ELISA與WB的原理一樣,，在抗體包被的微孔板中加入待測(cè)樣品、封閉,、一抗孵育,，洗滌后加入酶標(biāo)待測(cè)物形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，徹底洗滌后加顯色劑并用酶標(biāo)儀測(cè)定吸光值,，結(jié)尾用標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算外泌體表達(dá)量,。ELISA能實(shí)現(xiàn)對(duì)外泌體特異性蛋白的定量。其他外泌體鑒定方法還有微流體測(cè)定法和外泌體蛋白質(zhì)組學(xué)分析等,。由于外泌體在各種生命過(guò)程中的重要作用及其作為疾病生物標(biāo)志物和藥物輸送系統(tǒng)的潛力,，人們對(duì)此領(lǐng)域的興趣越來(lái)越高。盡管目前在技術(shù)上取得了長(zhǎng)足的進(jìn)步,，但尚未建立對(duì)外泌體進(jìn)行準(zhǔn)確和標(biāo)準(zhǔn)化鑒定以及定量的方法,，關(guān)于外泌體的量應(yīng)由囊泡顆粒的數(shù)量、囊泡蛋白的量或囊泡數(shù)與蛋白之比來(lái)定義仍存在比較多爭(zhēng)論,。建立外泌體分離,、表征以及效價(jià)測(cè)定的標(biāo)準(zhǔn)化方法將是外泌體作為診斷和診療用途之前需要解決的問(wèn)題。外泌體是分泌的細(xì)胞外囊泡的主要群體,，是具有生物活性的脂雙層囊泡,。exosome

外泌體提取在短時(shí)間（一周之內(nèi)）使用，可以放在4度保存,，如果長(zhǎng)時(shí)間保存可以放在-20度或-80度保存,。也可以將外泌體進(jìn)行分裝，分別放在-20度或-80度,。外泌體檢測(cè)方法：外泌體分離之后,，需要經(jīng)過(guò)一系列鑒定才能確定分離的是外泌體。鑒定方法從物理特征到表面分子標(biāo)志物,，多角度進(jìn)行鑒定,。l、透射電鏡鑒定法：簡(jiǎn)稱TEM,，適合外泌體雙層囊膜超微結(jié)構(gòu)觀察,，即通常為茶托型或一側(cè)凹陷的半球形。2,、納米顆粒追蹤分析法：簡(jiǎn)稱NTA,，該方法能保證外泌體原始狀態(tài)、檢測(cè)速度快,，檢測(cè)后能提供外泌體粒徑和濃度信息,。CD9外泌體慢病毒外泌體膜蛋白可以被蛋白酶剪切,，剪切的碎片可以作為配體與細(xì)胞膜上的受體結(jié)合，從而活躍細(xì)胞內(nèi)的信號(hào)通路,。

外泌體的相關(guān)成分：1,、外泌體的膜同細(xì)胞一樣，是磷脂雙分子層,。2,、外泌體膜含有MHC-1/2蛋白，能綁定特異性的肽鏈,。3,、外泌體膜中有跨膜蛋白PGRL、LAMP1,、LAMP2。4,、外泌體膜中有膜轉(zhuǎn)運(yùn)融合蛋白annexins,、RAN、GTPases,。5,、外泌體膜上有脂質(zhì)筏Chol、ceramide,、SM,、PC，限制膜流動(dòng),，參與包括跨膜信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo),、物質(zhì)內(nèi)吞、脂質(zhì)及蛋白定向分選的多種功能,。6,、外泌體中含有核酸，包括miRNA,、DNA,、lncRNA、mRNA,；同時(shí)還有一些蛋白,、脂類也能被包裹到外泌體中。7,、與外泌體產(chǎn)生相關(guān)的重要分子：Ral,、ARF6、PLD2,、RAB家族,。8,、一些物質(zhì)進(jìn)行外泌體中是特異性的：如hnRNPA2B1能結(jié)合lncRNA或miRNA特異性的序列（GGAG/CCCU），進(jìn)行主動(dòng)包埋,。超速離心是目前分離外泌體的主要技術(shù),。

外泌體是細(xì)胞分泌到胞外的一種囊泡，其大小為30-150nm,，具有雙層膜結(jié)構(gòu)和茶托狀形態(tài),，含有豐富的內(nèi)含物（包括核酸、蛋白和脂質(zhì)等）,，參與細(xì)胞間的分子傳遞,。外泌體普遍存在于細(xì)胞培養(yǎng)上清以及各種體液中，包括血液,、唾液,、尿液、乳汁等,，同時(shí)也存在于組織樣本中,，如腦組織、肌肉組織,、脂肪組織等,。所有的細(xì)胞都能分泌外泌體，但是不同細(xì)胞分泌的外泌體不管在數(shù)量上還是在內(nèi)含物中都具有比較大的差異性,，這也決定了每種外泌體所行使的功能不一樣,。外泌體普遍參與細(xì)胞間物質(zhì)運(yùn)輸與信息傳遞，調(diào)控細(xì)胞生理活動(dòng),。同時(shí),，外泌體具有抗原提呈、免疫逃逸,、誘導(dǎo)正常細(xì)胞轉(zhuǎn)化,、促進(jìn)瘤子發(fā)生和轉(zhuǎn)移等作用；此外,，外泌體還可以作為“天然的納米粒子”來(lái)進(jìn)行藥物遞送,。外泌體的膜蛋白有可能與細(xì)胞膜蛋白作用，活躍細(xì)胞內(nèi)通路,。外泌體的提取的方式：密度梯度離心法,。

外泌體與免疫反應(yīng)、病毒致病性,、妊娠,、心血管疾病、中樞的神經(jīng)系統(tǒng)相關(guān)疾病和病癥進(jìn)展相關(guān)。由外泌體傳遞到受體細(xì)胞的蛋白質(zhì),、代謝物和核酸有效地改變了它們的生物反應(yīng),。這種外泌體介導(dǎo)的反應(yīng)可以促進(jìn)或阻止疾病。外泌體在調(diào)節(jié)復(fù)雜的細(xì)胞內(nèi)通路方面的固有特性使其在許多疾病的診療控制方面具有潛在的用途,，包括神經(jīng)退行性疾病和病癥,。外泌體可被設(shè)計(jì)用于遞送不同的診療有效載荷，包括短干擾rna,、反義寡核苷酸,、化療藥物和免疫調(diào)節(jié)劑，并具有將其遞送到預(yù)期目標(biāo)的能力,。免疫印跡或蛋白質(zhì)印跡是分析外泌體較常用的方法之一,，其原理是外泌體上特異性抗原與抗體結(jié)合。細(xì)胞外泌體lncRNA芯片

需要開(kāi)發(fā)大規(guī)模生產(chǎn)質(zhì)量可控的外泌體并快速純化外泌體的技術(shù)和策略,。exosome

近年來(lái),，外泌體的捕獲技術(shù)越來(lái)越多，微流體系也被用于外泌體提取,，此方法能根據(jù)其物理和生化特性同時(shí)分離外泌體,。采用這種方法獲得的樣品純度高，且可及時(shí)獲取外泌體用于疾病的相關(guān)檢測(cè),。在初次注射時(shí)外泌體粘附在微流控設(shè)備的內(nèi)表面，并在隨后的PBS注射中沖洗掉,。此方法采用的設(shè)備復(fù)雜,，所需的樣本量取決于流動(dòng)通道的長(zhǎng)度,。另外,，樣品量的注入速率比較低,，因此，對(duì)于大樣品量,，將需要較長(zhǎng)的處理時(shí)間。外泌體在包括瘤子在內(nèi)的各種疾病的發(fā)病機(jī)理中具有重要的功能,。目前,，研究人員已開(kāi)發(fā)了多種方法來(lái)分離外泌體，離心技術(shù)仍然是常用方法,，其他方法,，例如過(guò)濾,、磁珠分離和色譜法等，也顯示出獨(dú)特的優(yōu)勢(shì),，但目前仍然沒(méi)有一種公認(rèn)有效的提取方法，研究人員應(yīng)針對(duì)不同來(lái)源的樣本以及不同的下游分析選取較適宜的提取方案,。exosome

上海宇玫博生物科技有限公司是國(guó)內(nèi)一家多年來(lái)專注從事外泌體提取試劑盒,，外泌體,，外泌體檢測(cè),，外泌體提取的老牌企業(yè),。公司位于上海市閔行區(qū)滬青平公路277號(hào)5樓,，成立于2015-10-16,。公司的產(chǎn)品營(yíng)銷網(wǎng)絡(luò)遍布國(guó)內(nèi)各大市場(chǎng),。公司現(xiàn)在主要提供外泌體提取試劑盒，外泌體,，外泌體檢測(cè),，外泌體提取等業(yè)務(wù),，從業(yè)人員均有外泌體提取試劑盒,，外泌體,，外泌體檢測(cè)，外泌體提取行內(nèi)多年經(jīng)驗(yàn)。公司員工技術(shù)嫻熟,、責(zé)任心強(qiáng),。公司秉承客戶是上帝的原則,，急客戶所急,，想客戶所想，熱情服務(wù),。Umibio嚴(yán)格按照行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行生產(chǎn)研發(fā),，產(chǎn)品在按照行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)測(cè)試完成后,，通過(guò)質(zhì)檢部門(mén)檢測(cè)后推出,。我們通過(guò)全新的管理模式和周到的服務(wù),，用心服務(wù)于客戶。上海宇玫博生物科技有限公司以誠(chéng)信為原則,，以安全,、便利為基礎(chǔ)，以優(yōu)惠價(jià)格為外泌體提取試劑盒,，外泌體,，外泌體檢測(cè)，外泌體提取的客戶提供貼心服務(wù),，努力贏得客戶的認(rèn)可和支持,，歡迎新老客戶來(lái)我們公司參觀。