磁珠免疫法分離外泌體：將針對(duì)目的抗原的抗體通過(guò)生物素-鏈霉親和素連接到磁珠表面，然后將磁珠與樣品共孵育,，使外泌體特異性結(jié)合到磁珠上形成磁珠-外泌體復(fù)合物,，再用蒸餾水或者PBS沖洗，結(jié)尾用甘氨酸-Tris-HCl溶液洗脫獲得外泌體,。該方法相對(duì)于ELISA的好處主要是,，珠粒提供了更大的表面積來(lái)捕獲外泌體，從而提高了分離效率,。此外,，使用磁珠時(shí)，樣品起始體積沒(méi)有上限,，而基于微孔板的ELISA分析的較大樣品體積為100μL,，且ELISA洗脫雜質(zhì)時(shí)容易造成孔間交叉污染。當(dāng)將磁珠法與金標(biāo)準(zhǔn)外泌體分離方法進(jìn)行比較時(shí),，磁珠法可分離出更純凈的外泌體,，特異性高、速度更快,，并且不需要昂貴的儀器,。另外，與其他分離方法（如超速離心或超濾）相比,，磁珠法不影響外泌體形態(tài),。但是采用磁珠法時(shí)，外泌體生物活性易受PH和鹽濃度影響,?；谕饷隗w的液體活檢在病癥和其他疾病的診斷和確定預(yù)后方面具有潛在的應(yīng)用價(jià)值。植物外泌體脂質(zhì)組學(xué)

外泌體的來(lái)源與特征：外泌體是一種存在于細(xì)胞外的多囊泡體，通過(guò)細(xì)胞內(nèi)吞泡膜向內(nèi)凹陷形成,，其大小均一,，直徑為40-100nm，密度為1.10-1.18g/mL,。外泌體可由間充質(zhì)干細(xì)胞,、淋巴細(xì)胞和腫細(xì)胞細(xì)胞等多種類(lèi)型細(xì)胞主動(dòng)分泌釋放。外泌體內(nèi)主要含有核酸,、蛋白質(zhì)和脂質(zhì)等,，可作為疾病診斷標(biāo)記物、調(diào)控靶細(xì)胞功能,、參與細(xì)胞生物學(xué)活動(dòng)等。例如：含有miR-140-5p的滑膜間充質(zhì)干細(xì)胞來(lái)源外泌體(SMSC-Exo影響軟骨組織再生,；骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞來(lái)源外泌體攜帶的miR-196a可調(diào)節(jié)成骨細(xì)胞分化促進(jìn)大鼠顱骨缺損的骨再生,。外泌體顯示出了在診療各種疾病（如心肌病和神經(jīng)?。┓矫娴臐摿?。腦脊液外泌體蛋白質(zhì)組學(xué)外泌體分離之后，需要經(jīng)過(guò)一系列鑒定才能確定分離的是外泌體,。

外泌體的提取分離的方法：1,、超速離心法（差速離心）：超離法是較常用的外泌體純化手段，采用低速離心,、高速離心交替進(jìn)行,，可分離到大小相近的囊泡顆粒。超離法因操作簡(jiǎn)單,，獲得的囊泡數(shù)量較多而廣受歡迎,，但過(guò)程比較費(fèi)時(shí)，且回收率不穩(wěn)定（可能與轉(zhuǎn)子類(lèi)型有關(guān)）,，純度也受到質(zhì)疑,；此外，重復(fù)離心操作還有可能對(duì)囊泡造成損害,，從而降低其質(zhì)量,。2、密度梯度離心：在超速離心力作用下,，使蔗糖溶液形成從低到高連續(xù)分布的密度階層,，是一種區(qū)帶分離法。通過(guò)密度梯度離心,，樣品中的外泌體將在1.13-1.19g/ml的密度范圍富集,。此法獲得的外泌體純度較高，但步驟繁瑣，耗時(shí),。

外泌體是細(xì)胞分泌到胞外的一種囊泡,，其大小為30-150nm，具有雙層膜結(jié)構(gòu)和茶托狀形態(tài),，含有豐富的內(nèi)含物（包括核酸,、蛋白和脂質(zhì)等），參與細(xì)胞間的分子傳遞,。外泌體普遍存在于細(xì)胞培養(yǎng)上清以及各種體液中,，包括血液、唾液,、尿液,、乳汁等，同時(shí)也存在于組織樣本中,，如腦組織,、肌肉組織、脂肪組織等,。所有的細(xì)胞都能分泌外泌體,，但是不同細(xì)胞分泌的外泌體不管在數(shù)量上還是在內(nèi)含物中都具有比較大的差異性，這也決定了每種外泌體所行使的功能不一樣,。外泌體普遍參與細(xì)胞間物質(zhì)運(yùn)輸與信息傳遞,，調(diào)控細(xì)胞生理活動(dòng)。同時(shí),，外泌體具有抗原提呈,、免疫逃逸、誘導(dǎo)正常細(xì)胞轉(zhuǎn)化,、促進(jìn)瘤子發(fā)生和轉(zhuǎn)移等作用,；此外，外泌體還可以作為“天然的納米粒子”來(lái)進(jìn)行藥物遞送,。免疫印跡或蛋白質(zhì)印跡是分析外泌體較常用的方法之一,，其原理是外泌體上特異性抗原與抗體結(jié)合。

外泌體病毒傳染：外泌體可以限制或促進(jìn)病毒傳染,。如IFNα或APOBEC3G等外泌體載體可通過(guò)限制病毒復(fù)制或增強(qiáng)抗病毒免疫來(lái)阻止傳染,。病毒也可以劫持外泌體的生物發(fā)生機(jī)制來(lái)促進(jìn)病毒的傳播。外泌體可以作為一個(gè)假包膜,，通過(guò)四聚體蛋白(CD81,CD9)和PtSer相互作用增強(qiáng)病毒進(jìn)入受體細(xì)胞,，并幫助逃避抗病毒免疫。病毒組分(蛋白質(zhì)和miRNA)的共轉(zhuǎn)運(yùn)也可能增強(qiáng)傳染性,。外泌體介導(dǎo)的病毒轉(zhuǎn)移可能參與了病毒的遺傳協(xié)同和多重傳染.(CMV,巨細(xì)胞病毒,；HSV-1,1型皰疹病毒),。外泌體中常見(jiàn)的細(xì)胞質(zhì)蛋白是Rabs蛋白，是鳥(niǎo)苷酸三磷酸酶家族的一種,。巨噬細(xì)胞分泌的外泌體

外泌體普遍存在于細(xì)胞培養(yǎng)上清以及各種體液中,，包括血液、唾液,、尿液,、乳汁等。植物外泌體脂質(zhì)組學(xué)

ELISA與WB的原理一樣,，在抗體包被的微孔板中加入待測(cè)樣品,、封閉、一抗孵育,，洗滌后加入酶標(biāo)待測(cè)物形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,，徹底洗滌后加顯色劑并用酶標(biāo)儀測(cè)定吸光值，結(jié)尾用標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算外泌體表達(dá)量,。ELISA能實(shí)現(xiàn)對(duì)外泌體特異性蛋白的定量,。其他外泌體鑒定方法還有微流體測(cè)定法和外泌體蛋白質(zhì)組學(xué)分析等。由于外泌體在各種生命過(guò)程中的重要作用及其作為疾病生物標(biāo)志物和藥物輸送系統(tǒng)的潛力,，人們對(duì)此領(lǐng)域的興趣越來(lái)越高,。盡管目前在技術(shù)上取得了長(zhǎng)足的進(jìn)步,，但尚未建立對(duì)外泌體進(jìn)行準(zhǔn)確和標(biāo)準(zhǔn)化鑒定以及定量的方法,，關(guān)于外泌體的量應(yīng)由囊泡顆粒的數(shù)量、囊泡蛋白的量或囊泡數(shù)與蛋白之比來(lái)定義仍存在比較多爭(zhēng)論,。建立外泌體分離,、表征以及效價(jià)測(cè)定的標(biāo)準(zhǔn)化方法將是外泌體作為診斷和診療用途之前需要解決的問(wèn)題。植物外泌體脂質(zhì)組學(xué)

上海宇玫博生物科技有限公司成立于2015-10-16,，是一家專(zhuān)注于外泌體提取試劑盒,，外泌體，外泌體檢測(cè),，外泌體提取的****,，公司位于上海市閔行區(qū)滬青平公路277號(hào)5樓。公司經(jīng)常與行業(yè)內(nèi)技術(shù)**交流學(xué)習(xí),，研發(fā)出更好的產(chǎn)品給用戶(hù)使用,。公司主要經(jīng)營(yíng)外泌體提取試劑盒，外泌體,，外泌體檢測(cè),，外泌體提取，公司與外泌體提取試劑盒,，外泌體,，外泌體檢測(cè),，外泌體提取行業(yè)內(nèi)多家研究中心、機(jī)構(gòu)保持合作關(guān)系,，共同交流,、探討技術(shù)更新。通過(guò)科學(xué)管理,、產(chǎn)品研發(fā)來(lái)提高公司競(jìng)爭(zhēng)力,。Umibio嚴(yán)格按照行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行生產(chǎn)研發(fā)，產(chǎn)品在按照行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)測(cè)試完成后,，通過(guò)質(zhì)檢部門(mén)檢測(cè)后推出,。我們通過(guò)全新的管理模式和周到的服務(wù)，用心服務(wù)于客戶(hù),。上海宇玫博生物科技有限公司以誠(chéng)信為原則,，以安全、便利為基礎(chǔ),，以?xún)?yōu)惠價(jià)格為外泌體提取試劑盒,，外泌體，外泌體檢測(cè),，外泌體提取的客戶(hù)提供貼心服務(wù),，努力贏得客戶(hù)的認(rèn)可和支持，歡迎新老客戶(hù)來(lái)我們公司參觀,。