人體內(nèi)多種細(xì)胞在正常及病理狀態(tài)下均可分泌外泌體，包括干細(xì)胞,、免疫細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞,、血小板及平滑肌細(xì)胞等,。外泌體被包裹在堅(jiān)硬的雙層膜中。雙層膜保護(hù)外泌體的內(nèi)容物,，使外泌體能夠在組織中長距離移動(dòng),。干細(xì)胞外泌體因在上皮組織的增殖、遷移、再生,、炎癥和瘢痕控制等方面的作用,，有望成為“無細(xì)胞的細(xì)胞治理”工具。干細(xì)胞來源的外泌體可通過囊泡,，將干細(xì)胞的精華部分——mRNA,、miRNA、IncRNA及蛋白質(zhì)等生物活性物質(zhì),，打包運(yùn)出干細(xì)胞體外,。通過“細(xì)胞間高速公路”來“快遞”到人體各個(gè)組織內(nèi)。外泌體天然的可以攜帶遺傳到靶細(xì)胞中,，從而在生物學(xué)和致病過程中誘導(dǎo)遺傳修飾,。外泌體翻譯

建立記錄各論文實(shí)驗(yàn)條件的數(shù)據(jù)庫也可作為規(guī)避混亂的方法之一。一方面,，隨著EV研究倍受世界矚目,，各國啟動(dòng)了大型研究項(xiàng)目。美國啟動(dòng)NIH戰(zhàn)略性大型項(xiàng)目（ExtracellularRNACommunication）,，國際厲害性學(xué)會(huì)——Gordon和KeystoneSymposia也從2016開始成立會(huì)議小組,。受到歐洲藥物研究開發(fā)公司“創(chuàng)新藥物倡議組織（IMI）”的支持推進(jìn)的CANCER-ID項(xiàng)目，也包含EV研究在內(nèi),。2017年日本選定了EV研究為文部科學(xué)省研究開發(fā)戰(zhàn)略的目標(biāo)之一,，期待會(huì)加速今后的研究發(fā)展。無論如何,，今后EV研究的根本就是必須有強(qiáng)有力的研究方法和技術(shù),，而PS親和法有望成為其中之一。乳液外泌體提取試劑盒方法與正常細(xì)胞來源外泌體在結(jié)構(gòu)分子上的差異倍受矚目,。

外泌體（Exosome）介導(dǎo)瘤細(xì)胞的增殖過程,。瘤細(xì)胞通過與自身微環(huán)境的信息交流促進(jìn)瘤細(xì)胞的增殖，而外泌體（Exosome）可以充當(dāng)這種信息載體,。當(dāng)細(xì)胞中出現(xiàn)基因突變時(shí),，外泌體（Exosome）會(huì)通過膜融合把這種突變信息傳遞至其他的正常細(xì)胞，從而導(dǎo)致原病基因的喚醒,、抗凋亡基因的表達(dá),，使瘤細(xì)胞獲得增殖特性。瘤細(xì)胞來源的外泌體（Exosome）還可以通過直接抑制免疫細(xì)胞,，促進(jìn)瘤細(xì)胞逃避免疫監(jiān)視,，為瘤細(xì)胞在體內(nèi)生長創(chuàng)造條件。然而,，雖然當(dāng)前外泌體生物學(xué)仍然不成熟,，但越來越多的興趣和資金投入必將加速外泌體基礎(chǔ)研究進(jìn)展和臨床轉(zhuǎn)化,。

外泌體中存在著某些特定的蛋白質(zhì)、脂質(zhì)和多糖,基于抗原–抗體特異性識(shí)別和結(jié)合作用原理,可將外泌體從其他組分中分離出來,。四次跨膜蛋白家族,、脂膜、膜聯(lián)蛋白,、上皮細(xì)胞黏附分子或肝素等都可以作為抗原,而捕獲外泌體的抗體可以附著在平板,、磁珠、二氧化硅,、樹脂,、膜親和過濾器、纖維素濾膜,、聚酰氨基胺樹狀聚合物表面和微流控器件上,。常用方法有酶聯(lián)免疫吸附法和磁珠法等。酶聯(lián)免疫吸附法使用聚苯乙烯微孔板作為抗體附著介質(zhì),其結(jié)果用吸光度值表示,該方法可以快速分析已知表面生物標(biāo)志物的表達(dá),也可以瞬時(shí)讀出外泌體的產(chǎn)量和特異性,。磁珠法多使用共價(jià)包覆鏈霉親和素的磁珠,與樣品一起孵育后可通過磁泳將被結(jié)合的外泌體從樣品組分中分離出來,。鑒于微米級(jí)磁珠可賦予更大的接觸面積,該方法不jin具有高度特異性,還具有比超速離心更高的外泌體產(chǎn)率。外泌體是具有生物活性的脂雙層囊泡,。

Exosome（外泌體）是由活細(xì)胞分泌小囊泡,，具有典型的脂質(zhì)雙分子層結(jié)構(gòu)；參與細(xì)胞之間的交流,，物質(zhì)的運(yùn)輸以及正常生理過程的維持,，此外還與疾病的產(chǎn)生有關(guān)。對(duì)分離的外泌體進(jìn)行體外標(biāo)記或示蹤,，有助于對(duì)外泌體的功能進(jìn)行進(jìn)一步的研究,。目前對(duì)于外泌體的標(biāo)記方法有很多種，包括親脂性的染料和膜滲透型的化合物等,。PKH67的體內(nèi)熒光半衰期為10-12天,。相比于PKH-67，PKH-26具有更長的半衰期,，標(biāo)記在兔紅細(xì)胞上的PKH26半衰期長達(dá)100天以上,。特別適用于體外增殖研究以及長期的體內(nèi)細(xì)胞跟蹤研究。需要開發(fā)大規(guī)模生產(chǎn)質(zhì)量可控的外泌體并快速純化外泌體的技術(shù)和策略,。乳液外泌體提取試劑盒方法

細(xì)胞表面受體表達(dá)不同,，外泌體對(duì)受體細(xì)胞的影響可能不同，可能誘導(dǎo)細(xì)胞存活,，也可能誘導(dǎo)凋亡或免疫調(diào)節(jié)等。外泌體翻譯

要使外泌體在臨床上得以更加廣fan的應(yīng)用,，仍然需要更加深入的研究:(1)外泌體的提純方式主要是超速離心,，這種提純方式效率較低,，耗費(fèi)時(shí)間長并且相對(duì)昂貴，并不適宜在臨床上應(yīng)用,。(2)外泌體雖然具有一定的靶向性,，但這種靶向性較弱，不足以解決中流的靶向zhiliao問題,。通過在外泌體表面表達(dá)特異性肽的方法可以為上述問題的解決提供較為有效的途徑,。(3)在外泌體的載藥fang式方面，現(xiàn)在常用的電穿孔法雖更具優(yōu)勢(shì),，但往往會(huì)對(duì)外泌體或藥物的完整性產(chǎn)生影響,，轉(zhuǎn)染外泌體法不能保證基因類藥物全部進(jìn)入外泌體內(nèi)而不是粘附在外泌體表面，存在著安全隱患,。(4)外泌體作為細(xì)胞分泌物質(zhì),，其本身可調(diào)性并不如脂質(zhì)體以及聚合物基藥物載體。外泌體翻譯

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