當(dāng)外泌體在1980年初次被發(fā)現(xiàn)后，其被認(rèn)為是細(xì)胞排泄廢物的一種方式,，如今隨著大量對(duì)其生物來(lái)源,、其物質(zhì)構(gòu)成及運(yùn)輸,、細(xì)胞間信號(hào)的傳導(dǎo)以及在體液中的分布的研究發(fā)現(xiàn)外泌體具有多種多樣的功能。外泌體的功能取決于其所來(lái)源的細(xì)胞類(lèi)型,，其可參與到機(jī)體免疫應(yīng)答,、抗原提呈、細(xì)胞遷移,、細(xì)胞分化,、肉瘤侵襲等方方面面。有研究表明肉瘤來(lái)源的外泌體參與到肉瘤細(xì)胞與基底細(xì)胞的遺傳信息的交換,，從而導(dǎo)致大量新生血管的生成,，促進(jìn)了肉瘤的生長(zhǎng)與侵襲。外泌體普遍存在于細(xì)胞培養(yǎng)上清以及各種體液中,，包括血液,、唾液、尿液,、乳汁等,。成都外泌體lncRNA測(cè)序

酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定（ELISA）：將其中一種針對(duì)外泌體表面抗原的抗體固定在微孔板的表面上，將外泌體樣品暴露于含有固定抗體的孔中,，由于抗體-抗原相互作用,，表達(dá)抗原的外泌體將被捕獲固定在板上。將未捕獲的樣品內(nèi)容物洗掉,，并使用另一種抗體檢測(cè)固定的外泌體,。ELISA已用于從尿液、血漿和血清中分離出外泌體,，當(dāng)使用標(biāo)準(zhǔn)液（已知外泌體的量）創(chuàng)建標(biāo)準(zhǔn)曲線時(shí),，甚至可以進(jìn)行定量。但是,，此方法需要通過(guò)超速離心或超濾對(duì)樣品進(jìn)行預(yù)處理,。同樣，流場(chǎng)-流分離與紫外線分析儀和光散射檢測(cè)器相結(jié)合已被用于分析外泌體的大小和純度,。血漿外泌體和血清外泌體的區(qū)別建立記錄各論文實(shí)驗(yàn)條件的數(shù)據(jù)庫(kù)也可作為規(guī)避混亂的方法之一,。

流式細(xì)胞技術(shù)是細(xì)胞和小顆粒定性和定量表征的有效方法，其用于外泌體定量檢測(cè)的準(zhǔn)確性也在不斷上升,。將外泌體表面特異性標(biāo)志物CD63,、CD81等相應(yīng)抗體進(jìn)行標(biāo)記,，可用流式細(xì)胞儀檢測(cè)到陽(yáng)性表達(dá),，從而實(shí)現(xiàn)對(duì)外泌體的定量。但流式細(xì)胞技術(shù)檢測(cè)時(shí)需要單顆粒懸浮液,，當(dāng)外泌體濃度高或分離過(guò)程中發(fā)生外泌體囊泡聚集時(shí)將導(dǎo)致一次觀察到多個(gè)顆粒,，從而導(dǎo)致數(shù)據(jù)不準(zhǔn)確,。因此，為了通過(guò)流式細(xì)胞儀觀察,，需要將外泌體通過(guò)免疫捕獲或共價(jià)結(jié)合固定在磁珠表面上,，從而便于將外泌體囊泡暴露于已知或者預(yù)期在外泌體表面表達(dá)的抗原的熒光偶聯(lián)抗體中。在流式細(xì)胞術(shù)之前,，可以在落射熒光顯微鏡（EPI）下觀察與磁珠和熒光抗體偶聯(lián)的外泌體囊泡,。當(dāng)樣品通過(guò)流式細(xì)胞儀時(shí)采集熒光信號(hào)，不只可以對(duì)外泌體進(jìn)行高通量分析,，還可以基于抗原表達(dá)對(duì)外泌體進(jìn)行定量或分類(lèi),。外泌體中常見(jiàn)的細(xì)胞質(zhì)蛋白是Rabs蛋白，是鳥(niǎo)苷酸三磷酸酶家族的一種,。

除運(yùn)輸藥物進(jìn)行疾病zhiliao之外,，外泌體還能進(jìn)行免疫zhiliao，外泌體免疫zhiliao和載藥zhiliao,。進(jìn)行免疫調(diào)節(jié)時(shí),，外泌體通常運(yùn)載TGF-β1、粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞集落刺激因子(GM-CSF)或MAGE抗原等物質(zhì),。在這些研究中,，分泌外泌體的母代細(xì)胞往往選用具有很好抗原遞呈(antigenpresentation)能力的樹(shù)突細(xì)胞或者中流細(xì)胞。Cao等采用鼠B淋巴瘤細(xì)胞作為母代細(xì)胞,，通過(guò)熱處理的方式使淋巴瘤細(xì)胞分泌的外泌體含有更多的熱休克蛋白(HSP60和HSP90)和其他一些刺激免疫的分子,，如主要組織相容性復(fù)合物(MHC-I和MHC[1]II)以及CD40、CD86等,，與未熱處理的鼠B淋巴瘤細(xì)胞分泌的外泌體相比,，熱處理后分泌的外泌體可以增強(qiáng)對(duì)T細(xì)胞的激huo能力，從而增強(qiáng)這種基于外泌體的疫苗的抗中流能力,。外泌體可以將PD-L1轉(zhuǎn)運(yùn)至其他PD-L1表達(dá)低或沒(méi)有PD-L1的細(xì)胞,，并可能與PD-1結(jié)合。

質(zhì)膜的連續(xù)內(nèi)陷較終導(dǎo)致多泡體的形成,，多泡體可與細(xì)胞內(nèi)的其他囊泡和細(xì)胞器交叉,，從而增加了外泌體成分的多樣性。根據(jù)細(xì)胞來(lái)源的不同,，細(xì)胞外囊泡,，包括外泌體，可以包含細(xì)胞的許多成分,，包括DNA,、RNA、脂質(zhì),、代謝物,、胞質(zhì)和細(xì)胞表面蛋白,。目前產(chǎn)生外泌體的生理目的尚不清楚，需要進(jìn)一步研究,。一個(gè)推測(cè)的作用是外泌體可能從細(xì)胞中去除多余和/或不必要的成分以維持細(xì)胞內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定,。較近的研究也表明外泌體中特定細(xì)胞成分的功能、靶向,、機(jī)制驅(qū)動(dòng)的積累,，提示它們?cè)谡{(diào)節(jié)細(xì)胞間通訊中發(fā)揮作用。外泌體膜中有跨膜蛋白PGRL,、LAMP1,、LAMP2。cm-dil熒光標(biāo)記外泌體

干細(xì)胞外泌體可用于中風(fēng)的治理,，改善神經(jīng)預(yù)后,，增加血管與神經(jīng)生成。成都外泌體lncRNA測(cè)序

外泌體提取在短時(shí)間（一周之內(nèi)）使用,，可以放在4度保存,，如果長(zhǎng)時(shí)間保存可以放在-20度或-80度保存。也可以將外泌體進(jìn)行分裝,，分別放在-20度或-80度,。外泌體檢測(cè)方法：外泌體分離之后，需要經(jīng)過(guò)一系列鑒定才能確定分離的是外泌體,。鑒定方法從物理特征到表面分子標(biāo)志物,，多角度進(jìn)行鑒定。l,、透射電鏡鑒定法：簡(jiǎn)稱TEM,，適合外泌體雙層囊膜超微結(jié)構(gòu)觀察，即通常為茶托型或一側(cè)凹陷的半球形,。2,、納米顆粒追蹤分析法：簡(jiǎn)稱NTA，該方法能保證外泌體原始狀態(tài),、檢測(cè)速度快,，檢測(cè)后能提供外泌體粒徑和濃度信息。成都外泌體lncRNA測(cè)序

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