尺寸排除色譜法是使用聚合物凝膠或類似的固定相柱進行外泌體分離的技術,樣品以重力滴落的方式收集。流體力學半徑較小的樣品組分進入凝膠孔隙后,需耗費相對較長的時間通過凝膠柱,導致延遲洗脫,實現(xiàn)不同粒徑大小顆粒分離,。尺寸排除色譜法可以與差速離心法結(jié)合而不會明顯損失外泌體,保證產(chǎn)量的同時可有效去除雜質(zhì)蛋白,更適合目標蛋白質(zhì)組學和miRNA的分析,。靜水過濾透析法主要利用靜水壓力迫使樣品中不同特定大小分子先后通過透析管,其中溶劑和小溶質(zhì)很容易通過透析管,而較大的顆粒,如外泌體和其他囊泡,仍留在透析管中而被收集。外泌體的提取分離方法:PEG-base沉淀法,。外周血提取試劑盒公司
外泌體普遍參與細胞間物質(zhì)運輸與信息傳遞,,調(diào)控細胞生理活動。同時,,外泌體具有抗原提呈,、免疫逃逸、誘導正常細胞轉(zhuǎn)化,、促進種瘤發(fā)生和轉(zhuǎn)移等作用,;此外,外泌體還可以作為“天然的納米粒子”來進行藥物遞送,。外泌體相關數(shù)據(jù)庫有哪些,?lexoRBase數(shù)據(jù)庫收集和描述人類血液外泌體中所有長的RNA,包括circRNA,、lncRNA和mRNA,。lEVpedia和Vesiclepedia數(shù)據(jù)庫匯總了不同囊泡研究中發(fā)現(xiàn)的蛋白、mRNA,、miRNA,、脂類等信息。lExoCarta數(shù)據(jù)庫主要收錄了包括人,、大鼠,、小鼠,、綿羊等幾個物種的286個研究結(jié)果,涉及蛋白,、mRNA,、miRNA、脂類等信息,。外泌體是各種細胞外泌的直徑在30-100nm之間的膜囊泡,。細胞外泌體提取試劑盒利用外泌體自身的物理化學性質(zhì)所研發(fā)的各種市售的外泌體分離提取試劑盒也能達到分離效果。
細胞分泌到細胞外環(huán)境中分別稱為外泌體和微泡的細胞外膜泡是內(nèi)源性和質(zhì)膜起源的不同類型的膜囊泡,。這些細胞外囊泡(EVs)表示了細胞間通訊的一個重要模式,,作為膜和細胞溶質(zhì)蛋白、脂質(zhì)和RNA細胞之間傳遞的載體,。然而,,我們對于EV形成的分子機制知識的缺乏以及缺乏干擾貨物包裝或囊泡釋放的方法仍然妨礙了其在體內(nèi)生理相關性的探索。這篇綜述專注于EV的特性和目前提出的形成,、定位和功能的機制,。該綜述描述了將外泌體定義為特定的分泌囊泡群體的物理性質(zhì),總結(jié)了其生物學效應,,特別是免疫系統(tǒng),,討論了分泌囊泡可能作為細胞間信使的潛在作用。
除運輸藥物進行疾病zhiliao之外,,外泌體還能進行免疫zhiliao,,外泌體免疫zhiliao和載藥zhiliao。進行免疫調(diào)節(jié)時,,外泌體通常運載TGF-β1,、粒細胞-巨噬細胞集落刺激因子(GM-CSF)或MAGE抗原等物質(zhì)。在這些研究中,,分泌外泌體的母代細胞往往選用具有很好抗原遞呈(antigenpresentation)能力的樹突細胞或者中流細胞,。Cao等采用鼠B淋巴瘤細胞作為母代細胞,通過熱處理的方式使淋巴瘤細胞分泌的外泌體含有更多的熱休克蛋白(HSP60和HSP90)和其他一些刺激免疫的分子,,如主要組織相容性復合物(MHC-I和MHC[1]II)以及CD40,、CD86等,與未熱處理的鼠B淋巴瘤細胞分泌的外泌體相比,,熱處理后分泌的外泌體可以增強對T細胞的激huo能力,,從而增強這種基于外泌體的疫苗的抗中流能力。超速離心法,,這是目前外泌體提取較常用的方法,。
外泌體開始被認為是細胞排出代謝廢物的一種方式,能夠幫助缺乏高效降解能力或位于排泄系統(tǒng)的細胞排出不必要的蛋白質(zhì)和RNA。近年來,,隨著人們對外泌體的深入了解,,外泌體的多種生物功能先后被發(fā)現(xiàn)。如今外泌體作為一種細胞間交流,、傳遞大量的生物功能分子的重要方式日益受到重視,。外泌體與受體細胞的信息交流可能通過以下4種途徑實現(xiàn):(1)外泌體表面膜蛋白質(zhì)被目的細胞表面的受體識別,從而激huo靶細胞;(2)外泌體在蛋白酶作用下產(chǎn)生的表面膜蛋白質(zhì)碎片可作為目的細胞表面受體的配體;(3)外泌體脂膜可以與目的細胞膜融合,,將蛋白質(zhì)和RNA等內(nèi)容物釋放進去,,此類膜融合可能改變靶細胞的一些膜特性,例如脂質(zhì)和膜蛋白質(zhì)的密度及種類;(4)目的細胞通過胞吞的形式攝入外泌體,。外泌體被工程化改造后,,具有靶向特定細胞類型或組織的功能。淚液外泌體
因外泌體內(nèi)含mRNA,、microRNA等核酸和蛋白質(zhì)對相鄰細胞具有交換信息的功能,。外周血提取試劑盒公司
外泌體大小不均可能是由于MVB的限制膜不均勻內(nèi)陷,導致流體和固體的總含量不同,;細胞的微環(huán)境和固有的生物學特性可能會影響外顯體的含量及其生物學標記,,如乳腺病細胞及其外泌體的蛋白質(zhì)組可以顯示來源細胞是上皮樣細胞還是間充質(zhì)樣細胞,;由于細胞表面受體表達的不同,,外泌體對受體細胞的影響可能不同,可能誘導細胞存活,,也可能誘導凋亡,,或誘導免疫調(diào)節(jié)等;異質(zhì)性也可以基于外泌體起源的組織,,包括它們是否來自病細胞,,瘤細胞產(chǎn)生的外泌體傳遞致瘤miRNAs明顯促進瘤細胞增殖。外周血提取試劑盒公司
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