外泌體是具有雙層脂膜的囊泡結(jié)構(gòu),其穩(wěn)定性較好,可保護(hù)內(nèi)部生物分子免受體液中各種酶的影響,從而保持其完整性和生物活性,。外泌體被提取后一般懸浮于磷酸鹽緩沖液,。目前,常用的儲存方法為冷凍保存,但是冷凍保存可能會導(dǎo)致外泌體形狀與物理性質(zhì)的改變,也可能導(dǎo)致多層囊泡的形成和聚集,反復(fù)凍融會導(dǎo)致外泌體表面分子的生物特性,、含量和標(biāo)志物組成發(fā)生變化,。血清中包含外泌體在內(nèi)的細(xì)胞外囊泡DNA在不同儲存環(huán)境可保持穩(wěn)定,血漿存放于4°C時其RNA會明顯降解,在–20°C下長期保存也會導(dǎo)致血漿中外泌體總RNA降解,但miRNA卻十分穩(wěn)定,這也提示了外泌體miRNA作為生物標(biāo)志物的潛力,。從研究上來講并不太嚴(yán)格區(qū)分外泌體或微泡。外泌體霧化的好處

外泌體的臨床應(yīng)用：間充質(zhì)干細(xì)胞是目前較普遍使用的細(xì)胞類型,，它具有自我更新,，多向分化、分泌細(xì)胞因子和細(xì)胞外囊泡體,、免疫調(diào)節(jié),、來源普遍等特點,，在流感病毒的臨床診療中取得了良好的成果,。間充質(zhì)干細(xì)胞來源外泌體與間充質(zhì)干細(xì)胞有著相似的功能，包括修復(fù)與再生組織,、阻止炎癥反應(yīng)及調(diào)節(jié)機(jī)體免疫，但外泌體相對于間充質(zhì)干細(xì)胞又有許多優(yōu)勢,。首先,，間充質(zhì)干細(xì)胞來源外泌體更穩(wěn)定，更好保存,，易于管理和控制,，可以人為改變其內(nèi)容物的種類和數(shù)量。其次,，它們沒有活細(xì)胞，不會像間充質(zhì)干細(xì)胞那樣可能會過多增殖而放大療效或者病變導(dǎo)致疾病加重,；另外,，它有可能避免某些針對間充質(zhì)干細(xì)胞的調(diào)控問題，間充質(zhì)干細(xì)胞來源外泌體有代替間充質(zhì)干細(xì)胞的趨勢,。腹膜透析液外泌體熒光標(biāo)記有望在外泌體和微囊泡生理功能的分析研究上起重大貢獻(xiàn)。

血漿中的外泌體蛋白既可以當(dāng)作標(biāo)志物,，也可以進(jìn)行機(jī)理研究,？首先，研究人員將慢性淋巴瘤（CLL）患者分為2個亞組：疾病進(jìn)展期和疾病慢性期,。然后利用質(zhì)譜技術(shù)分析了患者血漿外泌體蛋白組，發(fā)現(xiàn)S100-A9蛋白在進(jìn)展期CLL患者中明顯高表達(dá),，可以作為CLL進(jìn)展期診斷的輔助標(biāo)志物,。進(jìn)一步，研究人員通過生信分析發(fā)現(xiàn)進(jìn)展期CLL患者外泌體中的高表達(dá)蛋白質(zhì)主要與炎癥和氧化應(yīng)激有關(guān),，而NF-κB通路正是承接此效應(yīng)的關(guān)鍵通路,。通過從進(jìn)展期CLL患者中分離富含S100-A9蛋白的外泌體加入CLL患者的PBMC細(xì)胞中，證實了S100-A9+外泌體能夠明顯促進(jìn)進(jìn)展期CLL患者PBMC細(xì)胞中IκBα蛋白的磷酸化上調(diào),，進(jìn)一步活躍NF-κB通路,。該研究證通過血漿外泌體蛋白組分析不只找到輔助診斷進(jìn)展期CLL的標(biāo)志物，并證實了S100-A9+外泌體可通過形成正向反饋調(diào)控,，不斷活躍進(jìn)展期CLL患者自身PBMC細(xì)胞中的NF-κB通路,，促進(jìn)CLL進(jìn)展的特殊機(jī)理。

雖然系統(tǒng)遞送的外泌體主要在肝臟,、腎臟和脾臟中積累,，但通過在外泌體的外表面上展示特定的靶向分子。例如,，識別靶抗原的肽或抗體片段,，可以獲得靶向外泌體；通過在細(xì)胞分泌囊泡上展示糖基磷脂酰肌醇（GPI）錨定的納米抗體,，可以使細(xì)胞分泌囊泡顯示多種蛋白,，包括抗體、熒光蛋白和信號分子,。自然分泌的外泌體分離純化直接作為藥物的潛力有限,，但是，將自然的外泌體分泌所需組分摻入合成脂質(zhì)體或納米顆粒中,，并且使用可控程序組裝后的工程化外泌體模擬物在藥學(xué)上擁有更大的應(yīng)用潛力,。選擇的分離方式是利用超速離心的方式分離外泌體，并且可以選用梯度密度離心法得到純度更高的外泌體。

外泌體（Exosome）,，是細(xì)胞外囊泡（EV）的一種主要類型,，是直徑為30至150nm的納米大小的膜結(jié)構(gòu)，大多數(shù)細(xì)胞都會分泌外泌體,。外泌體存在于各種生物體液中,，通過其攜帶的蛋白質(zhì)、核酸,、脂質(zhì)和代謝物等來發(fā)揮細(xì)胞間通訊功能,，參與免疫應(yīng)答、代謝和心血管疾病,、神經(jīng)退行性疾病以及病癥進(jìn)展等多種生理和病理過程,。在內(nèi)體轉(zhuǎn)變?yōu)槌墒於嗄遗輧?nèi)體（MVE）的過程中，內(nèi)體膜向腔內(nèi)出芽形成腔內(nèi)囊泡（ILV）,，MVE與細(xì)胞膜融合釋放ILV到細(xì)胞外,，即形成外泌體。建立記錄各論文實驗條件的數(shù)據(jù)庫也可作為規(guī)避混亂的方法之一,。江蘇外泌體融合實驗

與正常細(xì)胞來源外泌體在結(jié)構(gòu)分子上的差異倍受矚目,。外泌體霧化的好處

妊娠期間胎盤可釋放外泌體到全身循環(huán)系統(tǒng)，參與妊娠期間母胎界面的免疫調(diào)節(jié),、子宮螺旋動脈重塑和胎盤屏障的形成等重要事件調(diào)控，在正常妊娠過程維持中發(fā)揮重要作用,。而很多妊娠并發(fā)癥,，如子癇前期等胎盤功能紊亂相關(guān)疾病的發(fā)生，很可能與胎盤來源外泌體異常密切相關(guān),。目前外泌體分離方法主要包括：多步差速離心,、蔗糖密度梯度離心、試劑盒沉淀,、免疫磁珠分選,、色譜法、過濾離心等方法,。其中，多步差速離心是制備外泌體的經(jīng)典方法,，該方法是根據(jù)外泌體的沉降系數(shù)差速離心將其分離出來,，然而妊娠期母血清中除含有胎盤組織釋放的外泌體，還包括許多其他種類細(xì)胞釋放的外泌體,，如樹突狀細(xì)胞,、淋巴細(xì)胞等，且血清中可能還存在一些大小類似的物質(zhì)混雜其中，這些因素都會影響胎盤來源外泌體的分離純化,。外泌體霧化的好處

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