外泌體mirRNA和蛋白質(zhì)被認(rèn)為是NSCLC的預(yù)后因子。Dejima等在研究NSCLC患者預(yù)后的生物標(biāo)志物時(shí)發(fā)現(xiàn),，外泌體miR-4257和miR-21的含量顯著上升,。此外，還有研究表明,，低水平miR-146a-5p的NSCLC患者較高水平miR-146a-5p的NSCLC患者有更高的復(fù)發(fā)率,。Sandfeld-Paulsen等在研究276例NSCLC患者血漿的外泌體時(shí)發(fā)現(xiàn)，NY-ESO-1是單獨(dú)對(duì)低生存率有顯著影響的標(biāo)志物,。Silva等利用TaqMan低密度芯片的方法系統(tǒng)分析了28位NSCLC患者體內(nèi)的365種miRNA,，其中l(wèi)et-7f、miR-30e-3p和miR-20b表達(dá)均下調(diào),，進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn),，let-7f和miR-30e-3p水平可以區(qū)分早期和晚期NSCLC患者，高水平let-7f和miR-30e-3p與不良預(yù)后密切相關(guān),。外泌體在體液中十分穩(wěn)定,，同時(shí)外囊泡所含的蛋白質(zhì)和RNA被外泌體的脂質(zhì)雙層膜所包被也不會(huì)分解。吉林CD81外泌體慢病毒

在免疫系統(tǒng)中,，淋巴細(xì)胞,、樹突狀細(xì)胞、巨噬細(xì)胞,、肥大細(xì)胞等均可以產(chǎn)生外泌體,。研究表明免疫細(xì)胞來源的外泌體能夠明顯影響機(jī)體的免疫調(diào)節(jié)機(jī)制，包括調(diào)節(jié)抗原呈遞,、免疫激huo,、免疫監(jiān)督等。不同免疫細(xì)胞來源的外泌體功能不同,，以樹突狀細(xì)胞(該細(xì)胞具有免疫刺激能力,，是目前能夠激huo初始T細(xì)胞的抗原遞呈細(xì)胞)來源的外泌體為例,，其外泌體的免疫刺激作用取決于來源細(xì)胞的成熟狀態(tài)。成熟的樹突狀細(xì)胞外泌體內(nèi)包含能夠直接激huoT細(xì)胞的MHCclassⅠ和MHCclassⅡ,，共刺激分子如CD40,、CD8、CD86和熱激蛋白,，這些分子使樹突狀細(xì)胞來源的外泌體具有抗原呈遞,、調(diào)節(jié)免疫響應(yīng)的生物功能。吉林CD81外泌體慢病毒外泌體是一種由活細(xì)胞分泌的,，直徑約為40～160nm的具有雙層膜結(jié)構(gòu)的生物活性囊泡,。

Vlassov等人發(fā)表的一篇外泌體的提取方法及組成的專利文獻(xiàn)中介紹，通過終濃度為8%的PEG6000與生物體液共孵育14h后,，10000xg離心1h,，可將直徑在30-150nm之間，且包含豐富RNA的外泌體沉淀下來,。因此采用終濃度為8%的PEG6000沉淀血清中的外泌體,，為了進(jìn)一步純化胎盤相關(guān)外泌體，將獲得的包含外泌體的沉淀用PBS重新懸浮后,，加入非線性蔗糖密度梯度層,，10000xg超速離心5h，將分層液采用PEG6000進(jìn)行2次沉淀,。經(jīng)過多次實(shí)驗(yàn)反復(fù)驗(yàn)證,，確定同時(shí)表達(dá)外泌體標(biāo)志蛋白分子及胎盤特異性蛋白分子的胎盤來源外泌體所在密度層。

外泌體的提取方法：超速離心法,，這是外泌體提取比較常用的方法,。超速離心法得到的外泌的體量比較多，但是純度不足,，電鏡鑒定時(shí)發(fā)現(xiàn)外泌體聚集成塊,，由于微泡和外泌體沒有非常統(tǒng)一的鑒定標(biāo)準(zhǔn)，也有一些研究認(rèn)為此種方法得到的是微泡而不是外泌體,。過濾離心法,，這種操作簡(jiǎn)單、省時(shí),，不會(huì)影響外泌體的生物活性,，但同樣存在純度不足的問題。密度梯度離心法,，用此種方法分離到的外泌體純度高,，但是前期的準(zhǔn)備工作繁雜，比較耗時(shí),，量少,。外泌體在心臟修復(fù)中起著關(guān)鍵作用。

外泌體作為疾病診斷標(biāo)志物的潛在應(yīng)用依賴于基于外泌體的藥物遞送系統(tǒng)的技術(shù)突破,，要將其用于臨床治理,，外泌體的大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)面臨很大的挑戰(zhàn)。外泌體（exosome）是細(xì)胞分泌囊泡（extracellularvesicles）的一種亞型,，存在于生物體液中,，并參與多種生理和病理過程。外泌體被認(rèn)為是細(xì)胞間通信的一種新機(jī)制,，允許細(xì)胞交換蛋白質(zhì),、脂質(zhì)和遺傳物質(zhì)。過去,，細(xì)胞分泌的外泌體一度被認(rèn)為只是參與廢物排泄,；現(xiàn)在，隨著高通量蛋白質(zhì)組學(xué)和基因組學(xué)的發(fā)展,，外泌體被寬泛認(rèn)為是生物體內(nèi)細(xì)胞間短距離和長(zhǎng)距離交流的高度保守的途徑,，這種細(xì)胞間通信對(duì)于正常細(xì)胞和瘤細(xì)胞都是非常重要的。外泌體具有良好的生物兼容性,、穩(wěn)定性和內(nèi)在靶向性,，使其在藥物遞送方向大有潛力。北京干細(xì)胞外泌體

外泌體無法分析外泌體具有的生理功能,，也是兩種提取方法的問題所在,。吉林CD81外泌體慢病毒

由于特殊的結(jié)構(gòu)和循環(huán)方式，外泌體作為藥物運(yùn)輸?shù)妮d體具有獨(dú)特的優(yōu)勢(shì),。例如外泌體的尺寸分布能夠增強(qiáng)滲透滯留效應(yīng),，從而有選擇性地深入中流組織;其外層磷脂雙分子層可以保護(hù)內(nèi)容物不受各種生物酶的影響，維持各種生物分子的活性;外泌體普遍存在于各種體液和組織中,，其體積小,，結(jié)構(gòu)、組成與細(xì)胞膜類似,，導(dǎo)致外泌體可以在避開免疫系統(tǒng)監(jiān)督的同時(shí)深入組織內(nèi)部,，有較好的生物相容性;當(dāng)采用內(nèi)源外泌體時(shí)，能明顯降低其他藥物載體可能引起的有害免疫反應(yīng);除此之外,，某些細(xì)胞來源或經(jīng)特殊修飾過的外泌體具有良好的特異性,，可以與特定的qi官或組織結(jié)合。吉林CD81外泌體慢病毒

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