眾所周知外泌體是供體細(xì)胞分泌出來的胞外囊泡,，被受體細(xì)胞吸收后起到調(diào)控受體細(xì)胞功能,，這篇綜述文章主要討論了外泌體的生成,、生化性質(zhì)以及作為藥物遞送載體的潛力。外泌體在比較多生理病理上起著重要的作用,，如免疫中抗原呈遞,、肉瘤的生長與遷移、組織損傷的修復(fù)等,。不同細(xì)胞分泌的外泌體具有不同的組成成分和功能,，可作為疾病診斷的生物標(biāo)志物。外泌體具有脂質(zhì)雙層膜結(jié)構(gòu),，能比較好的保護(hù)其包被的物質(zhì),，且能靶向特定細(xì)胞或組織，因此是一種比較好靶向給藥系統(tǒng),。一個(gè)推測的作用是外泌體可能從細(xì)胞中去除多余和/或不必要的成分以維持細(xì)胞內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定,。外泌體形成

外泌體生物學(xué)功能：1、在心血管系統(tǒng)中,，據(jù)報(bào)道,，源自人胚胎干細(xì)胞（ESC）的間充質(zhì)干細(xì)胞（MSC）外泌體可減少小鼠和豬模型中的心肌缺血和再灌注損傷；2,、在免疫系統(tǒng)中,，據(jù)報(bào)道趨化因子受體CCR5通過外泌體在細(xì)胞之間轉(zhuǎn)移是細(xì)胞人類免疫缺陷病毒傳染的一種機(jī)制；3、在中樞的神經(jīng)系統(tǒng)（CNS）中,，外泌體的作用是消除廢物并介導(dǎo)大腦活動,，從而阻止神經(jīng)退行性疾病的發(fā)病機(jī)理；迄今為止,，尚未完全發(fā)現(xiàn)調(diào)節(jié)外泌體-細(xì)胞結(jié)合的途徑,。然而，比較明顯,，其結(jié)合過程從外泌體識別受體細(xì)胞PM上的特定受體開始,。膜受體的識別是外泌體細(xì)胞反應(yīng)的基礎(chǔ)，它可能活躍受體并隨后導(dǎo)致相關(guān)信號通路的活躍,，外泌體與PM融合或外泌體的內(nèi)吞作用,，從而導(dǎo)致蛋白質(zhì)和RNA直接釋放到受體細(xì)胞中。從研究上來講并不太嚴(yán)格區(qū)分外泌體或微泡,。遼寧外泌體Dir外泌體功能在研究初期階段發(fā)現(xiàn)是參與細(xì)胞成熟過程中去除不必要的蛋白質(zhì),。

酶聯(lián)免疫吸附測定（ELISA）：將其中一種針對外泌體表面抗原的抗體固定在微孔板的表面上，將外泌體樣品暴露于含有固定抗體的孔中,，由于抗體-抗原相互作用,，表達(dá)抗原的外泌體將被捕獲固定在板上。將未捕獲的樣品內(nèi)容物洗掉,，并使用另一種抗體檢測固定的外泌體,。ELISA已用于從尿液、血漿和血清中分離出外泌體,，當(dāng)使用標(biāo)準(zhǔn)液（已知外泌體的量）創(chuàng)建標(biāo)準(zhǔn)曲線時(shí),，甚至可以進(jìn)行定量。但是,，此方法需要通過超速離心或超濾對樣品進(jìn)行預(yù)處理,。同樣，流場-流分離與紫外線分析儀和光散射檢測器相結(jié)合已被用于分析外泌體的大小和純度,。外泌體屬于胞外囊泡類,，除了外泌體之外細(xì)胞還分泌微泡以及其它的膜囊泡。

AFC自動收集器是將qEV分離法這一過程自動化的儀器,，將用來收集外泌體樣本的微量離心管放置在AFC的中間轉(zhuǎn)盤內(nèi),，根據(jù)稱重精確測量流體體積，可精確的測量到樣品中每一個(gè)液滴的重量并精確測量總重量,。將在空隙體積之前從qEV柱洗脫的流體收集到AFC轉(zhuǎn)盤的單獨(dú)中心孔中并送至廢液桶,，避免將不需要的空隙部分收集到微量離心管中。在提取期間,，當(dāng)達(dá)到設(shè)定的提取體積后，轉(zhuǎn)盤會自動旋轉(zhuǎn)到下一個(gè)微量離心管繼續(xù)收集，到收集完成后自動停止,。微滴式數(shù)字PCR技術(shù)不佳有效提高了核酸分子的擴(kuò)增效率,，而且由于采用微滴計(jì)數(shù)的方法進(jìn)行定量，可以不依賴與RT-PCR的熒光信號和Ct值,，對所測樣品中的核酸分子進(jìn)行一定定量,。從研究上來講并不太嚴(yán)格區(qū)分外泌體或微泡。外泌體作為小分子的藥物傳遞載體,。

近年來,，外泌體的捕獲技術(shù)越來越多，微流體系也被用于外泌體提取,，此方法能根據(jù)其物理和生化特性同時(shí)分離外泌體,。采用這種方法獲得的樣品純度高，且可及時(shí)獲取外泌體用于疾病的相關(guān)檢測,。在初次注射時(shí)外泌體粘附在微流控設(shè)備的內(nèi)表面,，并在隨后的PBS注射中沖洗掉。此方法采用的設(shè)備復(fù)雜,，所需的樣本量取決于流動通道的長度,。另外，樣品量的注入速率比較低,，因此,，對于大樣品量，將需要較長的處理時(shí)間,。外泌體在包括瘤子在內(nèi)的各種疾病的發(fā)病機(jī)理中具有重要的功能,。目前，研究人員已開發(fā)了多種方法來分離外泌體,，離心技術(shù)仍然是常用方法,，其他方法，例如過濾,、磁珠分離和色譜法等,，也顯示出獨(dú)特的優(yōu)勢，但目前仍然沒有一種公認(rèn)有效的提取方法,，研究人員應(yīng)針對不同來源的樣本以及不同的下游分析選取較適宜的提取方案,。近年來，隨著外泌體研究的不斷深入,，它的應(yīng)用已經(jīng)涉及醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)和免疫領(lǐng)域,、寄生蟲領(lǐng)域。外泌體蛋白質(zhì)提取

外泌體產(chǎn)生相關(guān)的重要分子：Ral,、ARF6,、PLD2,、RAB家族。外泌體形成

外泌體生物學(xué)功能：1,、在心血管系統(tǒng)中,，據(jù)報(bào)道，源自人胚胎干細(xì)胞（ESC）的間充質(zhì)干細(xì)胞（MSC）外泌體可減少小鼠和豬模型中的心肌缺血和再灌注損傷,；2,、在免疫系統(tǒng)中，據(jù)報(bào)道趨化因子受體CCR5通過外泌體在細(xì)胞之間轉(zhuǎn)移是細(xì)胞人類免疫缺陷病毒傳染的一種機(jī)制,；3,、在中樞的神經(jīng)系統(tǒng)中，外泌體的作用是消除廢物并介導(dǎo)大腦活動,，從而阻止神經(jīng)退行性疾病的發(fā)病機(jī)理,；迄今為止，尚未完全發(fā)現(xiàn)調(diào)節(jié)外泌體-細(xì)胞結(jié)合的途徑,。然而,，比較明顯，其結(jié)合過程從外泌體識別受體細(xì)胞PM上的特定受體開始,。膜受體的識別是外泌體細(xì)胞反應(yīng)的基礎(chǔ),，它可能活躍受體并隨后導(dǎo)致相關(guān)信號通路的活躍，外泌體與PM融合或外泌體的內(nèi)吞作用,，從而導(dǎo)致蛋白質(zhì)和RNA直接釋放到受體細(xì)胞中,。外泌體形成

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