常規(guī)生物學實驗中,，實時定量PCR技術（RT-PCR）普遍用于microRNA的檢測實踐中,，但外泌體樣品中的microRNA豐度極低,，普通RT-PCR技術的靈敏度已經不能夠滿足。第三代微滴式數字PCR——ddPCR技術,，成為外泌體microRNA檢測的選擇技術。微滴式數字PCR（DropletdigitalPCR）,，又成為“油包水PCR”,，在傳統的PCR擴增前對樣品進行微滴化處理，即將含有核酸分子的反應體系分成成千上萬個納升級的微滴,，其中每個微滴或不含待檢核酸靶分子,，或者含有一個至數個待檢核酸靶分子。經PCR擴增后,，逐個對每個微滴進行檢測,，有熒光信號的微滴判讀為1，沒有熒光信號的微滴判讀為0,，根據泊松分布原理及陽性微滴的個數與比例即可得出靶分子的起始拷貝數或濃度,。外泌體能夠穿過血腦屏障以將特定藥物輸送到中樞的神經系統是外泌體遞送藥物的一個明顯優(yōu)勢。血漿外泌體提取

外泌體的臨床應用：間充質干細胞是目前較普遍使用的細胞類型,，它具有自我更新,，多向分化、分泌細胞因子和細胞外囊泡體,、免疫調節(jié),、來源普遍等特點，在臨床診療中取得了良好的成果,。間充質干細胞來源外泌體與間充質干細胞有著相似的功能,，包括修復與再生組織、阻止炎癥反應及調節(jié)機體免疫,，但外泌體相對于間充質干細胞又有許多優(yōu)勢,。首先，間充質干細胞來源外泌體更穩(wěn)定,，更好保存,，易于管理和控制，可以人為改變其內容物的種類和數量,。其次,，它們沒有活細胞，不會像間充質干細胞那樣可能會過多增殖而放大療效或者病變導致疾病加重,；另外,，它有可能避免某些針對間充質干細胞的調控問題,，間充質干細胞來源外泌體有代替間充質干細胞的趨勢。干細胞外泌體攝取流式細胞技術是細胞和小顆粒定性和定量表征的有效方法,，其用于外泌體定量檢測的準確性也在不斷上升,。外泌體是什么提取的超速離心是目前分離外泌體的主要技術。

外泌體的來源與特征：外泌體是一種存在于細胞外的多囊泡體,，通過細胞內吞泡膜向內凹陷形成,，其大小均一，直徑為40-100nm,，密度為1.10-1.18g/mL,。外泌體可由間充質干細胞、淋巴細胞和肉瘤細胞等多種類型細胞主動分泌釋放,。外泌體內主要含有核酸,、蛋白質和脂質等，可作為疾病診斷標記物,、調控靶細胞功能,、參與細胞生物學活動等。例如：含有miR-140-5p的滑膜間充質干細胞來源外泌體(SMSC-Exo影響軟骨組織再生,；骨髓間充質干細胞來源外泌體攜帶的miR-196a可調節(jié)成骨細胞分化促進大鼠顱骨缺損的骨再生,。

血漿中的外泌體蛋白既可以當作標志物，也可以進行機理研究,？首先,，研究人員將慢性淋巴瘤（CLL）患者分為2個亞組：疾病進展期和疾病慢性期。然后利用質譜技術分析了患者血漿外泌體蛋白組,，發(fā)現S100-A9蛋白在進展期CLL患者中明顯高表達,，可以作為CLL進展期診斷的輔助標志物。進一步,，研究人員通過生信分析發(fā)現進展期CLL患者外泌體中的高表達蛋白質主要與炎癥和氧化應激有關,，而NF-κB通路正是承接此效應的關鍵通路。通過從進展期CLL患者中分離富含S100-A9蛋白的外泌體加入CLL患者的PBMC細胞中,，證實了S100-A9+外泌體能夠明顯促進進展期CLL患者PBMC細胞中IκBα蛋白的磷酸化上調,，進一步活躍NF-κB通路。該研究證通過血漿外泌體蛋白組分析不只找到輔助診斷進展期CLL的標志物,，并證實了S100-A9+外泌體可通過形成正向反饋調控,，不斷活躍進展期CLL患者自身PBMC細胞中的NF-κB通路，促進CLL進展的特殊機理,。外泌體作為蛋白質的藥物遞送載體。

外泌體是細胞分泌到胞外的一種囊泡,，其大小為30-150nm,，具有雙層膜結構和茶托狀形態(tài),，含有豐富的內含物（包括核酸、蛋白和脂質等）,，參與細胞間的分子傳遞,。外泌體普遍存在于細胞培養(yǎng)上清以及各種體液中，包括血液,、唾液,、尿液、乳汁等,，同時也存在于組織樣本中,，如腦組織、肌肉組織,、脂肪組織等,。所有的細胞都能分泌外泌體，但是不同細胞分泌的外泌體不管在數量上還是在內含物中都具有比較大的差異性,，這也決定了每種外泌體所行使的功能不一樣,。外泌體普遍參與細胞間物質運輸與信息傳遞，調控細胞生理活動,。同時,，外泌體具有抗原提呈、免疫逃逸,、誘導正常細胞轉化,、促進瘤子發(fā)生和轉移等作用；此外,，外泌體還可以作為“天然的納米粒子”來進行藥物遞送,。近年來，隨著外泌體研究的不斷深入,，它的應用已經涉及醫(yī)學基礎和免疫領域,、寄生蟲領域。血漿血清提取試劑盒分類

外泌體中常見的細胞質蛋白是Rabs蛋白,，是鳥苷酸三磷酸酶家族的一種,。血漿外泌體提取

內化的外泌體和內源性產生的外泌體的細胞旅程：外泌體可以通過不同的機制直接進入細胞。外泌體由細胞通過內吞作用過程從頭生成,。外泌體不斷地被細胞產生和吸收,。它們可能是新生成的外泌體和消耗的外泌體的混合物。目前尚不清楚內生性產生或消耗的外泌體是一起釋放還是單獨釋放,。被吸收的外泌體會被溶酶體降解,。進入細胞的外泌體可能進入或與已存在的ESEs融合，隨后解體并將其內容物釋放到細胞質中。另外,，內泌體可以與質膜融合并在細胞外釋放外泌體,。血漿外泌體提取

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