外泌體（Exosome）開始被認(rèn)為是毫無(wú)作用的“垃圾”,，但隨著研究的不斷深入，人們發(fā)現(xiàn)事實(shí)并非如此,，外泌體（Exosome）是具有功能活性并可進(jìn)行細(xì)胞間信息傳遞的微囊泡,。外泌體（Exosome）介導(dǎo)瘤細(xì)胞的免疫耐受。瘤細(xì)胞來(lái)源的外泌體（Exosome）本身可作為瘤抗原,，因此,，瘤來(lái)源的外泌體（Exosome）既是一種抗原呈遞系統(tǒng)，同時(shí)也是瘤排斥抗原的來(lái)源,。瘤來(lái)源的外泌體（Exosome）能夠通過(guò)傳遞某些抑制信號(hào),，在機(jī)體免疫應(yīng)答過(guò)程中起負(fù)性調(diào)節(jié)作用，誘導(dǎo)瘤細(xì)胞形成免疫耐受,，從而逃避免疫細(xì)胞的殺傷,。外泌體分離之后，需要經(jīng)過(guò)一系列鑒定才能確定分離的是外泌體,。瑞黎菲外泌體

外泌體特指直徑在30-150nm的囊泡,，其主要來(lái)源于細(xì)胞內(nèi)多囊泡體，經(jīng)多囊泡體外膜與細(xì)胞膜融合后釋放到胞外基質(zhì)中,。外泌體膜上富含參與外泌體運(yùn)輸?shù)乃目缒さ鞍准易澹–D63,CD81和CD9）,、熱休克蛋白家族（HSP60,HSP70和HSP90）,，本示蹤病毒使用CD9作為生物標(biāo)記，通過(guò)將CD9與熒光蛋白偶聯(lián),，帶熒光的膜蛋白會(huì)在表達(dá)至外泌體膜上,，便于后續(xù)進(jìn)行、觀察內(nèi)化或其他實(shí)驗(yàn),。攜帶有外源基因的慢病毒載體在慢病毒包裝質(zhì)粒,、細(xì)胞系的輔助下，經(jīng)過(guò)病毒包裝成為有g(shù)anran力的病毒顆粒,，通過(guò)ganran細(xì)胞或組織,，實(shí)現(xiàn)外源基因在細(xì)胞或組織中表達(dá)。瑞黎菲外泌體對(duì)外泌體的分析和檢測(cè)可以輔助疾病的早期診斷,、療效評(píng)價(jià)和預(yù)后分析,。

外泌體研究背景：胞外囊泡是從細(xì)胞膜上脫落或者由細(xì)胞分泌的具有雙層膜結(jié)構(gòu)的囊泡狀小體，主要由微囊泡,、凋亡小體,、外泌體組成。而外泌體是其中一類小囊泡,，直徑為30~150nm,，密度1.10~1.18g/ml，可攜帶核酸,、蛋白質(zhì)質(zhì)和脂質(zhì)等,，存在于血液、唾液,、尿液等多種體液中,。越來(lái)越多的研究證實(shí)，外泌體可以通過(guò)細(xì)胞間轉(zhuǎn)移核酸,、蛋白質(zhì),、脂質(zhì)等特定物質(zhì)，發(fā)揮特殊的功能,。如在抗原提呈細(xì)胞中呈遞抗原程中,、肉瘤細(xì)胞發(fā)生了發(fā)展、神經(jīng)細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)過(guò)程中都發(fā)揮著重要作用,。對(duì)外泌體的分析和檢測(cè)可以輔助疾病的早期診斷,、療效評(píng)價(jià)和預(yù)后分析。

外泌體調(diào)控毛發(fā)根部的囊干細(xì)胞的機(jī)能,，延長(zhǎng)毛發(fā)根部的囊生長(zhǎng)期,，同時(shí)活化處于靜止期的毛發(fā)根部的囊，使其提前進(jìn)入新的生長(zhǎng)周期,，實(shí)現(xiàn)了毛發(fā)的再次生長(zhǎng),。骨衰老小鼠注射外泌體試驗(yàn)證明：年輕血液中的外泌體同樣使衰老的組織重新煥發(fā)生機(jī),。來(lái)源于脂肪組織中的干細(xì)胞分泌一些信號(hào)分子和生長(zhǎng)因子，可以促使控制毛發(fā)根部的囊生長(zhǎng)周期的毛發(fā)根部的囊干細(xì)胞進(jìn)行分化,，向上遷移生成表皮細(xì)胞和皮脂腺,，向下遷移生成毛母細(xì)胞。毛發(fā)根部的囊的生長(zhǎng)周期決定毛發(fā)的生長(zhǎng)周期,，而毛發(fā)根部的囊干細(xì)胞的機(jī)能決定了毛發(fā)根部的囊的活躍程度,，外泌體靶向調(diào)控毛發(fā)根部的囊干細(xì)胞的功能。外泌體分析會(huì)引起何種生理作用,，這是進(jìn)一步研究的發(fā)展方向,。

幾乎所有的細(xì)胞都可以在自發(fā)或在一定刺激條件下產(chǎn)生外泌體，不同的細(xì)胞產(chǎn)生的外泌體具有不同的功能,，這些外泌體參與了一系列生理和病理過(guò)程,，如ai癥發(fā)生與發(fā)展、抗原呈遞,、免疫調(diào)節(jié),、組織愈合等。來(lái)自血細(xì)胞(包括血小板,、白細(xì)胞和紅細(xì)胞)的外泌體具有參與凝血,、提供促血管生成因子、誘導(dǎo)血管生成等生理功能;妊娠期外泌體能夠影響局部血管生成,、調(diào)節(jié)分化、激huo免疫,、促進(jìn)胚胎發(fā)育;肝臟細(xì)胞產(chǎn)生的外泌體有利于維護(hù)肝臟內(nèi)穩(wěn)態(tài),。由此可見，正常細(xì)胞產(chǎn)生的外泌體對(duì)維持機(jī)體的正常生命活動(dòng)起重要作用,。PS親和法提取的外泌體,，其蛋白特異性檢測(cè)可高出10~100倍以上。外泌體自動(dòng)收集儀

有關(guān)外泌體分泌和攝取及其組成,、“運(yùn)載物”和相應(yīng)功能的精確分子機(jī)制剛剛開始研究,。瑞黎菲外泌體

外泌體作為細(xì)胞外囊泡的一個(gè)亞群,直徑集中于30~150nm。目前,基于粒徑大小分離外泌體的方法有超濾法,、尺寸排除色譜法,、靜水過(guò)濾透析法和非對(duì)稱場(chǎng)流分離法等。超濾法利用不同孔徑的濾膜,對(duì)樣品進(jìn)行選擇性分離以獲得外泌體,一般分為壓力超濾和離心超濾,。其中離心超濾效果更好,不jin能減輕力對(duì)外泌體的破壞,而且可通過(guò)增大離心力和延長(zhǎng)離心時(shí)間提高外泌體產(chǎn)物濃度,。但離心力過(guò)大或離心時(shí)間過(guò)長(zhǎng)均有可能導(dǎo)致超濾膜或外泌體破裂。此外,超濾法可以和切向流過(guò)濾法,、微控流法,、超速離心法或凝膠過(guò)濾色譜法等方法結(jié)合進(jìn)一步提高分離效率,。瑞黎菲外泌體

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