酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定（ELISA）：將其中一種針對(duì)外泌體表面抗原的抗體固定在微孔板的表面上,，將外泌體樣品暴露于含有固定抗體的孔中,，由于抗體-抗原相互作用,，表達(dá)抗原的外泌體將被捕獲固定在板上。將未捕獲的樣品內(nèi)容物洗掉,，并使用另一種抗體檢測(cè)固定的外泌體,。ELISA已用于從尿液、血漿和血清中分離出外泌體,，當(dāng)使用標(biāo)準(zhǔn)液（已知外泌體的量）創(chuàng)建標(biāo)準(zhǔn)曲線時(shí),，甚至可以進(jìn)行定量。但是,，此方法需要通過(guò)超速離心或超濾對(duì)樣品進(jìn)行預(yù)處理,。同樣，流場(chǎng)-流分離與紫外線分析儀和光散射檢測(cè)器相結(jié)合已被用于分析外泌體的大小和純度,。從研究上來(lái)講并不太嚴(yán)格區(qū)分外泌體或微泡。干細(xì)胞外泌體粒徑檢測(cè)

外泌體攜帶大量特異性的蛋白質(zhì)（如細(xì)胞因子,、生長(zhǎng)因子）以及功能性的mRNAs,、miRNAs等生物活性物質(zhì)，在體內(nèi)參與細(xì)胞通訊,、細(xì)胞遷移,、促血管新生和抗瘤子免疫等生理過(guò)程，與多種疾病的發(fā)生和進(jìn)程密切相關(guān),。由于外泌體的特殊結(jié)構(gòu)和功能,，使得它具有潛在的應(yīng)用價(jià)值，一方面可以作為診斷多種疾病的生物指標(biāo),，另一方面也可以作為診療手段,，未來(lái)有可能作為藥物的天然載體用于臨床診療。外泌體研究,，應(yīng)選用血漿還是血清,？答：血清是血液凝固之后收集的液體，所以其中少了纖維蛋白原,，凝血因子,，以及多了比較多凝血產(chǎn)物。纖維蛋白原可轉(zhuǎn)化為纖維蛋白,，具有凝血功能,。在凝血過(guò)程中血小板會(huì)分泌大量的外泌體，有研究發(fā)現(xiàn)血清中有接近50%的外泌體來(lái)自額外的分泌,。納米流式 外泌體超速離心法,，這是目前外泌體提取較常用的方法。

酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定（ELISA）：將其中一種針對(duì)外泌體表面抗原的抗體固定在微孔板的表面上,，將外泌體樣品暴露于含有固定抗體的孔中,，由于抗體-抗原相互作用,，表達(dá)抗原的外泌體將被捕獲固定在板上。將未捕獲的樣品內(nèi)容物洗掉,，并使用另一種抗體檢測(cè)固定的外泌體,。ELISA已用于從尿液、血漿和血清中分離出外泌體,，當(dāng)使用標(biāo)準(zhǔn)液（已知外泌體的量）創(chuàng)建標(biāo)準(zhǔn)曲線時(shí),，甚至可以進(jìn)行定量。但是,，此方法需要通過(guò)超速離心或超濾對(duì)樣品進(jìn)行預(yù)處理,。同樣，流場(chǎng)-流分離與紫外線分析儀和光散射檢測(cè)器相結(jié)合已被用于分析外泌體的大小和純度,。外泌體屬于胞外囊泡類,，除了外泌體之外細(xì)胞還分泌微泡以及其它的膜囊泡。

外泌體的生物發(fā)生和鑒定,。液體和細(xì)胞外成分,，如蛋白質(zhì)、脂類,、代謝物,、小分子和離子，可以通過(guò)內(nèi)吞作用和質(zhì)膜內(nèi)陷,，與細(xì)胞表面蛋白一起進(jìn)入細(xì)胞,。由此產(chǎn)生的胞腔側(cè)質(zhì)膜芽的形成表現(xiàn)為質(zhì)膜的外-內(nèi)取向。這一出芽過(guò)程導(dǎo)致芽的形成可能與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)(ER),、跨高爾基網(wǎng)絡(luò)(TGN)和線粒體預(yù)先形成的早期核內(nèi)體融合,。ESEs也可以與ER和TGN融合，這可能解釋了內(nèi)吞物如何到達(dá)它們的,。因此,，一些ESEs可以包含膜和腔的成分，可以表示不同的起源,。外泌體表面蛋白包括四聚體蛋白,、整合蛋白、免疫調(diào)節(jié)蛋白等,。外泌體可以包含不同類型的細(xì)胞表面蛋白,、細(xì)胞內(nèi)蛋白、RNA,、DNA,、氨基酸和代謝物。外泌體的存在：外泌體幾乎存在于所有的組織,、細(xì)胞間隙,、體液中,。

外泌體生物學(xué)功能：1、在心血管系統(tǒng)中,，據(jù)報(bào)道,，源自人胚胎干細(xì)胞（ESC）的間充質(zhì)干細(xì)胞（MSC）外泌體可減少小鼠和豬模型中的心肌缺血和再灌注損傷；2,、在免疫系統(tǒng)中,，據(jù)報(bào)道趨化因子受體CCR5通過(guò)外泌體在細(xì)胞之間轉(zhuǎn)移是細(xì)胞人類免疫缺陷病毒傳染的一種機(jī)制；3,、在中樞的神經(jīng)系統(tǒng)（CNS）中,，外泌體的作用是消除廢物并介導(dǎo)大腦活動(dòng)，從而阻止神經(jīng)退行性疾病的發(fā)病機(jī)理,；迄今為止,，尚未完全發(fā)現(xiàn)調(diào)節(jié)外泌體-細(xì)胞結(jié)合的途徑。然而,，比較明顯,，其結(jié)合過(guò)程從外泌體識(shí)別受體細(xì)胞PM上的特定受體開(kāi)始。膜受體的識(shí)別是外泌體細(xì)胞反應(yīng)的基礎(chǔ),，它可能活躍受體并隨后導(dǎo)致相關(guān)信號(hào)通路的活躍，外泌體與PM融合或外泌體的內(nèi)吞作用,，從而導(dǎo)致蛋白質(zhì)和RNA直接釋放到受體細(xì)胞中,。外泌體是其中一類小囊泡，直徑為30~150nm,，密度1.10~1.18g/ml,。湖南CD63外泌體慢病毒包裝

外泌體膜中有膜轉(zhuǎn)運(yùn)融合蛋白annexins、RAN,、GTPases,。干細(xì)胞外泌體粒徑檢測(cè)

人體內(nèi)多種細(xì)胞及體液均可分泌外泌體，包括內(nèi)皮細(xì)胞,、免疫細(xì)胞,、血小板、平滑肌細(xì)胞等,。當(dāng)其由宿主細(xì)胞被分泌到受體細(xì)胞中時(shí),，外泌體可通過(guò)其攜帶的蛋白質(zhì)、核酸,、脂類等來(lái)調(diào)節(jié)受體細(xì)胞的生物學(xué)活性,。外泌體介導(dǎo)的細(xì)胞間通訊主要通過(guò)以下三種方式：一是外泌體膜蛋白可以與靶細(xì)胞膜蛋白結(jié)合，進(jìn)而活躍靶細(xì)胞細(xì)胞內(nèi)的信號(hào)通路,。二是在細(xì)胞外基質(zhì)中,，外泌體膜蛋白可以被蛋白酶剪切,，剪切的碎片可以作為配體與細(xì)胞膜上的受體結(jié)合，從而活躍細(xì)胞內(nèi)的信號(hào)通路,。有報(bào)道稱一些外泌體膜上蛋白在其來(lái)源細(xì)胞膜上未能檢測(cè)出,。三是外泌體膜可以與靶細(xì)胞膜直接融合，非選擇性的釋放其所含的蛋白質(zhì),、mRNA以及microRNA,。干細(xì)胞外泌體粒徑檢測(cè)

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