酶聯(lián)免疫吸附測定（ELISA）：將其中一種針對外泌體表面抗原的抗體固定在微孔板的表面上,，將外泌體樣品暴露于含有固定抗體的孔中,，由于抗體-抗原相互作用，表達(dá)抗原的外泌體將被捕獲固定在板上,。將未捕獲的樣品內(nèi)容物洗掉,，并使用另一種抗體檢測固定的外泌體。ELISA已用于從尿液,、血漿和血清中分離出外泌體,，當(dāng)使用標(biāo)準(zhǔn)液（已知外泌體的量）創(chuàng)建標(biāo)準(zhǔn)曲線時，甚至可以進(jìn)行定量,。但是,，此方法需要通過超速離心或超濾對樣品進(jìn)行預(yù)處理。同樣,，流場-流分離與紫外線分析儀和光散射檢測器相結(jié)合已被用于分析外泌體的大小和純度,。外泌體屬于胞外囊泡類，除了外泌體之外細(xì)胞還分泌微泡以及其它的膜囊泡,。外泌體的數(shù)量：人體中大約有1014個，近乎于平均每個細(xì)胞產(chǎn)生1000-10000個,。福建CD81外泌體慢病毒包裝

為什么超速離心提取外泌體看不到沉淀,？答：這種問題通常有三種可能性，其一：使用的細(xì)胞上清或者血清量太低,，從而造成了這樣的結(jié)果,。其二：使用了不透明的超速離心管，一般來說外泌體產(chǎn)量都比較小,，所以凡是不透明的管子,，基本都是比較難見到明顯沉淀的，可以當(dāng)做有沉淀,，然后操作下去即可,。其三：使用了角轉(zhuǎn)。部分品牌離心機(jī)的角轉(zhuǎn)管壁粘附性比較低,，超離結(jié)束沒多久沉淀就會滑落下去,，所以請在離心結(jié)束時趕緊去收樣。外泌體的角色：1、外泌體發(fā)揮功能并一定需要受體細(xì)胞攝入外泌體：外泌體的膜蛋白有可能與細(xì)胞膜蛋白作用,，活躍細(xì)胞內(nèi)通路,。2、外泌體的角色之一：細(xì)胞-細(xì)胞通訊,，比如抗原遞呈,。外泌體鑒定nta技術(shù)外泌體屬于胞外囊泡類，除了外泌體之外細(xì)胞還分泌微泡以及其它的膜囊泡,。

外泌體較有用的特性之一是它們穿過屏障（如細(xì)胞質(zhì)膜和血/腦屏障）的能力,。這使它們成為理想的診療傳遞分子。外泌體由于其天然的材料運(yùn)輸特性,，固有的長期循環(huán)能力和出色的生物相容性而具有比較大的潛力成為藥物遞送載體,，其適合于遞送各種化學(xué)物質(zhì)，蛋白質(zhì),，核酸和基因診療劑,。（1）外泌體作為小分子的藥物傳遞載體：關(guān)于外泌體遞送姜黃素，多巴胺,，PTX和DOX等化學(xué)診療藥物的報道已有充分文獻(xiàn)記載,。（2）外泌體作為蛋白質(zhì)的藥物遞送載體：已經(jīng)發(fā)現(xiàn)外泌體可遞送多種蛋白質(zhì)，例如酶,，細(xì)胞骨架蛋白質(zhì)和跨膜蛋白質(zhì),。（3）外泌體作為核酸的藥物遞送載體：研究表明，外泌體天然的可以攜帶遺傳（例如miRNA,，siRNA）到靶細(xì)胞中,，從而在生物學(xué)和致病過程中誘導(dǎo)遺傳修飾。外泌體的這些特征已成為涉及遺傳療法和使用外泌體進(jìn)行研究的主要策略,。

細(xì)胞攝取診療性外泌體：從樹突狀細(xì)胞,、成纖維細(xì)胞和間充質(zhì)細(xì)胞中分離出的診療性外泌體可對靶細(xì)胞產(chǎn)生特定的作用，包括新抗原呈遞,、免疫調(diào)節(jié)和藥物有效載荷傳遞,。診療性外泌體對靶細(xì)胞的影響可能是通過不同的進(jìn)入或相互作用機(jī)制來控制的。完整的外泌體的進(jìn)入可能包括受體介導(dǎo)的內(nèi)吞作用,、網(wǎng)格蛋白包被小凹,、脂筏、吞噬作用,、小凹和大胞飲作用,。外泌體內(nèi)容物的進(jìn)入或外泌體信號的誘導(dǎo)可能涉及配體受體誘導(dǎo)的細(xì)胞內(nèi)信號或融合，從而將外泌體內(nèi)容物沉積到細(xì)胞質(zhì)中,。近年來,，隨著外泌體研究的不斷深入,，它的應(yīng)用已經(jīng)涉及醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)和免疫領(lǐng)域、寄生蟲領(lǐng)域,。外泌體提取在短時間（一周之內(nèi)）使用,，可以放在4度保存，如果長時間保存可以放在-20度或-80度保存,。

外泌體的提取主要包括以下幾種方式：1,、免疫磁珠法，這種方法可以保證外泌體形態(tài)的完整,，特異性高,、操作簡單、不需要昂貴的儀器設(shè)備,，但是非中性pH和非生理性鹽濃度會影響外泌體生物活性,，不便進(jìn)行下一步的實驗。2,、PS親和法,，該方法將PS（磷脂酰絲氨酸）與磁珠結(jié)合，利用親和原理捕獲外泌體囊泡外的PS,。該方法與免疫磁珠法相似,，獲得的外泌體形態(tài)完整，純度較高,。由于不使用變性劑,，不影響外泌體的生物活性，外泌體可用于細(xì)胞共培養(yǎng)和體內(nèi)注射,。3,、色譜法，這種方法分離到的外泌體在電鏡下大小均一,，但是需要特殊的設(shè)備,，應(yīng)用不普遍。外泌體內(nèi)容物的進(jìn)入或外泌體信號的誘導(dǎo)可能涉及配體受體誘導(dǎo)的細(xì)胞內(nèi)信號或融合,。外泌體打了3次還是會長痘

外泌體的作用是消除廢物并介導(dǎo)大腦活動，從而阻止神經(jīng)退行性疾病的發(fā)病機(jī)理,。福建CD81外泌體慢病毒包裝

外泌體生物學(xué)功能：1,、在心血管系統(tǒng)中，據(jù)報道,，源自人胚胎干細(xì)胞（ESC）的間充質(zhì)干細(xì)胞（MSC）外泌體可減少小鼠和豬模型中的心肌缺血和再灌注損傷,；2、在免疫系統(tǒng)中,，據(jù)報道趨化因子受體CCR5通過外泌體在細(xì)胞之間轉(zhuǎn)移是細(xì)胞人類免疫缺陷病毒傳染的一種機(jī)制,；3、在中樞的神經(jīng)系統(tǒng)中，外泌體的作用是消除廢物并介導(dǎo)大腦活動,，從而阻止神經(jīng)退行性疾病的發(fā)病機(jī)理,；迄今為止，尚未完全發(fā)現(xiàn)調(diào)節(jié)外泌體-細(xì)胞結(jié)合的途徑,。然而,，比較明顯，其結(jié)合過程從外泌體識別受體細(xì)胞PM上的特定受體開始,。膜受體的識別是外泌體細(xì)胞反應(yīng)的基礎(chǔ),，它可能活躍受體并隨后導(dǎo)致相關(guān)信號通路的活躍，外泌體與PM融合或外泌體的內(nèi)吞作用,，從而導(dǎo)致蛋白質(zhì)和RNA直接釋放到受體細(xì)胞中,。福建CD81外泌體慢病毒包裝

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