NTA技術(shù)已被作為外泌體表征手段之一，相較于其他表征方式NTA技術(shù)的樣本處理更簡單,、更能保證外泌體原始狀態(tài),、檢測速度更快,。大致方法是：將分離的外泌體樣本注入納米顆粒追蹤分析儀，用激光光束穿過樣本,，激光在腔室內(nèi)與顆粒相互作用時(shí)會發(fā)生散射,，通過裝有攝像頭的顯微鏡收集散射光，捕捉外泌體的布朗運(yùn)動,，實(shí)現(xiàn)顆?？梢暬Ｈ缓笫褂肧tokes-Einstein方程來測量粒子的平均速度,，繼而估算粒子的大小,。NTA能夠測量粒徑10-1000nm之間的顆粒，包含了外泌體50-150nm的徑粒范圍,，但是NTA鑒定需要大于0.5毫升的樣品體積以及優(yōu)化的數(shù)據(jù)收集和分析參數(shù),，另外，NTA比較難區(qū)分與外泌體具有相似布朗運(yùn)動的蛋白質(zhì)聚集體,，因此無法排除其他物質(zhì)的干擾,。外泌體作為小分子的藥物傳遞載體,。外泌體是什么原理

外泌體的臨床應(yīng)用：間充質(zhì)干細(xì)胞是目前較普遍使用的細(xì)胞類型，它具有自我更新,，多向分化,、分泌細(xì)胞因子和細(xì)胞外囊泡體、免疫調(diào)節(jié),、來源普遍等特點(diǎn)，在臨床診療中取得了良好的成果,。間充質(zhì)干細(xì)胞來源外泌體與間充質(zhì)干細(xì)胞有著相似的功能,，包括修復(fù)與再生組織、阻止炎癥反應(yīng)及調(diào)節(jié)機(jī)體免疫,，但外泌體相對于間充質(zhì)干細(xì)胞又有許多優(yōu)勢,。首先，間充質(zhì)干細(xì)胞來源外泌體更穩(wěn)定,，更好保存,，易于管理和控制，可以人為改變其內(nèi)容物的種類和數(shù)量,。其次,，它們沒有活細(xì)胞，不會像間充質(zhì)干細(xì)胞那樣可能會過多增殖而放大療效或者病變導(dǎo)致疾病加重,；另外,，它有可能避免某些針對間充質(zhì)干細(xì)胞的調(diào)控問題，間充質(zhì)干細(xì)胞來源外泌體有代替間充質(zhì)干細(xì)胞的趨勢,。干細(xì)胞外泌體攝取流式細(xì)胞技術(shù)是細(xì)胞和小顆粒定性和定量表征的有效方法,，其用于外泌體定量檢測的準(zhǔn)確性也在不斷上升。國內(nèi)有證的外泌體品牌外泌體作為一個(gè)新型的研究熱點(diǎn),，由于它在體內(nèi)存在的普遍性和獲取的便捷性,。

外泌體的提取、純化和鑒定：每一個(gè)外泌體研究者較初都要為外泌體的分離提取而煩惱,。選擇的分離方式是利用超速離心的方式分離外泌體,，并且可以選用梯度密度離心法得到純度更高的外泌體。另外利用外泌體自身的物理化學(xué)性質(zhì)所研發(fā)的各種市售的外泌體分離提取試劑盒也能達(dá)到分離效果,。提取的外泌體的鑒定方式主要是通過形態(tài)學(xué)（電子顯微鏡技術(shù)）,、粒子大小以及標(biāo)志蛋白等方式實(shí)現(xiàn)的。近來的研究發(fā)現(xiàn)外泌體在比較多生理病理上起著重要的作用,，如免疫中抗原呈遞,、瘤子的生長與遷移、組織損傷的修復(fù)等,。不同細(xì)胞分泌的外泌體具有不用的組成成分和功能,，可作為疾病診斷的生物標(biāo)志物,。外泌體具有脂質(zhì)雙層膜結(jié)構(gòu)，能比較好的保護(hù)其包被的物質(zhì),，且能靶向特定細(xì)胞或組織,，因此是一種比較好靶向給藥系統(tǒng)。

外泌體（Exosomes）是細(xì)胞分泌到胞外的一種囊泡（ExtracellularVesicles,，EVs）,，其大小為30-150nm，具有雙層膜結(jié)構(gòu)和茶托狀形態(tài),，含有豐富的內(nèi)含物（包括核酸,、蛋白和脂質(zhì)等），參與細(xì)胞間的分子傳遞,。外泌體普遍存在于細(xì)胞培養(yǎng)上清以及各種體液中,，包括血液、唾液,、尿液,、乳汁等，同時(shí)也存在于組織樣本中,，如腦組織,、肌肉組織、脂肪組織等,。腦組織分離方法簡述：將腦組織剪成薄片,，放入離心管中加上消化液進(jìn)行消化，經(jīng)水浴,、反復(fù)輕輕上下顛倒,，再用移液間斷緩慢吹吸至消化結(jié)束。隨后加入培養(yǎng)基于消化液中,，混勻,，置于冰上。再進(jìn)行一系列的差速超速離心過程,，包括除雜,、濾膜過濾、超離等,。結(jié)尾用PBS重懸外泌體,，用重懸后的外泌體進(jìn)行下面的透射電鏡（TEM）、納米粒徑追蹤分子（NTA）和markerWB鑒定,。外泌體產(chǎn)生相關(guān)的重要分子：Ral,、ARF6、PLD2,、RAB家族,。

根據(jù)內(nèi)侵量的不同,，可以產(chǎn)生不同尺寸、不同含量的ILV,。LSEs產(chǎn)生的MVBs具有確定的ILV聚集(未來的外泌體),。MVBs可以與自噬體融合，較終其內(nèi)容物在溶酶體中降解,。降解產(chǎn)物可被細(xì)胞回收利用,。MVBs也可以直接與溶酶體融合降解。不遵循這一軌跡的MVBs可通過細(xì)胞骨架和微管網(wǎng)絡(luò)轉(zhuǎn)運(yùn)至質(zhì)膜,，借助mvb-?？康鞍淄？吭谫|(zhì)膜的腔側(cè),。隨后胞吐導(dǎo)致具有與質(zhì)膜相似的脂質(zhì)雙分子層方向的外泌體的釋放。有幾種蛋白參與了外泌體的生物發(fā)生,，包括RabGTPases,、ESCRT蛋白，以及其他也被用作外泌體標(biāo)記的蛋白(CD9,、CD81,、CD63、flotillin,、TSG101,、神經(jīng)酰胺和Alix)。外泌體的提取的方式：密度梯度離心法,。吉林外泌體脂質(zhì)組學(xué)

干細(xì)胞外泌體攝取流式細(xì)胞技術(shù)是細(xì)胞和小顆粒定性和定量表征的有效方法,。外泌體是什么原理

外泌體的脂質(zhì)和蛋白質(zhì)組成可以影響它們的藥代動力學(xué)特性，它們的天然成分可能在提高生物利用度和減少不良反應(yīng)方面發(fā)揮作用,。除了它們的診療潛力,，外泌體也有幫助疾病診斷的潛力。它們已經(jīng)在所有的生物液體中被報(bào)道,，并且通過生物液體取樣(液體活組織檢查)可以比較容易地獲得外泌體的復(fù)雜貨物的組成,。基于外泌體的液體活檢在病癥和其他疾病的診斷和確定預(yù)后方面具有潛在的應(yīng)用價(jià)值,。疾病的進(jìn)展和對診療的反應(yīng)也可以通過外泌體的多組分分析來確定,。外泌體是什么原理

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