在血液和大多數(shù)體液（如尿液,、腦脊液,、唾液,、胸腹腔積液、羊水和乳汁等）中均可檢測到外泌體,。血液外泌體的檢測通常采用EDTA抗凝血分離的血漿，miRNA等一些微小RNA則采用血清樣本,。泌尿系統(tǒng)中存在大量的RNA水解酶可降解尿液中的裸miRNAs,，但外泌體外膜則可幫助RNA免于被降解，因此研究尿液外泌體miRNAs更具有應(yīng)用價值,。相較于血清中相關(guān)miRNA的水平,，腦脊液外泌體中的miR-21可作為膠質(zhì)瘤診斷和預(yù)后的指標，特別對預(yù)測中流復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移具有價值,。唾液樣本在安靜狀態(tài)下主要來源于舌下腺和頜下腺,，刺激狀態(tài)下則主要來源于腮腺。外泌體作為膜和細胞溶質(zhì)蛋白,、脂質(zhì)和RNA細胞之間傳遞的載體,。湖北鼻腔灌洗液外泌體

外泌體的提取方法：超速離心法，這是外泌體提取比較常用的方法,。超速離心法得到的外泌的體量比較多,，但是純度不足，電鏡鑒定時發(fā)現(xiàn)外泌體聚集成塊，由于微泡和外泌體沒有非常統(tǒng)一的鑒定標準,，也有一些研究認為此種方法得到的是微泡而不是外泌體,。過濾離心法，這種操作簡單,、省時,，不會影響外泌體的生物活性，但同樣存在純度不足的問題,。密度梯度離心法,，用此種方法分離到的外泌體純度高，但是前期的準備工作繁雜,，比較耗時,，量少。外泌體綜述外泌體觀察到它們可以在體內(nèi)刺激免疫應(yīng)答,。

干細胞外泌體可直接促進血管生成,改善大腦缺氧后的損傷,。因此，干細胞外泌體可用于中風(fēng)的治理,，改善神經(jīng)預(yù)后,，增加血管與神經(jīng)生成。干細胞外泌體對多種類型的免疫細胞均具有免疫調(diào)節(jié)作用,，包括樹突狀細胞,、T細胞、B細胞和巨噬細胞,。靜脈輸注干細胞外泌體可抑制CD4+T和CD8+T細胞的活化和浸潤,，從而延長GVHD小鼠模型的存活時間，并減少多個組織的病理損傷,。干細胞在人類健康領(lǐng)域所發(fā)揮出來的潛能,，令人驚嘆。而干細胞外泌體,，作為干細胞與其它組織細胞相互交流信息的載體,，儼然會成為生物醫(yī)學(xué)研究的新風(fēng)口之一。

中流細胞分泌的外泌體可以通過體液進入特定qi官,，建立有利于ai細胞生長的微環(huán)境,，包括促進受體細胞上皮細胞-間充質(zhì)轉(zhuǎn)化、引發(fā)炎癥,、促進血管生成,，為ai細胞的擴散形成有利條件。進一步研究發(fā)現(xiàn)中流細胞外泌體能夠引導(dǎo)ai癥轉(zhuǎn)移至特定qi官,，在膜表面特異性整合素的作用下,，中流細胞外泌體首先在特定的qi官累積,，引起受體qi官產(chǎn)生炎癥、生成血管,，形成有利于中流轉(zhuǎn)移的微環(huán)境,，使得中流細胞更容易轉(zhuǎn)移至該qi官。Maji等揭示了惡性中流細胞外泌體中的AnnexinⅡ蛋白能夠促進血管生成,，為中流轉(zhuǎn)移創(chuàng)造有利的微環(huán)境,。外泌體作為核酸分子的藥物載體主要用于基因治理。

外泌體是指包含了復(fù)雜RNA和蛋白質(zhì)的小膜泡(30-150nm),，現(xiàn)今,，其特指直徑在40-100nm的盤狀囊泡。多種細胞在正常及病理狀態(tài)下均可分泌外泌體,。其主要來源于細胞內(nèi)溶酶體微粒內(nèi)陷形成的多囊泡體,，經(jīng)多囊泡體外膜與細胞膜融合后釋放到胞外基質(zhì)中。現(xiàn)在外泌體特指直徑在40-100nm的盤狀囊泡,。多種細胞在正常及病理狀態(tài)下均可分泌外泌體,。其主要來源于細胞內(nèi)內(nèi)溶酶體微粒內(nèi)陷形成的多囊泡體，經(jīng)多囊泡體外膜與細胞膜融合后釋放到胞外基質(zhì)中,。干細胞外泌體通過改變細胞外基質(zhì),，改變受體細胞的轉(zhuǎn)錄組和蛋白質(zhì)組，調(diào)節(jié)細胞凋亡,，生長,，增殖和分化途徑。湖北鼻腔灌洗液外泌體

外泌體被工程化改造后,，具有靶向特定細胞類型或組織的功能,。湖北鼻腔灌洗液外泌體

研究采用蔗糖密度梯度離心聯(lián)合2次PEG6000沉淀，極大地降低了外泌體的提取成本,，且獲得的外泌體不僅表達外泌體公認的標志蛋白分子,，同時也表達胎盤特異性蛋白分子，證明通過這種方法獲得的外泌體是胎盤來源外泌體,。通過蔗糖密度梯度離心后得到的外泌體沉淀經(jīng)蛋白質(zhì)SDS-PAGE膠電泳，銀染后可見各蛋白分子條帶清晰可見,，動態(tài)光散射分析粒徑,，結(jié)果顯示獲得的外泌體顆粒粒徑大部分分布于28-91nm之間，與文獻報道外泌體顆粒大小相一致,。胎盤外泌體經(jīng)過PKH67熒光染料染色后,，與細胞共孵育，熒光顯微鏡下觀察外泌體具備進入細胞的活性,，進一步驗證了我們應(yīng)用此種改良的分離方法可有效的獲得胎盤來源的外泌體,。本研究通過蔗糖密度梯度離心聯(lián)合2次PEG6000沉淀成功分離得到母體血清中胎盤來源外泌體,，并從蛋白標志分子、電鏡,、粒徑及分布,、進入細胞活性四方面對其進行了鑒定，為研究妊娠期間胎盤外泌體在正常妊娠及胎盤源性并發(fā)癥中的作用奠定了基礎(chǔ),。湖北鼻腔灌洗液外泌體

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