酶聯(lián)免疫吸附測定（ELISA）：將其中一種針對外泌體表面抗原的抗體固定在微孔板的表面上,，將外泌體樣品暴露于含有固定抗體的孔中，由于抗體-抗原相互作用，表達抗原的外泌體將被捕獲固定在板上,。將未捕獲的樣品內(nèi)容物洗掉,，并使用另一種抗體檢測固定的外泌體,。ELISA已用于從尿液,、血漿和血清中分離出外泌體，當使用標準液（已知外泌體的量）創(chuàng)建標準曲線時,，甚至可以進行定量,。但是，此方法需要通過超速離心或超濾對樣品進行預(yù)處理,。同樣,，流場-流分離與紫外線分析儀和光散射檢測器相結(jié)合已被用于分析外泌體的大小和純度,。從研究上來講并不太嚴格區(qū)分外泌體或微泡。干細胞外泌體粒徑檢測

外泌體攜帶大量特異性的蛋白質(zhì)（如細胞因子,、生長因子）以及功能性的mRNAs,、miRNAs等生物活性物質(zhì)，在體內(nèi)參與細胞通訊,、細胞遷移,、促血管新生和抗瘤子免疫等生理過程，與多種疾病的發(fā)生和進程密切相關(guān),。由于外泌體的特殊結(jié)構(gòu)和功能,，使得它具有潛在的應(yīng)用價值，一方面可以作為診斷多種疾病的生物指標,，另一方面也可以作為診療手段,，未來有可能作為藥物的天然載體用于臨床診療。外泌體研究,，應(yīng)選用血漿還是血清？答：血清是血液凝固之后收集的液體,，所以其中少了纖維蛋白原,，凝血因子，以及多了比較多凝血產(chǎn)物,。纖維蛋白原可轉(zhuǎn)化為纖維蛋白,，具有凝血功能。在凝血過程中血小板會分泌大量的外泌體,，有研究發(fā)現(xiàn)血清中有接近50%的外泌體來自額外的分泌,。納米流式 外泌體超速離心法，這是目前外泌體提取較常用的方法,。

酶聯(lián)免疫吸附測定（ELISA）：將其中一種針對外泌體表面抗原的抗體固定在微孔板的表面上,，將外泌體樣品暴露于含有固定抗體的孔中，由于抗體-抗原相互作用,，表達抗原的外泌體將被捕獲固定在板上,。將未捕獲的樣品內(nèi)容物洗掉，并使用另一種抗體檢測固定的外泌體,。ELISA已用于從尿液,、血漿和血清中分離出外泌體，當使用標準液（已知外泌體的量）創(chuàng)建標準曲線時,，甚至可以進行定量,。但是，此方法需要通過超速離心或超濾對樣品進行預(yù)處理,。同樣,，流場-流分離與紫外線分析儀和光散射檢測器相結(jié)合已被用于分析外泌體的大小和純度。外泌體屬于胞外囊泡類，除了外泌體之外細胞還分泌微泡以及其它的膜囊泡,。

外泌體的生物發(fā)生和鑒定,。液體和細胞外成分，如蛋白質(zhì),、脂類,、代謝物、小分子和離子,，可以通過內(nèi)吞作用和質(zhì)膜內(nèi)陷,，與細胞表面蛋白一起進入細胞。由此產(chǎn)生的胞腔側(cè)質(zhì)膜芽的形成表現(xiàn)為質(zhì)膜的外-內(nèi)取向,。這一出芽過程導(dǎo)致芽的形成可能與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)(ER),、跨高爾基網(wǎng)絡(luò)(TGN)和線粒體預(yù)先形成的早期核內(nèi)體融合。ESEs也可以與ER和TGN融合,，這可能解釋了內(nèi)吞物如何到達它們的,。因此，一些ESEs可以包含膜和腔的成分,，可以表示不同的起源,。外泌體表面蛋白包括四聚體蛋白、整合蛋白,、免疫調(diào)節(jié)蛋白等,。外泌體可以包含不同類型的細胞表面蛋白、細胞內(nèi)蛋白,、RNA,、DNA、氨基酸和代謝物,。外泌體的存在：外泌體幾乎存在于所有的組織,、細胞間隙、體液中,。

外泌體生物學(xué)功能：1,、在心血管系統(tǒng)中，據(jù)報道,，源自人胚胎干細胞（ESC）的間充質(zhì)干細胞（MSC）外泌體可減少小鼠和豬模型中的心肌缺血和再灌注損傷,；2、在免疫系統(tǒng)中,，據(jù)報道趨化因子受體CCR5通過外泌體在細胞之間轉(zhuǎn)移是細胞人類免疫缺陷病毒傳染的一種機制,；3、在中樞的神經(jīng)系統(tǒng)（CNS）中,，外泌體的作用是消除廢物并介導(dǎo)大腦活動,，從而阻止神經(jīng)退行性疾病的發(fā)病機理,；迄今為止，尚未完全發(fā)現(xiàn)調(diào)節(jié)外泌體-細胞結(jié)合的途徑,。然而,，比較明顯，其結(jié)合過程從外泌體識別受體細胞PM上的特定受體開始,。膜受體的識別是外泌體細胞反應(yīng)的基礎(chǔ),，它可能活躍受體并隨后導(dǎo)致相關(guān)信號通路的活躍，外泌體與PM融合或外泌體的內(nèi)吞作用,，從而導(dǎo)致蛋白質(zhì)和RNA直接釋放到受體細胞中,。外泌體是其中一類小囊泡，直徑為30~150nm,，密度1.10~1.18g/ml,。湖南CD63外泌體慢病毒包裝

外泌體膜中有膜轉(zhuǎn)運融合蛋白annexins、RAN,、GTPases,。干細胞外泌體粒徑檢測

人體內(nèi)多種細胞及體液均可分泌外泌體，包括內(nèi)皮細胞,、免疫細胞,、血小板、平滑肌細胞等,。當其由宿主細胞被分泌到受體細胞中時，外泌體可通過其攜帶的蛋白質(zhì),、核酸,、脂類等來調(diào)節(jié)受體細胞的生物學(xué)活性。外泌體介導(dǎo)的細胞間通訊主要通過以下三種方式：一是外泌體膜蛋白可以與靶細胞膜蛋白結(jié)合,，進而活躍靶細胞細胞內(nèi)的信號通路,。二是在細胞外基質(zhì)中，外泌體膜蛋白可以被蛋白酶剪切,，剪切的碎片可以作為配體與細胞膜上的受體結(jié)合,，從而活躍細胞內(nèi)的信號通路。有報道稱一些外泌體膜上蛋白在其來源細胞膜上未能檢測出,。三是外泌體膜可以與靶細胞膜直接融合,，非選擇性的釋放其所含的蛋白質(zhì)、mRNA以及microRNA,。干細胞外泌體粒徑檢測

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