外泌體攜帶大量特異性的蛋白質(zhì)（如細胞因子,、生長因子）以及功能性的mRNAs、miRNAs等生物活性物質(zhì),，在體內(nèi)參與細胞通訊,、細胞遷移、促血管新生和抗瘤子免疫等生理過程,，與多種疾病的發(fā)生和進程密切相關(guān),。由于外泌體的特殊結(jié)構(gòu)和功能，使得它具有潛在的應(yīng)用價值,，一方面可以作為診斷多種疾病的生物指標,，另一方面也可以作為診療手段，未來有可能作為藥物的天然載體用于臨床診療,。外泌體研究,，應(yīng)選用血漿還是血清？答：血清是血液凝固之后收集的液體,，所以其中少了纖維蛋白原,，凝血因子，以及多了比較多凝血產(chǎn)物,。纖維蛋白原可轉(zhuǎn)化為纖維蛋白,，具有凝血功能。在凝血過程中血小板會分泌大量的外泌體,，有研究發(fā)現(xiàn)血清中有接近50%的外泌體來自額外的分泌,。外泌體屬于胞外囊泡類，除了外泌體之外細胞還分泌微泡以及其它的膜囊泡,。外泌體上市產(chǎn)品

超速離心是外泌體提取較常用的方法也被認為是金標準,，主要是根據(jù)外泌體的沉降系數(shù)、大小和形狀將其分離出來,。首先4℃低速離心（300-500g,，10min）去除死細胞以及細胞碎片，隨后以較高離心速度(2000xg,，10min)去除生物聚合物以及凋亡小體,，然后用10000xg,30min離心去除大型囊泡,，結(jié)尾以超速離心沉淀外泌體。通過懸浮以及重復(fù)超速離心去除外泌體沉淀中的非外泌體蛋白,。超速離心法具有操作簡單,、不易被分離試劑污染、獲得的外泌體數(shù)量較多等優(yōu)點,。但是此方法需要昂貴的超高速離心機,，每次處理的樣本量較小，費時,，電鏡鑒定時還發(fā)現(xiàn)外泌體易聚集成塊,，且上清中仍能檢測到大型囊泡，純度不高,，另外高速離心會損傷外泌體影響下游實驗,。外泌體通過內(nèi)體途徑分泌到細胞外空間，并將各種生物活性分子（貨物）轉(zhuǎn)運至靶細胞,。廣州外泌體miRNA芯片流式細胞技術(shù)是細胞和小顆粒定性和定量表征的有效方法,，其用于外泌體定量檢測的準確性也在不斷上升。

外泌體是細胞分泌到胞外的一種囊泡,，其大小為30-150nm,，具有雙層膜結(jié)構(gòu)和茶托狀形態(tài)，含有豐富的內(nèi)含物（包括核酸,、蛋白和脂質(zhì)等）,，參與細胞間的分子傳遞。外泌體普遍存在于細胞培養(yǎng)上清以及各種體液中,，包括血液,、唾液、尿液,、乳汁等,，同時也存在于組織樣本中，如腦組織,、肌肉組織,、脂肪組織等。所有的細胞都能分泌外泌體,，但是不同細胞分泌的外泌體不管在數(shù)量上還是在內(nèi)含物中都具有比較大的差異性,，這也決定了每種外泌體所行使的功能不一樣。外泌體普遍參與細胞間物質(zhì)運輸與信息傳遞,，調(diào)控細胞生理活動,。同時，外泌體具有抗原提呈,、免疫逃逸,、誘導(dǎo)正常細胞轉(zhuǎn)化,、促進瘤子發(fā)生和轉(zhuǎn)移等作用；此外,，外泌體還可以作為“天然的納米粒子”來進行藥物遞送,。

外泌體中常見的細胞質(zhì)蛋白是Rabs蛋白，是鳥苷酸三磷酸酶家族的一種,。它可以調(diào)節(jié)外泌體膜與受體細胞的融合,，有文獻報道稱RAB4,RAB5和RAB11主要出現(xiàn)在早期以及回收的核內(nèi)體中，RAB7和RAB9主要出現(xiàn)在晚期的核內(nèi)體?，F(xiàn)有大量的研究發(fā)現(xiàn)外泌體中含有40種RAB蛋白,。除了RAB蛋白，外泌體中富含具有外泌體膜交換以及融合作用的膜聯(lián)蛋白（包括膜聯(lián)蛋白1,、2,、4、5,、6、7,、11等）,。外泌體膜上富含參與外泌體運輸?shù)乃目缒さ鞍准易澹–D63,CD81和CD9)）、熱休克蛋白家族（(HSP60,HSP70,HSPA5,CCT2和HSP90以及一些細胞特異性的蛋白包括A33（結(jié)腸上皮細胞來源）,、MHC-Ⅱ(抗原提呈細胞來源),、CD86(抗原提呈細胞來源)以及乳凝集素。外泌體功能在研究初期階段發(fā)現(xiàn)是參與細胞成熟過程中去除不必要的蛋白質(zhì),。

外泌體的相關(guān)成分：1,、外泌體的膜同細胞一樣，是磷脂雙分子層,。2,、外泌體膜含有MHC-1/2蛋白，能綁定特異性的肽鏈,。3,、外泌體膜中有跨膜蛋白PGRL、LAMP1,、LAMP2,。4、外泌體膜中有膜轉(zhuǎn)運融合蛋白annexins,、RAN,、GTPases。5,、外泌體膜上有脂質(zhì)筏Chol,、ceramide,、SM、PC,，限制膜流動,，參與包括跨膜信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、物質(zhì)內(nèi)吞,、脂質(zhì)及蛋白定向分選的多種功能,。6、外泌體中含有核酸,，包括miRNA,、DNA、lncRNA,、mRNA,；同時還有一些蛋白、脂類也能被包裹到外泌體中,。7,、與外泌體產(chǎn)生相關(guān)的重要分子：Ral、ARF6,、PLD2,、RAB家族。8,、一些物質(zhì)進行外泌體中是特異性的：如hnRNPA2B1能結(jié)合lncRNA或miRNA特異性的序列（GGAG/CCCU）,，進行主動包埋。外泌體的膜同細胞一樣,，是磷脂雙分子層,。外泌體普遍存在于細胞培養(yǎng)上清以及各種體液中，包括血液,、唾液,、尿液、乳汁等,。血漿血清提取試劑盒產(chǎn)品標準

超速離心法,，這是目前外泌體提取較常用的方法。外泌體上市產(chǎn)品

外泌體是分泌的細胞外囊泡的主要群體,，是具有生物活性的脂雙層囊泡,，大小約為30-100nm，由不同類型的正常細胞和瘤子細胞自然產(chǎn)生和釋放,。這些囊泡在細胞間通訊中起重要作用,，并影響細胞外環(huán)境和免疫系統(tǒng)反應(yīng)。外泌體通過內(nèi)體途徑分泌到細胞外空間,，并將各種生物活性分子（貨物）轉(zhuǎn)運至靶細胞,。外泌體貨物的組成非常多樣化,，包括各種免疫阻止和免疫刺激蛋白、趨化因子,、細胞因子,、細胞受體、脂質(zhì)以及不同的核酸,，如miRNA和環(huán)狀RNA,。外泌體可以通過多種方法給藥，靜脈內(nèi)給藥是較常用的途徑,。外泌體上市產(chǎn)品

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