外泌體中常見的細胞質(zhì)蛋白是Rabs蛋白,是鳥苷酸三磷酸酶家族的一種,。它可以調(diào)節(jié)外泌體膜與受體細胞的融合,,有文獻報道稱RAB4,RAB5和RAB11主要出現(xiàn)在早期以及回收的核內(nèi)體中,RAB7和RAB9主要出現(xiàn)在晚期的核內(nèi)體?,F(xiàn)有大量的研究發(fā)現(xiàn)外泌體中含有40種RAB蛋白,。除了RAB蛋白,外泌體中富含具有外泌體膜交換以及融合作用的膜聯(lián)蛋白(包括膜聯(lián)蛋白1,、2,、4、5,、6,、7、11等),。外泌體膜上富含參與外泌體運輸?shù)乃目缒さ鞍准易澹–D63,CD81和CD9)),、熱休克蛋白家族((HSP60,HSP70,HSPA5,CCT2和HSP90以及一些細胞特異性的蛋白包括A33(結(jié)腸上皮細胞來源)、MHC-Ⅱ(抗原提呈細胞來源),、CD86(抗原提呈細胞來源)以及乳凝集素,。外泌體具有抗原提呈、免疫逃逸,、誘導正常細胞轉(zhuǎn)化,、促進瘤子發(fā)生和轉(zhuǎn)移等作用。鼻腔灌洗液外泌體label free
外泌體的相關(guān)成分:1,、外泌體的膜同細胞一樣,,是磷脂雙分子層。2,、外泌體膜含有MHC-1/2蛋白,,能綁定特異性的肽鏈。3,、外泌體膜中有跨膜蛋白PGRL,、LAMP1、LAMP2,。4,、外泌體膜中有膜轉(zhuǎn)運融合蛋白annexins,、RAN、GTPases,。5,、外泌體膜上有脂質(zhì)筏Chol、ceramide,、SM,、PC,限制膜流動,,參與包括跨膜信號轉(zhuǎn)導,、物質(zhì)內(nèi)吞、脂質(zhì)及蛋白定向分選的多種功能,。6,、外泌體中含有核酸,包括miRNA,、DNA,、lncRNA、mRNA,;同時還有一些蛋白,、脂類也能被包裹到外泌體中。7,、與外泌體產(chǎn)生相關(guān)的重要分子:Ral,、ARF6、PLD2,、RAB家族,。8、一些物質(zhì)進行外泌體中是特異性的:如hnRNPA2B1能結(jié)合lncRNA或miRNA特異性的序列(GGAG/CCCU),,進行主動包埋,。超速離心是目前分離外泌體的主要技術(shù)。外泌體霧化價格多少錢外泌體是指包含了復雜 RNA 和蛋白質(zhì)的小膜泡 (30-150nm),。
外泌體的來源與特征:外泌體是一種存在于細胞外的多囊泡體,,通過細胞內(nèi)吞泡膜向內(nèi)凹陷形成,其大小均一,,直徑為40-100nm,,密度為1.10-1.18g/mL。外泌體可由間充質(zhì)干細胞,、淋巴細胞和腫細胞細胞等多種類型細胞主動分泌釋放,。外泌體內(nèi)主要含有核酸、蛋白質(zhì)和脂質(zhì)等,可作為疾病診斷標記物,、調(diào)控靶細胞功能、參與細胞生物學活動等,。例如:含有miR-140-5p的滑膜間充質(zhì)干細胞來源外泌體(SMSC-Exo影響軟骨組織再生,;骨髓間充質(zhì)干細胞來源外泌體攜帶的miR-196a可調(diào)節(jié)成骨細胞分化促進大鼠顱骨缺損的骨再生。外泌體作為核酸的藥物遞送載體,。
近年來,,外泌體的捕獲技術(shù)越來越多,微流體系也被用于外泌體提取,,此方法能根據(jù)其物理和生化特性同時分離外泌體,。采用這種方法獲得的樣品純度高,且可及時獲取外泌體用于疾病的相關(guān)檢測,。在初次注射時外泌體粘附在微流控設(shè)備的內(nèi)表面,,并在隨后的PBS注射中沖洗掉。此方法采用的設(shè)備復雜,,所需的樣本量取決于流動通道的長度,。另外,樣品量的注入速率比較低,,因此,,對于大樣品量,將需要較長的處理時間,。外泌體在包括瘤子在內(nèi)的各種疾病的發(fā)病機理中具有重要的功能,。目前,研究人員已經(jīng)開發(fā)了多種方法來分離外泌體,,離心技術(shù)仍然是常用方法,,其他方法,例如過濾,、磁珠分離和色譜法等,,也顯示出獨特的優(yōu)勢,但目前仍然沒有一種公認有效的提取方法,,研究人員應(yīng)針對不同來源的樣本以及不同的下游分析選取較適宜的提取方案,。外泌體的提取的方式:密度梯度離心法。
外泌體較有用的特性之一是它們穿過屏障(如細胞質(zhì)膜和血/腦屏障)的能力,。這使它們成為理想的診療傳遞分子,。外泌體由于其天然的材料運輸特性,固有的長期循環(huán)能力和出色的生物相容性而具有比較大的潛力成為藥物遞送載體,,其適合于遞送各種化學物質(zhì),,蛋白質(zhì),核酸和基因診療劑。(1)外泌體作為小分子的藥物傳遞載體:關(guān)于外泌體遞送姜黃素,,多巴胺,,PTX和DOX等化學診療藥物的報道已有充分文獻記載。(2)外泌體作為蛋白質(zhì)的藥物遞送載體:已經(jīng)發(fā)現(xiàn)外泌體可遞送多種蛋白質(zhì),,例如酶,,細胞骨架蛋白質(zhì)和跨膜蛋白質(zhì)。(3)外泌體作為核酸的藥物遞送載體:研究表明,,外泌體天然的可以攜帶遺傳(例如miRNA,,siRNA)到靶細胞中,從而在生物學和致病過程中誘導遺傳修飾,。外泌體的這些特征已成為涉及遺傳療法和使用外泌體進行研究的主要策略,。外泌體的提取分離方法:PEG-base沉淀法。北京CD81外泌體慢病毒
外泌體存在于組織樣本中,,如腦組織,、肌肉組織、脂肪組織等,。鼻腔灌洗液外泌體label free
胞外囊泡和外泌體的異質(zhì)性,。細胞外囊泡的兩大類是胞外體和外泌體。胞外體通過質(zhì)膜出芽釋放,,大小在50~1mm之間,。外泌體起源于內(nèi)泌體途徑,通過形成包含ILVs的ESEs,、LSEs,,較終形成多泡體。當MVBs與質(zhì)膜融合時,,外泌體釋放(尺寸范圍~40~160nm),。外泌體是一個高度異質(zhì)性的群體,具有獨特的誘導復雜生物學反應(yīng)的能力,。外泌體的異質(zhì)性可以根據(jù)其大小,、含量(載物)、對受體細胞的功能影響以及細胞來源來概念化,。這些特征的不同組合導致了外泌體的復雜異質(zhì)性,。鼻腔灌洗液外泌體label free
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