根據(jù)內(nèi)侵量的不同,，可以產(chǎn)生不同尺寸、不同含量的ILV,。LSEs產(chǎn)生的MVBs具有確定的ILV聚集(未來的外泌體),。MVBs可以與自噬體融合，較終其內(nèi)容物在溶酶體中降解,。降解產(chǎn)物可被細胞回收利用,。MVBs也可以直接與溶酶體融合降解,。不遵循這一軌跡的MVBs可通過細胞骨架和微管網(wǎng)絡(luò)轉(zhuǎn)運至質(zhì)膜，借助mvb-?？康鞍淄,？吭谫|(zhì)膜的腔側(cè)。隨后胞吐導致具有與質(zhì)膜相似的脂質(zhì)雙分子層方向的外泌體的釋放,。有幾種蛋白參與了外泌體的生物發(fā)生,，包括RabGTPases、ESCRT蛋白,，以及其他也被用作外泌體標記的蛋白(CD9,、CD81、CD63,、flotillin,、TSG101、神經(jīng)酰胺和Alix),。外泌體是具有生物活性的脂雙層囊泡,。上海外泌體lncRNA測序

外泌體發(fā)現(xiàn)于1986年，是一種直徑約30~100nm的雙層膜囊泡狀結(jié)構(gòu)小體,，可由機體內(nèi)多種細胞如免疫細胞,、干細胞、心血管細胞,、網(wǎng)織紅細胞,、血小板、神經(jīng)細胞和肉瘤細胞等主動分泌產(chǎn)生,，普遍分布于外周血,、尿液、唾液,、乳汁,、腹水、羊水等體液中,。外泌體攜帶大量特異性的蛋白質(zhì)（如細胞因子,、生長因子）以及功能性的mRNAs、miRNAs等生物活性物質(zhì),，在體內(nèi)參與細胞通訊,、細胞遷移、促血管新生和抗肉瘤免疫等生理過程,，與多種疾病的發(fā)生和進程密切相關(guān),。由于外泌體的特殊結(jié)構(gòu)和功能，使得它具有潛在的應(yīng)用價值,，一方面可以作為診斷多種疾病的生物指標,，另一方面也可以作為診療手段,，未來有可能作為藥物的天然載體用于臨床診療。asce外泌體外泌體發(fā)揮功能：將細胞或組織中多余的或者有害的分子排除,，這為研究生物標志物提供了可能,。

外泌體是包含了復(fù)雜RNA和蛋白質(zhì)的小膜泡(30–150nm)，由所有體外和體內(nèi)細胞持續(xù)分泌,。由于人體內(nèi)復(fù)雜的功能,，包括細胞間通訊和信號轉(zhuǎn)導，外泌體正在改變研究,。這些細胞外囊泡正在生長,，這既是為了了解其生物學功能，也是為了將其用于實際應(yīng)用,，如無創(chuàng)診斷和高級調(diào)理開發(fā),。Dynabeads提供一系列外泌體分離產(chǎn)品和工具，用于表征和分析其RNA和蛋白質(zhì)含量,，以及體外和體內(nèi)追蹤,，以幫助您進一步了解這些迷人的外泌體。超速離心方案可能冗長乏味且耗時的,。您可使用靈活且可擴展的總外泌體分離試劑從細胞培養(yǎng)基或任何體液中即刻分離完整的外泌體,。這些試劑及其隨附的方案是多種試驗的理想選擇，包括處理少量樣本和處理多個樣本,。

外泌體作為細胞間信使較早發(fā)現(xiàn)于體外培養(yǎng)的綿羊紅細胞上清液中,，是直徑為30~150nm，密度為1.10~1.18g/ml的細胞外囊泡,，攜帶豐富的遺傳信息,，參與細胞信號轉(zhuǎn)導、細胞遷移,、瘤子新生血管生長和瘤子微環(huán)境形成等過程,。由于現(xiàn)存的分離技術(shù)是基于外泌體的大小、結(jié)構(gòu)和膜蛋白的親和捕獲,，比較難完全將其與其他囊泡和大分子蛋白質(zhì)復(fù)合體區(qū)分開,，分離出的外泌體蛋白濃度通常會被高估，并且不同亞型外泌體之間可能會有不同蛋白質(zhì)特征,，所以對分離的外泌體進行鑒定對于后期研究至關(guān)重要,。外泌體的提取的方式：密度梯度離心法。

外泌體提取在短時間（一周之內(nèi)）使用,，可以放在4度保存，如果長時間保存可以放在-20度或-80度保存,。也可以將外泌體進行分裝,，分別放在-20度或-80度,。外泌體檢測方法：外泌體分離之后，需要經(jīng)過一系列鑒定才能確定分離的是外泌體,。鑒定方法從物理特征到表面分子標志物,，多角度進行鑒定。l,、透射電鏡鑒定法：簡稱TEM,，適合外泌體雙層囊膜超微結(jié)構(gòu)觀察，即通常為茶托型或一側(cè)凹陷的半球形,。2,、納米顆粒追蹤分析法：簡稱NTA，該方法能保證外泌體原始狀態(tài),、檢測速度快,，檢測后能提供外泌體粒徑和濃度信息。外泌體可以將PD-L1轉(zhuǎn)運至其他PD-L1表達低或沒有PD-L1的細胞,，并可能與PD-1結(jié)合,。安徽外泌體iTRAQ

外泌體可以作為“天然的納米粒子”來進行藥物遞送。上海外泌體lncRNA測序

NTA技術(shù)已被作為外泌體表征手段之一,，相較于其他表征方式NTA技術(shù)的樣本處理更簡單,、更能保證外泌體原始狀態(tài)、檢測速度更快,。大致方法是：將分離的外泌體樣本注入納米顆粒追蹤分析儀,，用激光光束穿過樣本，激光在腔室內(nèi)與顆粒相互作用時會發(fā)生散射,，通過裝有攝像頭的顯微鏡收集散射光,，捕捉外泌體的布朗運動，實現(xiàn)顆?？梢暬?。然后使用Stokes-Einstein方程來測量粒子的平均速度，繼而估算粒子的大小,。NTA能夠測量粒徑10-1000nm之間的顆粒,，包含了外泌體50-150nm的徑粒范圍，但是NTA鑒定需要大于0.5毫升的樣品體積以及優(yōu)化的數(shù)據(jù)收集和分析參數(shù),，另外,，NTA比較難區(qū)分與外泌體具有相似布朗運動的蛋白質(zhì)聚集體，因此無法排除其他物質(zhì)干擾,。上海外泌體lncRNA測序

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