泌體(SMSC-Exo影響軟骨組織再生,；骨髓間充質干細胞來源外泌體攜帶的miR-196a可調節(jié)成骨細胞分化促進大鼠顱骨缺損的骨再生。在凝血過程中血小板會分泌大量的外泌體,，有研究發(fā)現(xiàn)血清中有接近50%的外泌體來自額外的分泌,。江蘇外泌體lncRNA芯片

1983年,，外泌體初次于綿羊網織紅細胞中被發(fā)現(xiàn)。組織外泌體提取試劑盒步驟

外泌體的相關成分：1,、外泌體的膜同細胞一樣,，是磷脂雙分子層。2,、外泌體膜含有MHC-1/2蛋白,，能綁定特異性的肽鏈。3,、外泌體膜中有跨膜蛋白PGRL,、LAMP1、LAMP2,。4,、外泌體膜中有膜轉運融合蛋白annexins、RAN,、GTPases,。5、外泌體膜上有脂質筏Chol,、ceramide,、SM、PC,，限制膜流動,，參與包括跨膜信號轉導、物質內吞,、脂質及蛋白定向分選的多種功能,。6、外泌體中含有核酸,，包括miRNA,、DNA、lncRNA,、mRNA,；同時還有一些蛋白、脂類也能被包裹到外泌體中,。7,、與外泌體產生相關的重要分子：Ral、ARF6,、PLD2,、RAB家族。8,、一些物質進行外泌體中是特異性的：如hnRNPA2B1能結合lncRNA或miRNA特異性的序列（GGAG/CCCU）,，進行主動包埋,。外泌體的膜同細胞一樣，是磷脂雙分子層,。組織外泌體提取試劑盒步驟

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