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外泌體上市產(chǎn)品

來源: 發(fā)布時間:2023-04-20

外泌體攜帶大量特異性的蛋白質(zhì)(如細胞因子、生長因子)以及功能性的mRNAs,、miRNAs等生物活性物質(zhì),,在體內(nèi)參與細胞通訊、細胞遷移,、促血管新生和抗瘤子免疫等生理過程,,與多種疾病的發(fā)生和進程密切相關。由于外泌體的特殊結構和功能,,使得它具有潛在的應用價值,,一方面可以作為診斷多種疾病的生物指標,另一方面也可以作為診療手段,,未來有可能作為藥物的天然載體用于臨床診療,。外泌體研究,應選用血漿還是血清,?答:血清是血液凝固之后收集的液體,,所以其中少了纖維蛋白原,,凝血因子,以及多了比較多凝血產(chǎn)物,。纖維蛋白原可轉化為纖維蛋白,,具有凝血功能。在凝血過程中血小板會分泌大量的外泌體,,有研究發(fā)現(xiàn)血清中有接近50%的外泌體來自額外的分泌,。外泌體屬于胞外囊泡類,除了外泌體之外細胞還分泌微泡以及其它的膜囊泡,。外泌體上市產(chǎn)品

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超速離心是外泌體提取較常用的方法也被認為是金標準,,主要是根據(jù)外泌體的沉降系數(shù)、大小和形狀將其分離出來,。首先4℃低速離心(300-500g,,10min)去除死細胞以及細胞碎片,隨后以較高離心速度(2000xg,,10min)去除生物聚合物以及凋亡小體,,然后用10000xg,30min離心去除大型囊泡,結尾以超速離心沉淀外泌體,。通過懸浮以及重復超速離心去除外泌體沉淀中的非外泌體蛋白,。超速離心法具有操作簡單、不易被分離試劑污染,、獲得的外泌體數(shù)量較多等優(yōu)點,。但是此方法需要昂貴的超高速離心機,每次處理的樣本量較小,,費時,,電鏡鑒定時還發(fā)現(xiàn)外泌體易聚集成塊,且上清中仍能檢測到大型囊泡,,純度不高,,另外高速離心會損傷外泌體影響下游實驗。外泌體通過內(nèi)體途徑分泌到細胞外空間,,并將各種生物活性分子(貨物)轉運至靶細胞,。廣州外泌體miRNA芯片流式細胞技術是細胞和小顆粒定性和定量表征的有效方法,其用于外泌體定量檢測的準確性也在不斷上升,。

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外泌體是細胞分泌到胞外的一種囊泡,,其大小為30-150nm,具有雙層膜結構和茶托狀形態(tài),,含有豐富的內(nèi)含物(包括核酸,、蛋白和脂質(zhì)等),參與細胞間的分子傳遞,。外泌體普遍存在于細胞培養(yǎng)上清以及各種體液中,,包括血液、唾液,、尿液,、乳汁等,同時也存在于組織樣本中,,如腦組織,、肌肉組織、脂肪組織等,。所有的細胞都能分泌外泌體,,但是不同細胞分泌的外泌體不管在數(shù)量上還是在內(nèi)含物中都具有比較大的差異性,這也決定了每種外泌體所行使的功能不一樣,。外泌體普遍參與細胞間物質(zhì)運輸與信息傳遞,,調(diào)控細胞生理活動。同時,,外泌體具有抗原提呈,、免疫逃逸、誘導正常細胞轉化,、促進瘤子發(fā)生和轉移等作用,;此外,外泌體還可以作為“天然的納米粒子”來進行藥物遞送,。

外泌體中常見的細胞質(zhì)蛋白是Rabs蛋白,,是鳥苷酸三磷酸酶家族的一種。它可以調(diào)節(jié)外泌體膜與受體細胞的融合,,有文獻報道稱RAB4,RAB5和RAB11主要出現(xiàn)在早期以及回收的核內(nèi)體中,,RAB7和RAB9主要出現(xiàn)在晚期的核內(nèi)體。現(xiàn)有大量的研究發(fā)現(xiàn)外泌體中含有40種RAB蛋白,。除了RAB蛋白,,外泌體中富含具有外泌體膜交換以及融合作用的膜聯(lián)蛋白(包括膜聯(lián)蛋白1、2,、4,、5、6,、7,、11等)。外泌體膜上富含參與外泌體運輸?shù)乃目缒さ鞍准易澹–D63,CD81和CD9)),、熱休克蛋白家族((HSP60,HSP70,HSPA5,CCT2和HSP90以及一些細胞特異性的蛋白包括A33(結腸上皮細胞來源),、MHC-Ⅱ(抗原提呈細胞來源)、CD86(抗原提呈細胞來源)以及乳凝集素,。外泌體功能在研究初期階段發(fā)現(xiàn)是參與細胞成熟過程中去除不必要的蛋白質(zhì),。

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外泌體的相關成分:1,、外泌體的膜同細胞一樣,是磷脂雙分子層,。2,、外泌體膜含有MHC-1/2蛋白,能綁定特異性的肽鏈,。3,、外泌體膜中有跨膜蛋白PGRL、LAMP1,、LAMP2,。4、外泌體膜中有膜轉運融合蛋白annexins,、RAN,、GTPases。5,、外泌體膜上有脂質(zhì)筏Chol,、ceramide、SM,、PC,,限制膜流動,參與包括跨膜信號轉導,、物質(zhì)內(nèi)吞,、脂質(zhì)及蛋白定向分選的多種功能。6,、外泌體中含有核酸,,包括miRNA、DNA,、lncRNA,、mRNA;同時還有一些蛋白,、脂類也能被包裹到外泌體中,。7、與外泌體產(chǎn)生相關的重要分子:Ral,、ARF6,、PLD2、RAB家族,。8,、一些物質(zhì)進行外泌體中是特異性的:如hnRNPA2B1能結合lncRNA或miRNA特異性的序列(GGAG/CCCU),進行主動包埋。外泌體的膜同細胞一樣,,是磷脂雙分子層,。外泌體普遍存在于細胞培養(yǎng)上清以及各種體液中,包括血液,、唾液,、尿液、乳汁等,。血漿血清提取試劑盒產(chǎn)品標準

超速離心法,,這是目前外泌體提取較常用的方法,。外泌體上市產(chǎn)品

外泌體是分泌的細胞外囊泡的主要群體,,是具有生物活性的脂雙層囊泡,大小約為30-100nm,,由不同類型的正常細胞和瘤子細胞自然產(chǎn)生和釋放,。這些囊泡在細胞間通訊中起重要作用,并影響細胞外環(huán)境和免疫系統(tǒng)反應,。外泌體通過內(nèi)體途徑分泌到細胞外空間,,并將各種生物活性分子(貨物)轉運至靶細胞。外泌體貨物的組成非常多樣化,,包括各種免疫阻止和免疫刺激蛋白,、趨化因子、細胞因子,、細胞受體,、脂質(zhì)以及不同的核酸,如miRNA和環(huán)狀RNA,。外泌體可以通過多種方法給藥,,靜脈內(nèi)給藥是較常用的途徑。外泌體上市產(chǎn)品

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