質(zhì)膜的連續(xù)內(nèi)陷較終導(dǎo)致多泡體的形成,，多泡體可與細(xì)胞內(nèi)的其他囊泡和細(xì)胞器交叉，從而增加了外泌體成分的多樣性,。根據(jù)細(xì)胞來(lái)源的不同,，細(xì)胞外囊泡，包括外泌體,，可以包含細(xì)胞的許多成分,，包括DNA,、RNA、脂質(zhì),、代謝物,、胞質(zhì)和細(xì)胞表面蛋白。目前產(chǎn)生外泌體的生理目的尚不清楚,，需要進(jìn)一步研究。一個(gè)推測(cè)的作用是外泌體可能從細(xì)胞中去除多余和/或不必要的成分以維持細(xì)胞內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定,。近來(lái)的研究也表明外泌體中特定細(xì)胞成分的功能,、靶向、機(jī)制驅(qū)動(dòng)的積累,，提示它們?cè)谡{(diào)節(jié)細(xì)胞間通訊中發(fā)揮作用,。外泌體功能在研究初期階段發(fā)現(xiàn)是參與細(xì)胞成熟過(guò)程中去除不必要的蛋白質(zhì)。外泌體綜述

外泌體的形成始于細(xì)胞內(nèi)陷,，成熟于多囊泡胞內(nèi)體,，終于膜融合。細(xì)胞通過(guò)內(nèi)吞作用產(chǎn)生小囊泡,，小囊泡融合形成早期胞內(nèi)體（earlyendosome）,，在多個(gè)蛋白的協(xié)同調(diào)控下，早期胞內(nèi)體出芽形成含有多個(gè)腔內(nèi)小囊泡的多泡體（multivesicularbodies,，MVB）,，這個(gè)過(guò)程中這些腔內(nèi)小囊泡（intraluminalvesicles，ILVs）會(huì)裝載各種核酸和蛋白質(zhì)等分子,，泡內(nèi)體較后在GTPase家族中RAB酶的調(diào)節(jié)下與細(xì)胞膜融合,。隨后，這些小囊泡會(huì)被釋放到細(xì)胞外,，稱為外泌體,。外泌體是通過(guò)細(xì)胞內(nèi)吞細(xì)胞膜融合主動(dòng)排除的物質(zhì)，大小均勻,，而微泡是由細(xì)胞直接出芽脫落生成,，大小不均一。細(xì)胞上清外泌體label free外泌體其純度與超離心法和PEG沉淀法提取外泌體做比較,。

外泌體特指直徑在30-150nm的囊泡,，其主要來(lái)源于細(xì)胞內(nèi)多囊泡體，經(jīng)多囊泡體外膜與細(xì)胞膜融合后釋放到胞外基質(zhì)中,。外泌體膜上富含參與外泌體運(yùn)輸?shù)乃目缒さ鞍准易澹–D63,CD81和CD9）,、熱休克蛋白家族（HSP60,HSP70和HSP90），本示蹤病毒使用CD63作為生物標(biāo)記,，通過(guò)將CD63與熒光蛋白偶聯(lián),，帶熒光的膜蛋白會(huì)在表達(dá)至外泌體膜上,，便于后續(xù)進(jìn)行、觀察內(nèi)化或其他實(shí)驗(yàn),。慢病毒載體的構(gòu)建原理就是將HIV21基因組中的順式作用元件(如包裝信號(hào),、長(zhǎng)末端重復(fù)序列)和編碼反式作用蛋白的序列進(jìn)行分離。

外泌體的提取主要包括以下幾種方式,。一是超速離心法,，這是目前外泌體提取較常用的方法。此種方法得到的外泌體量多,，但是純度不足,，電鏡鑒定時(shí)發(fā)現(xiàn)外泌體聚集成塊，由于微泡和外泌體沒(méi)有非常統(tǒng)一的鑒定標(biāo)準(zhǔn),，也有一些研究認(rèn)為此種方法得到的是微泡不是外泌體,。二是過(guò)濾離心，這種操作簡(jiǎn)單,、省時(shí),，不影響外泌體的生物活性，但同樣存在純度不足的問(wèn)題,。三是密度梯度離心法,，用此種方法分離到的外泌體純度高，但是前期準(zhǔn)備工作繁雜,，耗時(shí),，量少。膜受體的識(shí)別是外泌體細(xì)胞反應(yīng)的基礎(chǔ),，它可能活躍受體并隨后導(dǎo)致相關(guān)信號(hào)通路的活躍,。膜受體的識(shí)別是外泌體細(xì)胞反應(yīng)的基礎(chǔ)，它可能活躍受體并隨后導(dǎo)致相關(guān)信號(hào)通路的活躍,。

外泌體的提取方法：免疫磁珠法,，這種方法可以保證外泌體形態(tài)的完整，特異性高,、操作簡(jiǎn)單,、不需要昂貴的儀器設(shè)備，但是非中性pH和非生理性鹽濃度會(huì)影響外泌體生物活性,，不便進(jìn)行下一步的實(shí)驗(yàn),。PS親和法，該方法將PS（磷脂酰絲氨酸）與磁珠結(jié)合,，利用親和原理捕獲外泌體囊泡外的PS,。該方法與免疫磁珠法相似，獲得的外泌體形態(tài)完整，純度較高,。由于不使用變性劑,，不影響外泌體的生物活性，外泌體可用于細(xì)胞共培養(yǎng)和體內(nèi)注射,。PS法可提取相當(dāng)高純度的外泌體,。色譜法，這種方法分離到的外泌體在電鏡下大小均一,，但是需要特殊的設(shè)備,，應(yīng)用不寬泛。外泌體產(chǎn)生相關(guān)的重要分子：Ral,、ARF6,、PLD2、RAB家族,。羊水提取試劑盒原理

外泌體分析會(huì)引起何種生理作用，這是進(jìn)一步研究的發(fā)展方向,。外泌體綜述

外泌體（Exosome）,，是細(xì)胞外囊泡（EV）的一種主要類型，是直徑為30至150nm的納米大小的膜結(jié)構(gòu),，大多數(shù)細(xì)胞都會(huì)分泌外泌體,。外泌體存在于各種生物體液中，通過(guò)其攜帶的蛋白質(zhì),、核酸,、脂質(zhì)和代謝物等來(lái)發(fā)揮細(xì)胞間通訊功能，參與免疫應(yīng)答,、代謝和心血管疾病,、神經(jīng)退行性疾病以及病癥進(jìn)展等多種生理和病理過(guò)程。在內(nèi)體轉(zhuǎn)變?yōu)槌墒於嗄遗輧?nèi)體（MVE）的過(guò)程中,，內(nèi)體膜向腔內(nèi)出芽形成腔內(nèi)囊泡（ILV）,，MVE與細(xì)胞膜融合釋放ILV到細(xì)胞外，即形成外泌體,。外泌體綜述

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