根據(jù)內(nèi)侵量的不同,，可以產(chǎn)生不同尺寸,、不同含量的ILV,。LSEs產(chǎn)生的MVBs具有確定的ILV聚集(未來的外泌體)。MVBs可以與自噬體融合,，較終其內(nèi)容物在溶酶體中降解,。降解產(chǎn)物可被細(xì)胞回收利用。MVBs也可以直接與溶酶體融合降解,。不遵循這一軌跡的MVBs可通過細(xì)胞骨架和微管網(wǎng)絡(luò)轉(zhuǎn)運至質(zhì)膜,，借助mvb-停靠蛋白?？吭谫|(zhì)膜的腔側(cè),。隨后胞吐導(dǎo)致具有與質(zhì)膜相似的脂質(zhì)雙分子層方向的外泌體的釋放。有幾種蛋白參與了外泌體的生物發(fā)生,，包括RabGTPases,、ESCRT蛋白，以及其他也被用作外泌體標(biāo)記的蛋白(CD9,、CD81,、CD63、flotillin,、TSG101、神經(jīng)酰胺和Alix)。外泌體產(chǎn)生于細(xì)胞中的多泡體,。腦脊液外泌體示蹤

DLS使用由于粒子的布朗運動而產(chǎn)生的波動散射光的強度來估計外泌體顆粒的大小分布及其zeta電位,。DLS樣品制備方便，只需要簡單的過濾,，測量速度較快,，需要的樣品體積較少。但由于動態(tài)光散射技術(shù)是基于光強測量,，散射光的強度與粒徑的六次方成正比,，使得當(dāng)測量多種粒徑的混合懸浮液時，通常會偏向于檢測較大粒徑產(chǎn)生的散射光,，比較難檢測到較小顆粒,。所以DLS不適合對粒徑分布較寬的外泌體樣本的測量，只適合尺寸較為均一的外泌體樣本,，并且無法測量樣品中外泌體的濃度,。湖南CD63外泌體慢病毒采用磁珠法時，外泌體生物活性易受PH和鹽濃度影響,。

外泌體的相關(guān)成分：1,、外泌體的膜同細(xì)胞一樣，是磷脂雙分子層,。2,、外泌體膜含有MHC-1/2蛋白，能綁定特異性的肽鏈,。3,、外泌體膜中有跨膜蛋白PGRL、LAMP1,、LAMP2,。4、外泌體膜中有膜轉(zhuǎn)運融合蛋白annexins,、RAN,、GTPases。5,、外泌體膜上有脂質(zhì)筏Chol,、ceramide、SM,、PC,，限制膜流動，參與包括跨膜信號轉(zhuǎn)導(dǎo),、物質(zhì)內(nèi)吞,、脂質(zhì)及蛋白定向分選的多種功能,。6、外泌體中含有核酸,，包括miRNA,、DNA、lncRNA,、mRNA,；同時還有一些蛋白、脂類也能被包裹到外泌體中,。7,、與外泌體產(chǎn)生相關(guān)的重要分子：Ral、ARF6,、PLD2,、RAB家族。8,、一些物質(zhì)進(jìn)行外泌體中是特異性的：如hnRNPA2B1能結(jié)合lncRNA或miRNA特異性的序列（GGAG/CCCU）,，進(jìn)行主動包埋。外泌體的膜同細(xì)胞一樣,，是磷脂雙分子層,。

外泌體較有用的特性之一是它們穿過屏障（如細(xì)胞質(zhì)膜和血/腦屏障）的能力。這使它們成為理想的診療傳遞分子,。外泌體由于其天然的材料運輸特性,，固有的長期循環(huán)能力和出色的生物相容性而具有比較大的潛力成為藥物遞送載體，其適合于遞送各種化學(xué)物質(zhì),，蛋白質(zhì),，核酸和基因診療劑。（1）外泌體作為小分子的藥物傳遞載體：關(guān)于外泌體遞送姜黃素,，多巴胺,，PTX和DOX等化學(xué)診療藥物的報道已有充分文獻(xiàn)記載。（2）外泌體作為蛋白質(zhì)的藥物遞送載體：已經(jīng)發(fā)現(xiàn)外泌體可遞送多種蛋白質(zhì),，例如酶,，細(xì)胞骨架蛋白質(zhì)和跨膜蛋白質(zhì)。（3）外泌體作為核酸的藥物遞送載體：研究表明,，外泌體天然的可以攜帶遺傳（例如miRNA,，siRNA）到靶細(xì)胞中，從而在生物學(xué)和致病過程中誘導(dǎo)遺傳修飾,。外泌體的這些特征已成為涉及遺傳療法和使用外泌體進(jìn)行研究的主要策略,。外泌體發(fā)揮功能方式：細(xì)胞-細(xì)胞之間的通訊，譬如抗原遞呈,，這是發(fā)揮功能的主要方式,。

透射電子顯微鏡（TEM）和掃描電子顯微鏡（SEM）是用于評估外泌體形態(tài),、大小和表型的的兩種常見的電子顯微鏡。SEM和TEM均使用電子束產(chǎn)生高分辨率的亞微米顆粒放大圖像,，以區(qū)分外泌體與殘留在樣品中相似大小的非外泌體顆粒,，該方法還可用于檢查樣品的純度。TEM與SEM之間的區(qū)別在于檢測電子類別,，在SEM中，電子與樣品中的粒子相互作用時會發(fā)生散射,，捕獲并檢測散射的電子,，從而生成粒子圖像。但是,，在TEM中,，不與粒子相互作用的電子穿過樣品，并使用熒光屏進(jìn)行檢測,。電子顯微鏡下外泌體大小不一,，通常呈茶托樣的圓形或橢圓形。采用電子顯微鏡檢測外泌體時對樣品的預(yù)處理和制備要求較高,，外泌體的提取方法和品質(zhì)會對電鏡結(jié)果造成影響,；另外樣品的準(zhǔn)備階段比較復(fù)雜，不適合進(jìn)行大量快速的測量,；而且由于樣本經(jīng)過了干燥,、固定以及冷凍等預(yù)處理和制備過程，對生物樣本的結(jié)構(gòu)會造成一定的破壞,，從而影響觀察的效果,，無法準(zhǔn)確測量外泌體濃度。外泌體的作用是消除廢物并介導(dǎo)大腦活動,，從而阻止神經(jīng)退行性疾病的發(fā)病機理,。外泌體之家

外泌體的提取的方式：色譜法。腦脊液外泌體示蹤

外泌體的提取,、純化和鑒定：每一個外泌體研究者較初都要為外泌體的分離提取而煩惱,。選擇的分離方式是利用超速離心的方式分離外泌體，并且可以選用梯度密度離心法得到純度更高的外泌體,。另外利用外泌體自身的物理化學(xué)性質(zhì)所研發(fā)的各種市售的外泌體分離提取試劑盒也能達(dá)到分離效果,。提取的外泌體的鑒定方式主要是通過形態(tài)學(xué)（電子顯微鏡技術(shù)）、粒子大小以及標(biāo)志蛋白等方式實現(xiàn)的,。近來的研究發(fā)現(xiàn)外泌體在比較多生理病理上起著重要的作用,，如免疫中抗原呈遞、瘤子的生長與遷移,、組織損傷的修復(fù)等,。不同細(xì)胞分泌的外泌體具有不用的組成成分和功能,，可作為疾病診斷的生物標(biāo)志物。外泌體具有脂質(zhì)雙層膜結(jié)構(gòu),，能比較好的保護其包被的物質(zhì),，且能靶向特定細(xì)胞或組織，因此是一種比較好靶向給藥系統(tǒng),。腹水外泌體融合實驗外泌體的膜蛋白有可能與細(xì)胞膜蛋白作用,，活躍細(xì)胞內(nèi)通路。腦脊液外泌體示蹤

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