免疫印跡或蛋白質(zhì)印跡是分析外泌體較常用的方法之一,，其原理是外泌體上特異性抗原與抗體結(jié)合。首先對樣品進行處理將囊泡裂解并將蛋白質(zhì)變性,，變性后,，通過SDS-PAGE分離蛋白質(zhì),，然后將其轉(zhuǎn)移到硝酸纖維素膜或聚偏二氟乙烯（PVDF）膜上并暴露于針對目的抗原的抗體中。抗體特異性識別膜表面上的抗原,，然后將膜暴露于第二抗體中,。通過二抗的熒光標簽或與二抗偶聯(lián)的辣根過氧化物酶或堿性磷酸酶基團進行檢測。常用的標記蛋白為CD63,、CD81,、TSG101和ALIX等。但是此方法的特異性和重復(fù)性會受到所用抗體質(zhì)量的限制,。外泌體的直徑比微泡的要小,，后者直徑為100nm-1μm。NTA技術(shù)已被作為外泌體表征手段之一,。尿液提取試劑盒原理

近年來,，外泌體的捕獲技術(shù)越來越多，微流體系也被用于外泌體提取,，此方法能根據(jù)其物理和生化特性同時分離外泌體,。采用這種方法獲得的樣品純度高，且可及時獲取外泌體用于疾病的相關(guān)檢測,。在初次注射時外泌體粘附在微流控設(shè)備的內(nèi)表面,，并在隨后的PBS注射中沖洗掉。此方法采用的設(shè)備復(fù)雜,，所需的樣本量取決于流動通道的長度,。另外，樣品量的注入速率比較低,，因此,，對于大樣品量，將需要較長的處理時間,。外泌體在包括瘤子在內(nèi)的各種疾病的發(fā)病機理中具有重要的功能,。目前，研究人員已經(jīng)開發(fā)了多種方法來分離外泌體,，離心技術(shù)仍然是常用方法,，其他方法，例如過濾,、磁珠分離和色譜法等,，也顯示出獨特的優(yōu)勢，但目前仍然沒有一種公認有效的提取方法,，研究人員應(yīng)針對不同來源的樣本以及不同的下游分析選取較適宜的提取方案,。唾液外泌體提取試劑盒價錢外泌體作為小分子的藥物傳遞載體。

內(nèi)化的外泌體和內(nèi)源性產(chǎn)生的外泌體的細胞旅程：外泌體可以通過不同的機制直接進入細胞,。外泌體由細胞通過內(nèi)吞作用過程從頭生成,。外泌體不斷地被細胞產(chǎn)生和吸收,。它們可能是新生成的外泌體和消耗的外泌體的混合物。目前尚不清楚內(nèi)生性產(chǎn)生或消耗的外泌體是一起釋放還是單獨釋放,。被吸收的外泌體會被溶酶體降解,。進入細胞的外泌體可能進入或與已存在的ESEs融合，隨后解體并將其內(nèi)容物釋放到細胞質(zhì)中,。另外,，內(nèi)泌體可以與質(zhì)膜融合并在細胞外釋放外泌體。

外泌體的提取分離方法：1,、超速離心法（差速離心）：超離法是較常用的外泌體純化手段，采用低速離心,、高速離心交替進行,，可分離到大小相近的囊泡顆粒。超離法因操作簡單,，獲得的囊泡數(shù)量較多而廣受歡迎,，但過程比較費時，且回收率不穩(wěn)定（可能與轉(zhuǎn)子類型有關(guān)）,，純度也受到質(zhì)疑,；此外，重復(fù)離心操作還有可能對囊泡造成損害,，從而降低其質(zhì)量,。2、密度梯度離心：在超速離心力作用下,，使蔗糖溶液形成從低到高連續(xù)分布的密度階層,，是一種區(qū)帶分離法。通過密度梯度離心,，樣品中的外泌體將在1.13-1.19g/ml的密度范圍富集,。此法獲得的外泌體純度較高，但步驟繁瑣,，耗時,。外泌體的提取分離方法：PEG-base沉淀法。

外泌體病毒傳染：外泌體可以限制或促進病毒傳染,。如IFNα或APOBEC3G等外泌體載體可通過限制病毒復(fù)制或增強抗病毒免疫來阻止傳染,。病毒也可以劫持外泌體的生物發(fā)生機制來促進病毒的傳播。外泌體可以作為一個假包膜,，通過四聚體蛋白(CD81,CD9)和PtSer相互作用增強病毒進入受體細胞,，并幫助逃避抗病毒免疫。病毒組分(蛋白質(zhì)和miRNA)的共轉(zhuǎn)運也可能增強傳染性,。外泌體介導(dǎo)的病毒轉(zhuǎn)移可能參與了病毒的遺傳協(xié)同和多重傳染.(CMV,巨細胞病毒,；HSV-1,1型皰疹病毒),。1983年，外泌體初次于綿羊網(wǎng)織紅細胞中被發(fā)現(xiàn),。黑龍江外泌體質(zhì)譜

外泌體是其中一類小囊泡,，直徑為30~150nm，密度1.10~1.18g/ml,。尿液提取試劑盒原理

外泌體的提取主要包括以下幾種方式,。一是超速離心法，這是目前外泌體提取較常用的方法,。此種方法得到的外泌體量多,，但是純度不足，電鏡鑒定時發(fā)現(xiàn)外泌體聚集成塊,，由于微泡和外泌體沒有非常統(tǒng)一的鑒定標準,，也有一些研究認為此種方法得到的是微泡不是外泌體。二是過濾離心,，這種操作簡單,、省時，不影響外泌體的生物活性,，但同樣存在純度不足的問題,。三是密度梯度離心法，用此種方法分離到的外泌體純度高,，但是前期準備工作繁雜,，耗時，量少,。尿液提取試劑盒原理

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