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來源: 發(fā)布時間:2023-04-14

外泌體的基本信息:1,、外泌體的大?。和饷隗w的直徑約40-150nm,。2,、從研究上來講并不太嚴(yán)格區(qū)分外泌體或微泡,。3,、外泌體屬于胞外囊泡類,,除了外泌體之外細(xì)胞還分泌微泡以及其它的膜囊泡,。4、外泌體的直接比微泡的要小,,后者直徑為100nm-1μm,。5、外泌體的數(shù)量:人體中大約有1014個,,近乎于平均每個細(xì)胞產(chǎn)生1000-10000個,。6、外泌體的細(xì)胞源:人體中幾乎所有類型的細(xì)胞均能產(chǎn)生外泌體,。7,、外泌體具有異質(zhì)性,即使是同一種細(xì)胞分泌的外泌體都有可能具有比較大功能區(qū)別,。8,、外泌體的存在:外泌體幾乎存在于所有的組織,、細(xì)胞間隙、體液中,。9,、外泌體產(chǎn)生于細(xì)胞中的多泡體。外泌體可以作為“天然的納米粒子”來進(jìn)行藥物遞送,。羊奶提取試劑盒報(bào)價

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人體內(nèi)多種細(xì)胞及體液均可分泌外泌體,,包括內(nèi)皮細(xì)胞、免疫細(xì)胞,、血小板,、平滑肌細(xì)胞等。當(dāng)其由宿主細(xì)胞被分泌到受體細(xì)胞中時,,外泌體可通過其攜帶的蛋白質(zhì),、核酸、脂類等來調(diào)節(jié)受體細(xì)胞的生物學(xué)活性,。外泌體介導(dǎo)的細(xì)胞間通訊主要通過以下三種方式:一是外泌體膜蛋白可以與靶細(xì)胞膜蛋白結(jié)合,,進(jìn)而活躍靶細(xì)胞細(xì)胞內(nèi)的信號通路。二是在細(xì)胞外基質(zhì)中,,外泌體膜蛋白可以被蛋白酶剪切,,剪切的碎片可以作為配體與細(xì)胞膜上的受體結(jié)合,從而活躍細(xì)胞內(nèi)的信號通路,。有報(bào)道稱一些外泌體膜上蛋白在其來源細(xì)胞膜上未能檢測出,。三是外泌體膜可以與靶細(xì)胞膜直接融合,非選擇性的釋放其所含的蛋白質(zhì),、mRNA以及microRNA,。干細(xì)胞外泌體提取試劑盒價錢采用磁珠法時,外泌體生物活性易受PH和鹽濃度影響,。

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流式細(xì)胞技術(shù)是細(xì)胞和小顆粒定性和定量表征的有效方法,,其用于外泌體定量檢測的準(zhǔn)確性也在不斷上升。將外泌體表面特異性標(biāo)志物CD63,、CD81等相應(yīng)抗體進(jìn)行標(biāo)記,,可用流式細(xì)胞儀檢測到陽性表達(dá),從而實(shí)現(xiàn)對外泌體的定量,。但流式細(xì)胞技術(shù)檢測時需要單顆粒懸浮液,,當(dāng)外泌體濃度高或分離過程中發(fā)生外泌體囊泡聚集時將導(dǎo)致一次觀察到多個顆粒,從而導(dǎo)致數(shù)據(jù)不準(zhǔn)確,。因此,,為了通過流式細(xì)胞儀觀察,需要將外泌體通過免疫捕獲或共價結(jié)合固定在磁珠表面上,從而便于將外泌體囊泡暴露于已知或者預(yù)期在外泌體表面表達(dá)的抗原的熒光偶聯(lián)抗體中,。在流式細(xì)胞術(shù)之前,,可以在落射熒光顯微鏡(EPI)下觀察與磁珠和熒光抗體偶聯(lián)的外泌體囊泡。當(dāng)樣品通過流式細(xì)胞儀時采集熒光信號,,不只可以對外泌體進(jìn)行高通量分析,,還可以基于抗原表達(dá)對外泌體進(jìn)行定量或分類。外泌體中常見的細(xì)胞質(zhì)蛋白是Rabs蛋白,,是鳥苷酸三磷酸酶家族的一種,。

外泌體提取在短時間(一周之內(nèi))使用,可以放在4度保存,,如果長時間保存可以放在-20度或-80度保存,。也可以將外泌體進(jìn)行分裝,分別放在-20度或-80度,。外泌體檢測方法:外泌體分離之后,,需要經(jīng)過一系列鑒定才能確定分離的是外泌體。鑒定方法從物理特征到表面分子標(biāo)志物,,多角度進(jìn)行鑒定,。l、透射電鏡鑒定法:簡稱TEM,,適合外泌體雙層囊膜超微結(jié)構(gòu)觀察,,即通常為茶托型或一側(cè)凹陷的半球形。2,、納米顆粒追蹤分析法:簡稱NTA,,該方法能保證外泌體原始狀態(tài)、檢測速度快,,檢測后能提供外泌體粒徑和濃度信息,。磁珠免疫法分離的外泌體,生物活性易受pH和鹽濃度影響,,不利于下游實(shí)驗(yàn),,難以普遍普及。

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外泌體遞送藥物的優(yōu)勢:許多新的候選藥物(例如蛋白質(zhì)和核酸)在體內(nèi)環(huán)境中高度不穩(wěn)定,,對診療結(jié)果的效果提出了重大挑戰(zhàn),。鑒于與許多當(dāng)前的納米微粒遞送系統(tǒng)相關(guān)的問題,外泌體作為“自然的遞送系統(tǒng)”允許遞送這些生物分子,。由于外泌體體積小和其本身就是細(xì)胞產(chǎn)物,通過外泌體遞送藥物可以避免巨噬細(xì)胞的吞噬作用或降解,,還可以在體內(nèi)長時間循環(huán),,保持效果。其中,外泌體能夠穿過血腦屏障以將特定藥物輸送到中樞的神經(jīng)系統(tǒng)是外泌體遞送藥物的一個明顯優(yōu)勢,。外泌體的提取的方式:過濾離心,。細(xì)胞上清外泌體熒光標(biāo)記

需要開發(fā)大規(guī)模生產(chǎn)質(zhì)量可控的外泌體并快速純化外泌體的技術(shù)和策略。羊奶提取試劑盒報(bào)價

外泌體的脂質(zhì)和蛋白質(zhì)組成可以影響它們的藥代動力學(xué)特性,,它們的天然成分可能在提高生物利用度和減少不良反應(yīng)方面發(fā)揮作用,。除了它們的診療潛力,外泌體也有幫助疾病診斷的潛力,。它們已經(jīng)在所有的生物液體中被報(bào)道,,并且通過生物液體取樣(液體活組織檢查)可以比較容易地獲得外泌體的復(fù)雜貨物的組成?;谕饷隗w的液體活檢在病癥和其他疾病的診斷和確定預(yù)后方面具有潛在的應(yīng)用價值,。疾病的進(jìn)展和對診療的反應(yīng)也可以通過外泌體的多組分分析來確定。羊奶提取試劑盒報(bào)價

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