外泌體研究背景：胞外囊泡是從細胞膜上脫落或者由細胞分泌的具有雙層膜結構的囊泡狀小體，主要由微囊泡,、凋亡小體,、外泌體組成。而外泌體是其中一類小囊泡,，直徑為30~150nm,，密度1.10~1.18g/ml，可攜帶核酸,、蛋白質(zhì)質(zhì)和脂質(zhì)等,，存在于血液、唾液,、尿液等多種體液中,。越來越多的研究證實，外泌體可以通過細胞間轉移核酸,、蛋白質(zhì),、脂質(zhì)等特定物質(zhì),，發(fā)揮特殊的功能。如在抗原提呈細胞中呈遞抗原程中,、腫細胞細胞發(fā)生了發(fā)展,、神經(jīng)細胞信號轉導過程中都發(fā)揮著重要作用。對外泌體的分析和檢測可以輔助疾病的早期診斷,、療效評價和預后分析,。一個推測的作用是外泌體可能從細胞中去除多余和/或不必要的成分以維持細胞內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定。外泌體陰性標志物

AFC自動收集器是將qEV分離法這一過程自動化的儀器,，將用來收集外泌體樣本的微量離心管放置在AFC的中間轉盤內(nèi),，根據(jù)稱重精確測量流體體積，可精確的測量到樣品中每一個液滴的重量并精確測量總重量,。將在空隙體積之前從qEV柱洗脫的流體收集到AFC轉盤的單獨中心孔中并送至廢液桶,，避免將不需要的空隙部分收集到微量離心管中。在提取期間,，當達到設定的提取體積后,，轉盤會自動旋轉到下一個微量離心管繼續(xù)收集，到收集完成后自動停止,。微滴式數(shù)字PCR技術不佳有效提高了核酸分子的擴增效率,，而且由于采用微滴計數(shù)的方法進行定量，可以不依賴與RT-PCR的熒光信號和Ct值,，對所測樣品中的核酸分子進行一定定量,。外泌體時光針是啥外泌體作為蛋白質(zhì)的藥物遞送載體。

外泌體的納米球膜型結構由雙層脂質(zhì)形成,。它也由各種類型的脂質(zhì)和蛋白質(zhì)組成,，這些脂質(zhì)和蛋白質(zhì)衍生自形成外泌體的親代細胞。根據(jù)外泌體數(shù)據(jù)庫ExoCarta的資料,，目前已知約有8000種蛋白質(zhì)和194種脂質(zhì)與外泌體相關,。外泌體通過生物體液被多種不同類型的細胞分泌，包括滑膜液,，母乳,，血液，尿液,，唾液,，羊水和血液中的血清，這表明它們在細胞間通訊和觸發(fā)生理反應中起著重要的作用,。外泌體功能在研究初期階段發(fā)現(xiàn)是參與細胞成熟過程中去除不必要的蛋白質(zhì),。簡而言之，它們是天然膜囊泡，將蛋白質(zhì),，RNA,，DNA和脂質(zhì)從一個細胞攜帶到另一個細胞，從而調(diào)節(jié)受體細胞的生物功能,。

外泌體的來源與特征：外泌體是一種存在于細胞外的多囊泡體,，通過細胞內(nèi)吞泡膜向內(nèi)凹陷形成，其大小均一,，直徑為40-100nm,，密度為1.10-1.18g/mL。外泌體可由間充質(zhì)干細胞,、淋巴細胞和腫細胞細胞等多種類型細胞主動分泌釋放,。外泌體內(nèi)主要含有核酸、蛋白質(zhì)和脂質(zhì)等,，可作為疾病診斷標記物,、調(diào)控靶細胞功能、參與細胞生物學活動等,。例如：含有miR-140-5p的滑膜間充質(zhì)干細胞來源外泌體(SMSC-Exo影響軟骨組織再生,；骨髓間充質(zhì)干細胞來源外泌體攜帶的miR-196a可調(diào)節(jié)成骨細胞分化促進大鼠顱骨缺損的骨再生。外泌體顯示出了在診療各種疾?。ㄈ缧募〔『蜕窠?jīng)?。┓矫娴臐摿Α３匐x心是目前分離外泌體的主要技術,。

磁珠免疫法分離外泌體：將針對目的抗原的抗體通過生物素-鏈霉親和素連接到磁珠表面,，然后將磁珠與樣品共孵育，使外泌體特異性結合到磁珠上形成磁珠-外泌體復合物,，再用蒸餾水或者PBS沖洗,，結尾用甘氨酸-Tris-HCl溶液洗脫獲得外泌體。該方法相對于ELISA的好處主要是,，珠粒提供了更大的表面積來捕獲外泌體，從而提高了分離效率,。此外,，使用磁珠時，樣品起始體積沒有上限,，而基于微孔板的ELISA分析的較大樣品體積為100μL,，且ELISA洗脫雜質(zhì)時容易造成孔間交叉污染。當將磁珠法與金標準外泌體分離方法進行比較時,，磁珠法可分離出更純凈的外泌體,，特異性高、速度更快,，并且不需要昂貴的儀器,。另外,，與其他分離方法（如超速離心或超濾）相比，磁珠法不影響外泌體形態(tài),。但是采用磁珠法時,，外泌體生物活性易受PH和鹽濃度影響。外泌體膜含有MHC-1/2蛋白,，能綁定特異性的肽鏈,。細胞提取試劑盒服務

在免疫系統(tǒng)中，據(jù)報道趨化因子受體CCR5通過外泌體在細胞之間轉移是細胞人類免疫缺陷病毒傳染的一種機制,。外泌體陰性標志物

外泌體是包含了復雜RNA和蛋白質(zhì)的小膜泡(30–150nm)，由所有體外和體內(nèi)細胞持續(xù)分泌,。由于人體內(nèi)復雜的功能，包括細胞間通訊和信號轉導,，外泌體正在改變研究,。這些細胞外囊泡正在生長,，這既是為了了解其生物學功能，也是為了將其用于實際應用,，如無創(chuàng)診斷和高級調(diào)理開發(fā),。Dynabeads提供一系列外泌體分離產(chǎn)品和工具,，用于表征和分析其RNA和蛋白質(zhì)含量,，以及體外和體內(nèi)追蹤,，以幫助您進一步了解這些迷人的外泌體。超速離心方案可能冗長乏味且耗時的,。您可使用靈活且可擴展的總外泌體分離試劑從細胞培養(yǎng)基或任何體液中即刻分離完整的外泌體,。這些試劑及其隨附的方案是多種試驗的理想選擇,，包括處理少量樣本和處理多個樣本。外泌體陰性標志物

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