外泌體生物學(xué)功能：1、在心血管系統(tǒng)中,，據(jù)報(bào)道,，源自人胚胎干細(xì)胞（ESC）的間充質(zhì)干細(xì)胞（MSC）外泌體可減少小鼠和豬模型中的心肌缺血和再灌注損傷；2,、在免疫系統(tǒng)中,，據(jù)報(bào)道趨化因子受體CCR5通過外泌體在細(xì)胞之間轉(zhuǎn)移是細(xì)胞人類免疫缺陷病毒傳染的一種機(jī)制；3,、在中樞的神經(jīng)系統(tǒng)（CNS）中,，外泌體的作用是消除廢物并介導(dǎo)大腦活動，從而阻止神經(jīng)退行性疾病的發(fā)病機(jī)理；迄今為止,，尚未完全發(fā)現(xiàn)調(diào)節(jié)外泌體-細(xì)胞結(jié)合的途徑,。然而，比較明顯,，其結(jié)合過程從外泌體識別受體細(xì)胞PM上的特定受體開始,。膜受體的識別是外泌體細(xì)胞反應(yīng)的基礎(chǔ)，它可能活躍受體并隨后導(dǎo)致相關(guān)信號通路的活躍,，外泌體與PM融合或外泌體的內(nèi)吞作用,，從而導(dǎo)致蛋白質(zhì)和RNA直接釋放到受體細(xì)胞中。從研究上來講并不太嚴(yán)格區(qū)分外泌體或微泡,。外泌體研究使用血漿樣本進(jìn)行實(shí)驗(yàn)較好,。河南外泌體蛋白質(zhì)組學(xué)

PEG沉淀法分離外泌體：通常通過將無水聚合物，如聚乙二醇（PEG）,，與樣品混合來沉淀外泌體,。PEG聚合物競爭性結(jié)合水分子，增加疏水性蛋白和脂質(zhì)分子的相互結(jié)合力從而沉淀外泌體,，然后通過離心分離外泌體,。這種分離的方法快速，簡便,，可用于各種起始體積（從100μL到幾毫升）適合于各種研究和臨床設(shè)定,。然而，這種方法缺乏選擇性,，PEG聚合物不只會導(dǎo)致外泌體小泡沉淀,，還會引起其他細(xì)胞外囊泡、細(xì)胞外蛋白質(zhì)和蛋白質(zhì)聚集體沉淀,。因此,，在使用這種方法之前，必須進(jìn)行樣品預(yù)處理,，例如過濾或超速離心,，以減少較終的外泌體制劑的污染。外泌體綜述外泌體存在于組織樣本中,，如腦組織,、肌肉組織、脂肪組織等,。

細(xì)胞攝取診療性外泌體：從樹突狀細(xì)胞,、成纖維細(xì)胞和間充質(zhì)細(xì)胞中分離出的診療性外泌體可對靶細(xì)胞產(chǎn)生特定的作用，包括新抗原呈遞,、免疫調(diào)節(jié)和藥物有效載荷傳遞,。診療性外泌體對靶細(xì)胞的影響可能是通過不同的進(jìn)入或相互作用機(jī)制來控制的。完整的外泌體的進(jìn)入可能包括受體介導(dǎo)的內(nèi)吞作用、網(wǎng)格蛋白包被小凹,、脂筏,、吞噬作用、小凹和大胞飲作用,。外泌體的內(nèi)容物的進(jìn)入或外泌體信號的誘導(dǎo)可能涉及配體受體誘導(dǎo)的細(xì)胞內(nèi)信號或融合,，從而將外泌體內(nèi)容物沉積到細(xì)胞質(zhì)中。

外泌體病毒傳染：外泌體可以限制或促進(jìn)病毒傳染,。如IFNα或APOBEC3G等外泌體載體可通過限制病毒復(fù)制或增強(qiáng)抗病毒免疫來阻止傳染,。病毒也可以劫持外泌體的生物發(fā)生機(jī)制來促進(jìn)病毒的傳播,。外泌體可以作為一個假包膜,，通過四聚體蛋白(CD81,CD9)和PtSer相互作用增強(qiáng)病毒進(jìn)入受體細(xì)胞，并幫助逃避抗病毒免疫,。病毒組分(蛋白質(zhì)和miRNA)的共轉(zhuǎn)運(yùn)也可能增強(qiáng)傳染性,。外泌體介導(dǎo)的病毒轉(zhuǎn)移可能參與了病毒的遺傳協(xié)同和多重傳染.(CMV,巨細(xì)胞病毒；HSV-1,1型皰疹病毒),。外泌體的作用是消除廢物并介導(dǎo)大腦活動,，從而阻止神經(jīng)退行性疾病的發(fā)病機(jī)理。

外泌體的提取主要包括以下幾種方式,。一是超速離心法,，這是目前外泌體提取較常用的方法。此種方法得到的外泌體量多,，但是純度不足,，電鏡鑒定時發(fā)現(xiàn)外泌體聚集成塊，由于微泡和外泌體沒有非常統(tǒng)一的鑒定標(biāo)準(zhǔn),，也有一些研究認(rèn)為此種方法得到的是微泡不是外泌體,。二是過濾離心，這種操作簡單,、省時,，不影響外泌體的生物活性，但同樣存在純度不足的問題,。三是密度梯度離心法,，用此種方法分離到的外泌體純度高，但是前期準(zhǔn)備工作繁雜,，耗時,，量少。外泌體是包含了復(fù)雜RNA和蛋白質(zhì)的小膜泡(30–150nm),，由所有體外和體內(nèi)細(xì)胞持續(xù)分泌,。血清外泌體circRNA測序

外泌體的存在：外泌體幾乎存在于所有的組織、細(xì)胞間隙、體液中,。河南外泌體蛋白質(zhì)組學(xué)

細(xì)胞外囊泡是蛋白質(zhì),、mRNA、miRNA和脂質(zhì)運(yùn)輸來完成細(xì)胞間通訊通路的重要媒介,，根據(jù)它們的大小和發(fā)生分為三類,，包括外泌體、微泡和凋亡小體,。其中,，外泌體是直徑大約為40-100nm的包裝囊泡，由多種細(xì)胞分泌,，內(nèi)含有特定的蛋白質(zhì),、脂質(zhì)、細(xì)胞因子或遺傳物質(zhì),。來源于不同的組織的外泌體不只具有其特異性蛋白分子,，而且還包含其行使功能的關(guān)鍵分子。近年來,，隨著外泌體研究的不斷深入,，它的應(yīng)用已經(jīng)涉及瘤子診療領(lǐng)域、醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)和免疫領(lǐng)域,、寄生蟲領(lǐng)域,；臨床研究上已涉及心血管系統(tǒng)、內(nèi)分泌代謝系統(tǒng)等,。超速離心是目前分離外泌體的主要技術(shù),。河南外泌體蛋白質(zhì)組學(xué)

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